EpiQuik循环二甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法),高灵敏度快速检测
- 武汉艾美捷科技有限公司2025年7月16日 3:52 点击:26
EpiQuik循环二甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法),高灵敏度快速检测
表观遗传激活或失活在许多重要人类疾病中起着关键作用,尤其是在癌症中。
表观遗传基因失活的主要机制是DNA甲基转移酶引起的基因组DNA中CpG岛的甲基化。组蛋白甲基转移酶(HMTs)通过染色质依赖的转录抑制或激活来控制或调节DNA甲基化。HMTs将1-3个甲基基团从S-腺苷-L-蛋氨酸转移到组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上。NSD1和SMYD2是主要的组蛋白甲基转移酶,它们催化哺乳动物细胞中组蛋白H3在赖氨酸36(H3K36)上的二甲基化。JHDMs和JMJDs是主要的组蛋白去甲基化酶,它们能够使H3K36去甲基化。H3K36me2一直被视为转录激活基因的标志性标记,它仅存在于启动子下游的5'区域。H3K36me2的水平也可以通过抑制或激活HMTs而改变。在血浆或血清中检测到的循环H3K36me2已被证明是许多不同疾病或病理变化(如癌症进展)的标志物。因此,检测循环H3K36me2能够为更好地理解基因激活和沉默的表观遗传调控、与组蛋白修饰相关的病理过程、疾病相关生物标志物的筛选以及开发针对组蛋白修饰的药物提供有用信息。
EpiQuik™循环二甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)是一种方便的工具包,允许实验者从生物液体样本(如人类、小鼠或大鼠的血浆和血清)中特异性地检测循环二甲基组蛋白H3K36(H3K36me2)。
艾美捷EpiQuik循环二甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3128-48)优势与特点:
快速高效的实验流程,可在 2.5 小时内完成。
高灵敏度和特异性。检测限低至 0.5 ng/孔,血浆/血清在指定量范围内(1-20 ng/孔)的动态范围。仅识别 H3K36me2,与未修饰的 H3 或同一赖氨酸位点的其他修饰无交叉反应。
方便地包含对照,用于H3K36me2的定量。
条带微孔板格式使实验具有灵活性:可手动或高通量操作。
简单、可靠且一致的实验条件。
图:从HL-60细胞中使用EpiQuik™总组蛋白提取试剂盒(产品编号:OP0006)制备组蛋白提取物,并将其以不同浓度加入牛血浆中。随后利用EpiQuik™循环二甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)测定了H3K36me2的含量。
原理与操作流程:
本试剂盒用于测量血浆或血清中的总H3K36me2。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中二甲基化于K36的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K36me2抗体的条带孔捕获。捕获的H3K36me2蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K36me2的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K36me2的绝对量。
起始材料:
起始材料应为血浆或血清。每次实验所需的血浆或血清量为10至40ul,最佳量为30 ul。
https://www.amyjet.com/products/P-3128-48.shtml
EpiQuik循环三甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法),助力表观遗传激活研究
表观遗传激活或失活在许多重要人类疾病中起着关键作用,尤其是在癌症中。
表观遗传基因失活的主要机制是DNA甲基转移酶引起的基因组DNA中CpG岛的甲基化。组蛋白甲基转移酶(HMTs)通过染色质依赖的转录抑制或激活来控制或调节DNA甲基化。HMTs将1-3个甲基基团从S-腺苷-L-蛋氨酸转移到组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上。SETD2和NSD2是主要的组蛋白甲基转移酶,它们催化哺乳动物细胞中组蛋白H3在赖氨酸36(H3K36)上的三甲基化。JHDMs和JMJDs是主要的组蛋白去甲基化酶,它们能够使H3K36去甲基化。H3K36me3一直被视为转录抑制基因的标志性标记,它仅存在于启动子下游的5'区域。H3K36me3的水平也可以通过抑制或激活HMTs而改变。在血浆或血清中检测到的循环H3K36me3已被证明是许多不同疾病或病理变化(如癌症进展)的标志物。因此,检测循环H3K36me3能够为更好地理解基因激活和沉默的表观遗传调控、与组蛋白修饰相关的病理过程、疾病相关生物标志物的筛选以及开发针对组蛋白修饰的药物提供有用信息。
EpiQuik™循环三甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)是一种方便的工具包,允许实验者从生物液体样本(如人类、小鼠或大鼠的血浆和血清)中特异性地检测循环三甲基组蛋白H3K36(H3K36me3)。
艾美捷EpiQuik循环三甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3130-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在2.5小时内完成。
2、高灵敏度和特异性。检测限低至0.5 ng/孔,血浆/血清中指示量范围内的动态范围为1-20 ng/孔。仅识别H3K36me3,与未修饰的H3或其他同一赖氨酸位点的修饰物无交叉反应。
3、方便地包含对照用于H3K36me3的定量。
4、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
5、简单、可靠且一致的实验条件。
