表观基因酶APOBEC 3A活性/抑制测定试剂盒--比色法检测,5小时内完成
- 武汉艾美捷科技有限公司2025年6月24日 3:49 点击:31
表观基因酶APOBEC 3A活性/抑制测定试剂盒--比色法检测,5小时内完成
Epigenase™ APOBEC3A活性/抑制检测试剂盒是一种完整的优化缓冲液和试剂套装,用于测量人类及其他哺乳动物细胞提取物或纯化的APOBEC3A酶的活性/抑制。该试剂盒可用于多种形式的样本,包括但不限于培养细胞、新鲜和冷冻组织。
艾美捷Epigentek-表观基因酶APOBEC 3A活性/抑制测定试剂盒(#P-3142-48)具有以下优势:
比色法检测,操作步骤简单,可在5小时内完成。
创新的试剂盒组成使得背景信号极低,使得检测过程简单、准确、可靠且一致。
可使用细胞/组织提取物以及纯化的APOBEC3A酶来检测体内和体外的APOBEC3A抑制剂效果。
新颖的检测原理实现了高灵敏度,纯化APOBEC3A酶的检测下限低至10纳克。
试剂盒包含检测标准品,用于定量APOBEC3A的特异性活性。
采用条带式微孔板格式,适用于手动或高通量分析。
原理与操作:
该试剂盒专为检测APOBEC3A活性/抑制而设计。在使用该试剂盒的检测中,独特的5mC(5-甲基胞嘧啶)底物被稳定地包被在条带孔中。活性的APOBEC3A能够结合并催化底物中的5mC转化为T(胸腺嘧啶)。未转化的5mC可以通过高亲和力的5mC抗体识别,并通过增强液增强免疫信号。未转化的5mC的比例或量与酶活性成反比,可通过类似ELISA的比色反应进行定量。
左图:使用Epigenase™ APOBEC3A活性/抑制检测试剂盒检测重组APOBEC3A的活性。不同浓度的重组人APOBEC3A酶被加入检测体系中。吸光度(OD)与APOBEC3A酶活性成反比。右图:将图4中显示的原始OD数据转换后的结果。
起始材料 :
输入材料可以是细胞提取物或纯化的APOBEC3A酶。每次检测所需的细胞提取物量为2微克至30微克,最佳范围为15-20微克。纯化酶的用量为10纳克至1微克,最佳范围为50纳克至200纳克,具体取决于酶的类型、纯度和催化活性。
运输与储存:
该试剂盒分两部分运输:第一部分在常温下运输,第二部分在4℃下使用冷冻冰袋运输。收到试剂盒后:(1)将A3AS、AAS、DA和ES置于-20℃避光保存;(2)将WB、A3AB、CA、DS和8孔检测条置于4℃避光保存;(3)将剩余组分(BS和SS)在室温下避光保存。
注意:使用前检查10倍洗涤缓冲液(WB)是否含有盐沉淀。如有沉淀,可在室温或37℃下加热并摇晃缓冲液,直至盐重新溶解。
如果储存得当,试剂盒的所有组分自发货之日起有效期为6个月。
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EpiQuik原位和非原位过氧化氢(H2O2)检测试剂盒--检测条件简单、可靠且一致
过氧化氢(H2O2)是一种在细胞氧代谢过程中产生的活性氧种类。异常的H2O2水平会导致氧化性细胞损伤,并促进炎症、缺血和神经退行性疾病等疾病的进展。过氧化氢是细胞或细胞器(如线粒体)释放的活性氧(ROS)的主要标志物。H2O2还可作为氧化酶活性(如NADPH和葡萄糖氧化酶)的指标,因为它们是氧化酶催化反应的副产物。因此,在各种生物样本中检测H2O2对于确定氧化应激如何在生理和病理条件下调节不同的细胞内信号通路至关重要。
EpiQuik™原位和离位过氧化氢(H2O2)检测试剂盒是一套完整的优化缓冲液和试剂套装,能够快速且灵敏地从各种样本中原位(活细胞)和离位(细胞/组织提取物和体液)准确测量过氧化氢。
艾美捷Epigentek-EpiQuik原位和非原位过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(#P-6005-096)具有以下优势:
操作流程快速,可在10分钟内完成。
均质荧光检测法适用于原位(活细胞)和离位(细胞/组织提取物或体液)H₂O₂检测,灵敏度极高,检测下限(LOD)约为0.03微摩尔或1皮克。
条带式微孔板格式,可通过手动或高通量分析实现灵活检测。
检测条件简单、可靠且一致。
原理与操作:
该试剂盒专为从各种样本中原位和离位检测过氧化氢而设计。在使用该试剂盒的检测中,H2O2检测探针荧光素10-乙酰基-3,7-二羟基苯并噁嗪与各种样本在条带孔中孵育。样本中包含的或生成的过氧化氢与H2O2检测探针反应,产生高荧光强度的氧化产物。通过测量氧化产物的荧光强度,可以定量H2O2的量或浓度,荧光强度与H2O2的量或浓度成正比。
