AbMole CCK8科研-低氧诱导的心肌细胞凋亡受到银杏内酯B下调的microRNA-29的限制

AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：在心肌梗死引起的局部缺血方面，银杏内酯B与microRNA-29（miR-29）相关的功能机制。

银杏内酯B对心肌梗死引起的局部缺血具有保护作用。本研究寻求解决与microRNA-29（miR-29）相关的功能机制。在缺氧诱导之前，将大鼠心肌细胞（H9c2细胞）在银杏内酯B条件培养基中培养。为了构建miR-29过表达的细胞，将miR-29模拟物转染到H9c2细胞中。收获细胞用于通过CCK-8和FITC-Annexin V染色方法测定存活率和凋亡。免疫印迹用于鉴定凋亡标志物和信号转导剂。进行RT-PCR以研究miR-29表达。心肌细胞对缺氧凋亡敏感，而银杏内酯B通过增加存活率和抑制凋亡来增强心肌抵抗缺氧的能力。具体而言，银杏内酯B抑制Bax和切割caspase 3，而增强Bcl-2。银杏内酯B缓冲了缺氧诱导的miR-29的表达。但是，银杏内酯B在过表达miR-29的细胞中对存活率和凋亡具有轻微作用。同时，银杏内酯B触发了PI3 K和AKT的磷酸化，并诱导了Sp1，而在miR-29模拟物处理的细胞中这种有益作用被取消。

研究结果证实银杏内酯B可能通过抑制低氧凋亡而具有治疗意义。银杏内酯B引起的miR-29抑制可能是这种有益作用的基础。

Cell Counting Kit (Abmole，M4839)用来进行细胞活性检测。

在100微升培养基中转染的细胞以每孔5000个细胞的浓度在96孔板中生长。将细胞培养24小时以使其粘附。然后，将细胞在银杏内酯B条件培养基中孵育。将细胞暴露于低氧环境后，将10μl CCK-8试剂添加到每个孔中，通过在450nm的发射波长测定吸光度。结果表明凋亡显然是由O 2的缺乏引起的，这由细胞存活率的降低证明。

鸣谢：Dezhi Ren, et al. Cell Cycle. 2020 May;19(10):1067-1076.