新一代萤光素酶报告基因检测系统——更简便、更灵敏、更精确

在传统报告基因检测系统中，大多数使用的是萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶闪光型(flash type)检测体系，但其发光信号的半衰期较短，稳定性不佳等缺点，会对实验结果和使用造成影响。针对传统闪光型萤光素的不足，翌圣生物经过潜心研究开发出新一代的操作更便捷、半衰期更长、稳定性更好的辉光型(glow type)萤光素酶检测系统，适用于如哺乳动物细胞、原生质体等样本。

萤光素酶报告基因检测检测原理示意图

以下是闪光型(flash type)与辉光型(glow type)对比情况：

闪光型(flash type)操作流程，较为繁琐

辉光型(glow type)操作流程，一步完成检测

Yeasen检测系统萤光强度和稳定性与P品牌相当

Yeasen检测系统和萤光素酶相互作用，萤光素发光淬灭效果与P品牌相当

A：室温条件（20-22℃）。反应组分如细胞裂解产物，底物工作液等都需要调整到室温，因为两种萤光素酶的反应速率是受温度影响，为了保证实验一致性，推荐反应室温调至室温。

A：1）萤火虫萤光素酶建议选取pGL-3或pGL-4或者自己构建的载体。

2）海肾萤光素酶建议选取pRL-TK或pGL-4载体或者自己构建相应的载体。建议优先选用中等强度的启动子（如TK），而不使用强启动子（如SV40、CMV），以免影响主报告基因的表达，或进行实验摸索选择合适的载体。

A：推荐对照组萤火虫和海肾萤光素酶的读值接近，或者海肾萤光素酶比萤火虫萤光素酶的读值略高。实际实验过程中，由于萤火虫萤光素酶质粒和海肾萤光素酶的质粒抽提的质量不一致，待检测目的调控元件的调控能力的不同等原因，我们推荐预实验优化萤火虫萤光素酶质粒和海肾萤光素酶质粒的共转染量。

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