左图:EpiQuik™原位和离位过氧化氢(H2O2)检测试剂盒示意图
右图:使用H2O2检测标准品生成的标准曲线图。
起始材料:
起始材料可以包括活细胞、各种组织或细胞样本的提取物(如培养瓶或微孔板中的细胞)、培养上清液、血浆/血清和尿液样本等。
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EpiQuik 8-OhG RNA损伤定量直接试剂盒(比色法)适用于任何物种的通用阳性和阴性对照
8-羟基鸟苷(8-OhG或8-oxoG)是鸟苷的氧化衍生物,由细胞RNA中的羟基自由基、单线态氧和单电子氧化剂生成。作为一种修饰的核苷酸碱基,8-OhG不仅因其含量丰富而重要,还因为它在RNA合成过程中发生的突变性错配可能会导致基因表达错误。8-OhG还通过影响染色质修饰参与基因激活/抑制的表观遗传调控。与细胞内通过碱基切除修复途径快速修复的氧化DNA不同,氧化RNA在氧化应激短暂冲击后可在细胞中停留数小时,RNA上的这些氧化标记可以被识别为细胞死亡的早期指标。研究表明,8-OhG水平的增加与暴露于有害环境因素(如电离辐射、工业化学品、空气污染、吸烟和癌症化疗)密切相关。此外,还已证实8-OhG浓度的增加与多种与年龄相关的疾病(包括癌症、冠心病、糖尿病和阿尔茨海默病等神经退行性疾病)在病理上有联系。与主要反映全身氧化损伤与修复速率平衡的尿液8-OhG检测相比,直接定量正常和疾病状态下不同细胞/组织中的8-OhG含量将能够识别RNA的组织特异性氧化损伤。因此,可以获得更有用的信息,以更好地理解氧化损伤与疾病之间的关系,这有助于疾病的诊断和治疗。
EpiQuik™ 8-OhG RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)是一套完整的优化缓冲液和试剂套装,用于直接检测从任何物种(如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒)分离的RNA的氧化RNA损伤(8-OhG)状态,形式包括但不限于培养细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织和体液样本。
艾美捷Epigentek-EpiQuik 8-OhG RNA损伤定量直接试剂盒(比色法)(#P-6008-96)具有以下优势:
比色法检测,操作步骤简单方便,快速高效。整个过程可在3小时内完成。
高灵敏度,检测下限低至2皮克的8-OhG。
高特异性,仅在样本RNA的指示浓度范围内检测8-OhG。
直接检测完整的RNA中的8-OhG,消除了高分子化合物(如碳水化合物和蛋白质)的干扰,这些干扰在竞争性8-OhG检测中经常出现。
高度便捷的检测方法,直接使用从细胞或组织中分离的RNA,无需RNA消化或水解。
包含适用于任何物种的通用阳性和阴性对照,用于定量8-OhG。
条带式微孔板格式,适用于手动或高通量分析,使检测更加灵活。
检测条件简单、可靠且一致。
原理与操作:
该试剂盒包含用于定量氧化RNA损伤(8-OhG)所需的所有试剂。在该检测中,RNA被结合到经过特殊处理以具有高RNA亲和力的条带孔中。通过捕获和检测抗体检测8-OhG。检测到的信号被增强,然后通过在微孔板分光光度计中读取吸光度进行比色定量。8-OhG的量与测量的吸光度强度成正比。
左图:EpiQuik™ 8-OhG RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)示意图
右图:将不同浓度的8-OhG标准对照品加入检测孔中,然后使用EpiQuik™ 8-OhG RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)进行测量。
起始材料与输入量:
所需的输入材料是RNA,可以从各种组织或细胞样本中分离,例如培养瓶或微孔板中的细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织、血液、体液样本等。每次检测所需的RNA量为100纳克至300纳克。为了最佳定量,输入RNA量应为300纳克,因为基础8-OhG通常少于总RNA的0.01%。
