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17种氨基酸标样图谱

赛智科技(杭州)有限公司2011年7月6日 13:18 点击:3818

一、溶剂配制
1、1mol/L(TEA)乙腈溶液:139μl TEA 乙腈 1ml
2、0.1mol/L(PITC)乙腈溶液:12μl PITC 乙腈 1ml
3、0.1mol/L HCl 溶液的配制:0.9ml HCl 水 100ml

二、样品溶液的衍生
分别取对照品和0.1mol/L HCl溶液各200μl,分置于一1ml离心管中,加0.1mol/L异硫氰酸苯酯(PIT C)乙腈溶液100μl,1mol/L三乙胺(TEA)100μl,混匀,室温放置1小时,加400μl正己烷萃取,静置10分钟,取下层溶液,0.45μm滤膜过滤,作进样液。

三、色谱条件
波 长:λ=254nm
柱 温:40℃
进样量:1μl
流动相:
A:  B:
按如下程序梯度洗脱:

 

四、梯度曲线图

17种氨基酸标样图谱

五、17种氨基酸标液图谱

17种氨基酸标样图谱
  

     按出峰顺序依次为:Asp; Glu; Ser; Gly; His; Arg; Thr; Ala;Pro;Tyr; Val; Met; Cys-Cys; Ile; Leu; Phe; Lys;
    正亮氨酸( Nle)在Leu和Phe之间;色氨酸(Trp)在Phe和Lys之间;40min处是衍生过程中产生的杂峰;46min处为衍生剂(异硫氰酸苯酯)峰。

 

 

(来源: 赛智科技(杭州)有限公司


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