气相色谱法测定无极膏中樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯、麝香草酚的含量

摘要: 目的　为了更好地控制无极膏产品质量, 完善和提高其质量标准。方法：用气相色谱法对其中的成分: 薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚进行含量测定; 色谱柱: 10%PEG- 20M 石英毛细管色谱柱, 柱温: 程序升温。结果：薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚在各自的浓度范围内线性关系良好。结论：本法快速、简便、准确, 可有效地控制无极膏的质量。

无极膏是由薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚等挥发性成分和激素丙酸倍氯米松制成的外用复方制剂。现行国家药品标准只对其挥发油总量进行测定, 为了更好地控制产品质量, 完善和提高其质量标准, 我们采用气相色谱法对其中的成分: 薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚进行含量测定, 取得了满意的效果。

1　仪器与试药

1.1　仪器　GC9800 气相色谱仪,N-2000 色谱工作站;
1. 2　试药　薄荷脑对照品、樟脑对照品、水杨酸酯对照品、麝香草酚对照品均由中国药品生物检定所提供; 无极膏及各种阴性对照品均由漳州无极药业有限公司提供; 萘、无水乙醇为分析纯。

2　方法与结果

2.1　色谱条件　色谱柱: 10% PEG-20M 石英毛细管色谱柱(0.32mm×30m, 0.25μm, 美国Agilent公司) ; 检测器: 氢火焰离子检测器; 柱温: 程序升温(起始温度150℃, 保持10min, 以10℃/min 的速率升至190℃, 保持1min, 再以20℃/min的速率升至240℃,保持10min);进样口及检测器温度: 240℃;理论塔板数按薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚计算应不低于5000。分离度应不小于4。
2.2　干扰试验　取阴性对照溶液与供试品溶液, 在上述色谱条件下测得的色谱图。结果在与薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚相同保留时间处, 供试品溶液出现对照品色谱峰, 阴性对照溶液无该色谱峰出现, 表明阴性对照无干扰, 因此可以进行含量测定。

2.3　溶液配制

2.3.1 　内标溶液的制备　精密称取萘1.5g, 置50mL 容量瓶中, 加无水乙醇至刻度, 摇匀, 制成浓度为30m g/mL的溶液。

2.3.2　对照品溶液的制备　精密称取薄荷脑对照品1.75g, 樟脑对照品2.80g, 水杨酸甲酯1.50g, 麝香草酚对照品0.125g, 置50mL 容量瓶中, 加无水乙醇至刻度, 摇匀, 制成对照品溶液。

2.4　校正因子的测定

　精密量取上述内标溶液和对照品溶液各1mL , 用无水乙醇稀释至10mL , 摇匀。按上述色谱条件测定, 计算各成分的校正因子(RSD)。薄荷脑为1.329(0.46% )、樟脑为1.372(0.20% )、水杨酸甲酯为2.077 (1.15% )、麝香草酚为1.251(1.88% )。

2.5 　线性关系

　精密量取对照品溶液0.6mL ,0.8mL , 1.0mL , 1.2mL , 1.4mL 置于10mL 容量瓶中, 各精密加入内标溶液1.0mL , 用无水乙醇稀释至刻度, 摇匀, 按上述色谱条件进样, 每次进样1μL , 以对照品含量为横坐标, 以对照品峰面积与内标峰面积之比为纵坐标, 绘制标准曲线并得到回归方程。结果表明薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚在各自的浓度范围内线性关系良好。

2.6　精密度试验

　精密量取对照品溶液1.0mL于10mL 容量瓶中, 用无水乙醇稀释至刻度, 摇匀。每次进样1μl, 连续进样5次, 记录各组分峰面积积分值,计算RSD。结果薄荷脑为0.24%、樟脑为0.39%、水杨酸甲酯为0.27%、麝香草酚为0.06%、。

2.7　重复性试验

　精密称取样品1. 0g, 加适量无水乙醇使溶解, 再精密加入内标溶液1mL , 稀释至10mL , 摇匀。按上述色谱条件连续测定6 次, 记录各组分峰面积积分值, 计算RSD, 结果薄荷脑为0.25%、樟脑为0.22%、水杨酸甲酯为0.15%、麝香草酚为0.03%。

2.8　回收率试验　

精密称取已测定含量的样品, 精密加入对照品溶液, 再各自精密加入内标溶液1.0mL , 用无水乙醇稀释至10mL , 摇匀。按上述色谱条件测定, 记录色谱图, 计算回收率.

2.9　稳定性试验　

取“重复性试验”项下样品液, 在室温下放置0h、2h、4h、6h、8h,按上述色谱条件试验, 记录峰面积, 其樟脑峰面积的RSD为0.43%、薄荷脑峰面积的RSD 为0.56%、水杨酸甲酯峰面积的RSD 为0.38%、麝香草酚峰面积的RSD 为0.67%。表明本品溶液稳定性较好。
2.10　样品含量测定　精密称取样品1.0g,加适量无水乙醇使溶解,再精密加入内标溶液各1mL ,稀释至10 mL,摇匀。另精密量取对照品溶液和内标溶液各1mL , 用无水乙醇稀释至10mL ,摇匀。按上述色谱条件测定并计算.

3　讨论

3.1　萘与被测物质峰具有良好的分离度, 故采用萘作为内标物。
3.2　现行国家药品标准只对其挥发油总量进行测定, 无法控制薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚的含量。本实验采用气相色谱法对其含量进行测定, 操作简便, 省时, 重现性好, 结果准确, 可更有效地控制无极膏的质量。
3.3　利用样品与对照品保留时间一致, 可同时对薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯、麝香草酚进行气相色谱鉴别。

参考文献

〔1〕国家药品标准WS1-(002)-92Z.