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EpiQuik亚硝化(8-硝基鸟嘌呤)DNA/RNA损伤定量试剂盒(比色法):适用于手动或高通量分析
8-硝基鸟嘌呤(8-NG)是一种由活性氮种类(RNS)引起的突变性DNA/RNA损伤。作为一种修饰的核苷酸碱基,8-NG因其含量丰富以及在DNA复制时通过G到T的转换突变所表现出的突变潜力而被认为很重要。8-NG还通过引起DNA断裂形成单链DNA参与基因激活/抑制的表观遗传调控。此外,研究表明,8-NG浓度的增加与多种炎症相关疾病(包括癌症)在病理上有联系。比较尿液/血清中的8-NG检测主要反映了全身亚硝化损伤与修复速率之间的平衡。然而,直接定量正常/疾病状态下不同细胞/组织中的8-NG含量可以识别DNA/RNA的组织特异性亚硝化损伤。因此,这种方法提供了更有用的信息,以更好地理解亚硝化损伤与疾病之间的关系,从而有助于疾病的诊断和治疗。
EpiQuik™亚硝化(8-硝基鸟嘌呤)DNA/RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)是一套完整的优化缓冲液和试剂套装,用于直接比色检测和定量从任何物种(如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒)分离的DNA/RNA的亚硝化DNA/RNA损伤(8-硝基鸟嘌呤,8-NG)状态,形式包括但不限于培养细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织和体液样本。
艾美捷Epigentek-EpiQuik亚硝化(8-硝基鸟嘌呤)DNA/RNA损伤定量试剂盒(比色法)(#P-6009-48)具有以下优势:
比色法检测,操作步骤简单方便,快速高效。整个过程可在3小时内完成。
高灵敏度,检测下限低至2皮克的8-NG。
高特异性,在样本DNA的指示浓度范围内仅检测8-NG,不与其他物质如8-OhG、8-OHdG、dG、鸟嘌呤发生交叉反应。
直接检测完整的DNA或RNA中的8-NG,消除了高分子化合物(如碳水化合物和蛋白质)的干扰,这些干扰在竞争性8-NG检测中经常出现。
检测水平与高效液相色谱(HPLC)或液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析高度相关且接近。
高度便捷的检测方法,直接使用从细胞或组织中分离的DNA或RNA,无需DNA/RNA消化或水解。
包含适用于任何物种的通用阳性和阴性对照,用于定量8-NG。
条带式微孔板格式,适用于手动或高通量分析,使检测更加灵活。
检测条件简单、可靠且一致。
原理与操作:
该试剂盒包含用于定量氧化RNA损伤(8-OhG)所需的所有试剂。在该检测中,RNA被结合到经过特殊处理以具有高RNA亲和力的条带孔中。通过捕获和检测抗体检测8-OhG。检测到的信号被增强,然后通过在微孔板分光光度计中读取吸光度进行比色定量。8-OhG的量与测量的吸光度强度成正比。
左图:EpiQuik™ 8-OhG RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)示意图
右图:将不同浓度的8-OhG标准对照品加入检测孔中,然后使用EpiQuik™ 8-OhG RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)进行测量。
起始材料与输入量:
所需的输入材料是RNA,可以从各种组织或细胞样本中分离,例如培养瓶或微孔板中的细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织、血液、体液样本等。每次检测所需的RNA量为100纳克至300纳克。为了最佳定量,输入RNA量应为300纳克,因为基础8-OhG通常少于总RNA的0.01%。
https://www.amyjet.com/products/P-6009-48.shtml
Epigentek组蛋白 H3K4ac(乙酰化H3K4)多克隆抗体实验案例参考
