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细胞简介
人胚肾细胞株293插入SV40 T-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。该细胞初始的名字293tsA1609neo，携带SV40复制序列，被用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白表达。
培养信息
细胞名称 | 293T，HEK-293T，人胚肾细胞 |
别称 | Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo |
种属来源 | Homo sapiens, human |
组织来源 | kidney; Embryo |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | 1级 |
传代比例 | 1:3-1:5 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长培养基 | 10% FBS、高糖DMEM、1% Penicillin-Streptomycin |
培养条件 | 气相：95% 空气、5% CO2；温度：37℃ |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO；液氮 |
支原体检测 | 阴性 |
STR鉴定结果 | D5S818: 8,9 D13S317: 12,14 D7S820: 11 D16S539: 9,13 vWA: 16,19 THO1: 7,9.3 Amelogenin: X TPOX: 11 CSF1PO: 11,12 |
293T培养注意事项
1．293T贴壁能力较弱，加液、换液、洗涤时，须动作轻柔，避免用液体直冲细胞，会造成细胞脱落。细胞生长不能过密，过密细胞容易脱落，脱落下来的细胞可以通过离心收集，使用胰酶消化后继续培养。
2．293T细胞状态直接影响病毒包装效率。当细胞传代次数过多、细胞增殖速度减缓、细胞贴壁能力非常弱（轻柔换液也能导致细胞半数脱落）时，说明细胞状态不好，会大幅降低病毒包装效率。
3．使用高糖DMEM培养293T，低糖DMEM或者DMEM/F12等含糖量低的培养基可能影响293T细胞的生长状态。
4．如果发生293T细胞不贴壁，漂浮在培养基中的现象，请确认所使用的DMEM中碳酸氢钠浓度及培养箱中CO2浓度。并参考以下培养体系：
① DMEM由1.5 g/L碳酸氢钠配制而成，使用5% CO2培养箱。
② DMEM由3.7 g/L碳酸氢钠配制而成，使用10% CO2培养箱。
当使用碳酸氢钠含量高的培养基时，必须将这些细胞在10% CO2中孵育，以便正确缓冲培养基。当培养基没有适当缓冲时，293T细胞虽然可以存活，但将无法粘附并保持漂浮在培养基中。
5．培养时可酌情使用预铺0.2%明胶的培养瓶/培养皿，若细胞状态好，可省略此步骤。
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