组蛋白是核小体的核心成分。核小体包裹并压缩DNA形成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的可及性。组蛋白因此在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥核心作用。DNA的可及性通过一组复杂的组蛋白后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节。
艾美捷Epigentek-组蛋白 H3K4ac(乙酰化H3K4)多克隆抗体:
货号:A73685-100
结合形式:未结合
宿主:兔
缓冲液:PBS,含0.05% Proclin300和50%甘油,pH 7.3
物种:人、小鼠、大鼠、广谱
亚型:IgG
纯化方法:亲和纯化
免疫原:合成的人组蛋白H3 K4周围乙酰化肽(NP_003484.1)
运输:4℃运输
储存:-20℃保存,避免反复冻融
别名:H3.4、H3/g、H3FT、H3t、HIST3H3、组蛋白H3、HIST1H3A
应用领域:Western Blot(WB)、免疫荧光/免疫细胞化学(IF/ICC)、染色质免疫沉淀(ChIP)、酶联免疫吸附试验(ELISA)
推荐稀释比例:
WB:1:500 - 1:1000
IF/ICC:1:50 - 1:100
ChIP:每5-10微克染色质使用5微克抗体
ELISA:推荐起始浓度为1微克/毫升
优化说明:请根据具体实验需求优化抗体浓度。
实验案例:
左图:WesternBlot分析
样本:NIH/3T3细胞裂解液
抗体稀释比例:组蛋白H3K4ac(乙酰化H3K4)多克隆抗体,1:400
处理条件:NIH/3T3细胞用TSA(1微摩尔)在37℃处理18小时
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG(H+L),1:10000稀释
蛋白量:每泳道25微克
封闭液:TBST中含3%脱脂奶粉
曝光时间:60秒
右图:WesternBlot分析
样本:HeLa细胞裂解液
抗体稀释比例:组蛋白H3K4ac(乙酰化H3K4)多克隆抗体,1:400
处理条件:HeLa细胞用TSA(1微摩尔)在37℃处理18小时
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG(H+L),1:10000稀释
蛋白量:每泳道25微克
封闭液:TBST中含3%脱脂奶粉
曝光时间:60秒
Epigentek组蛋白H3K27ac(乙酰化H3K27)多克隆抗体解决方案
组蛋白H3K27ac(乙酰化H3K27)多克隆抗体。未结合。宿主:兔。
艾美捷Epigentek-组蛋白H3K27ac(乙酰化H3K27)多克隆抗体:
货号:A-4708-025
特异性:广谱、人、小鼠、大鼠
配方:缓冲液:pH7.3的PBS,含0.02%叠氮化钠和50%甘油。
亚型:IgG
纯化方法:亲和纯化
免疫原:合成的人组蛋白H3K27周围乙酰化肽(NP_003520.1)。
储存条件:4℃运输,20℃保存,避免反复冻融。
别名:H3t、H3.4、H3/g、H3FT、H3K27ac
应用领域:WesternBlot(WB)、免疫组化(IHC)、免疫荧光/免疫细胞化学(IF/ICC)、免疫沉淀(IP)、染色质免疫沉淀(ChIP)、染色质免疫沉淀测序(ChIPseq)、酶联免疫吸附试验(ELISA)
推荐稀释比例:
WB:1:1000–1:5000
IHC:1:50–1:200
IF/ICC:1:50–1:200
IP:每200400微克全细胞提取物使用0.54微克抗体
ChIP:每510微克染色质使用5微克抗体
ChIPseq:1:20–1:100
ELISA:推荐起始浓度为1微克/毫升
优化说明:请根据具体实验需求优化抗体浓度。
实验案例:
左图:WesternBlot分析
样本:NIH/3T3细胞裂解液
抗体稀释比例:组蛋白H3K27ac(乙酰化H3K27)多克隆抗体,1:2000
处理条件:NIH/3T3细胞用TSA(1微摩尔)在37℃处理18小时
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG(H+L),1:10000稀释
蛋白量:每泳道25微克
封闭液:TBST中含3%脱脂奶粉
曝光时间:1秒
右图:免疫组化分析
样本:石蜡包埋的人脾脏组织
抗体稀释比例:组蛋白H3K27ac(乙酰化H3K27)多克隆抗体,1:200
镜头:40倍
抗原修复:使用0.01M柠檬酸缓冲液(pH6.0)进行高压抗原修复,随后进行免疫组化染色。
组蛋白H4K79ac(乙酰化 H4K79)多克隆抗体,染色质调控与表观遗传研究利器
组蛋白是核小体的核心成分。核小体包裹并压缩DNA形成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的可及性。组蛋白因此在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥核心作用。DNA的可及性通过一组复杂的组蛋白后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节。
艾美捷Epigentek-组蛋白H4K79ac(乙酰化 H4K79)多克隆抗体:
货号:A-4053-100
结合形式:未结合
宿主:兔
形态:液体
防腐剂:0.03% Proclin 300,50%甘油,0.01M PBS,pH 7.4
物种:人
亚型:IgG
纯化方法:
亲和纯化
来源:人组蛋白H4中乙酰化赖氨酸(79)位点周围的肽段序列
运输:4℃(蓝冰)运输
储存:收到后,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融
应用领域:酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫细胞化学(ICC)、免疫荧光(IF)、染色质免疫沉淀(ChIP)
推荐稀释比例:
ICC:1:10 - 1:100
IF:1:1 - 1:10
实验案例:
左图:免疫细胞化学分析
抗体稀释比例:组蛋白H4K79ac(乙酰化H4K79)多克隆抗体,1:10
样本:HeLa细胞(用30 mM丁酸钠处理4小时)
检测系统:Leica Bond™系统
固定:4%甲醛固定
通透:0.2% Triton X-100
封闭:10%正常山羊血清,室温30分钟
一抗孵育:1% BSA,4℃孵育过夜
二抗检测:生物素标记的二抗,通过辣根过氧化物酶(HRP)偶联的SP系统显色
右图:免疫荧光染色
样本:HeLa细胞(用30 mM丁酸钠处理4小时)
抗体稀释比例:组蛋白H4K79ac(乙酰化H4K79)多克隆抗体,1:5
复染:DAPI
固定:4%甲醛固定
通透:0.2% Triton X-100
封闭:10%正常山羊血清
一抗孵育:4℃孵育过夜
二抗:Alexa Fluor 488偶联的AffiniPure山羊抗兔IgG(H+L)
MuERVL-Gag多克隆抗体,揭示内源性逆转录病毒的表达调控
当合子基因组首次转录时,大量逆转座子被表达,包括内源性逆转录病毒(ERVs)、LINE-1元件以及非自主性的SINE元件。MuERV-L/MERVL逆转录病毒样颗粒在二细胞(2C)阶段短暂去抑制,并产生3%的转录mRNA。在2C阶段之后,MERVL逆转座子的表达被沉默。研究发现,这种MERVL表达的调控模式与超过一百个2C特异性基因重叠,这些基因利用这些外源逆转录病毒的调控元件启动转录。。
艾美捷Epigentek-MuERVL-Gag多克隆抗体:
货号:A-2801-020
配方:1x PBS,pH 7.3;50%甘油;0.03% ProClin 300
特异性:小鼠
亚型:IgG
免疫原:Gag C末端残基内的合成肽
蛋白长度:581氨基酸(1746 bp基因大小)
纯化方法:亲和纯化
储存条件:解冻后于4℃保存。分装后可于-20℃(短期)或-80℃(长期)保存。避免反复冻融。
别名:小鼠内源性逆转录病毒-Gag,MERVL-Gag
应用:
数据库(DB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC);推荐稀释比例:DB(1:500-1:1000),IF(1:100 - 1:500),ICC(1:100-1:200)
实验案例:
左图:免疫荧光图像:使用MuERVL-Gag多克隆抗体在小鼠1-4细胞阶段的胚胎中进行表观荧光免疫荧光成像
右图:免疫细胞化学染色:在小鼠3细胞阶段胚胎中对MuERVL-Gag进行染色。细胞在4℃下与MuERVL-Gag多克隆抗体(红色显示,稀释比例1/100)孵育过夜,并使用鬼笔环肽(绿色显示)进行染色。细胞核DNA用DAPI标记(蓝色显示)
联系邮箱:kefu@labbase.net
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