图:从HL-60细胞中使用EpiQuik™总组蛋白提取试剂盒(产品编号:OP0006)制备组蛋白提取物,并将其以不同浓度加入牛血浆中。随后利用EpiQuik™循环三甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)测定了H3K36me3的含量。
原理与操作流程:
本试剂盒用于测量血浆或血清中的总H3K36me3。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中三甲基化于K36的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K36me3抗体的条带孔捕获。捕获的H3K36me3蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K36me3的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K36me3的绝对量。
起始材料:
起始材料应为血浆或血清。每次实验所需的血浆或血清量为10至40 µl,最佳量为30 µl。
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EpiQuik循环乙酰组蛋白 H3K9 ELISA试剂盒(比色法)定量H3K9ac的绝对量
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K9 ELISA试剂盒(比色法)是专为定量检测血浆和血清中的循环组蛋白H3K9ac而设计的。
艾美捷EpiQuik循环乙酰组蛋白 H3K9 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3132-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在2.5小时内完成。
2、高灵敏度和特异性。检测限低至0.5 ng/孔,在血浆/血清中指示量范围内的动态范围为1-20 ng/孔。仅识别H3K9ac,与未修饰的H3或其他同一赖氨酸位点的修饰物无交叉反应。
3、方便地包含对照用于H3K9ac的定量。
4、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
5、简单、可靠且一致的实验条件。
原理与操作流程:
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K9 ELISA试剂盒(比色法)是用于测量血浆或血清中总H3K9ac的。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中乙酰化于K9的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K9ac抗体的条带孔捕获。捕获的H3K9ac蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K9ac的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K9ac的绝对量。
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K9 ELISA试剂盒(比色法)的示意图
工作缓冲液和溶液的准备:
a. 准备稀释的WB(1倍洗液):
48次检测试剂盒:将13毫升的WB(10倍洗液)加入117毫升的蒸馏水中,并将pH值调整至7.2-7.5。
96次检测试剂盒:将26毫升的WB(10倍洗液)加入234毫升的蒸馏水中,并将pH值调整至7.2-7.5。
此稀释的WB(1倍洗液)现在可以在4℃下保存长达六个月。
b. 准备稀释的DAb溶液:
用稀释的WB(1倍洗液)按1:1000的比例稀释DAb(即,将1微升的DAb加入1000微升的稀释WB中)。每个检测孔需要50微升的稀释DAb。
c. 准备稀释的标准对照:
建议的标准曲线制备方法:首先,通过将5微升的标准对照加入5微升的HAB(组蛋白检测缓冲液)中,稀释标准对照至50纳克/微升;再通过将1微升的标准对照加入19微升的HAB中,稀释至5纳克/微升。然后,利用5纳克/微升和50纳克/微升的稀释标准对照与HAB进一步配制出七种浓度,最终浓度分别为0.5、1、2、5、10、20和50纳克。
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EpiQuik循环乙酰组蛋白H3K18 ELISA试剂盒(比色法)方便地包含对照用于H3K18ac的定量
表观遗传激活或失活在许多重要人类疾病中起着关键作用,尤其是在癌症中。
表观遗传基因失活的主要机制是DNA甲基转移酶引起的基因组DNA中CpG岛的甲基化。组蛋白乙酰转移酶(HATs)和去乙酰化酶(HDACs)通过染色质依赖的转录抑制或激活来控制或调节DNA甲基化。HATs将乙酰基团从乙酰辅酶A转移到组蛋白的赖氨酸残基上。P300是主要的HAT,它催化哺乳动物细胞中组蛋白H3在赖氨酸18(H3K18)上的乙酰化。HDACs和SIRT1/7是主要的组蛋白去乙酰化酶,它们能够使H3K18去乙酰化。H3K18ac一直被视为转录活性基因的标志性标记,它仅存在于启动子下游的5'区域。H3K18ac的水平也可以通过抑制或激活HATs或HDAC/SIRTs而改变。在血浆或血清中检测到的循环H3K18ac已被证明是许多不同疾病或病理变化(如癌症进展)的标志物。因此,检测循环H3K18ac能够为更好地理解基因激活和沉默的表观遗传调控、与组蛋白修饰相关的病理过程、疾病相关生物标志物的筛选以及开发针对组蛋白修饰的药物提供有用信息。
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K18 ELISA试剂盒(比色法)是专为定量检测血浆和血清中的循环组蛋白H3K18ac而设计的。
艾美捷EpiQuik循环乙酰组蛋白H3K18 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3134-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在2.5小时内完成。
2、高灵敏度和特异性。检测限低至0.5 ng/孔,在血浆/血清中指示量范围内的动态范围为1-20 ng/孔。仅识别H3K18ac,与未修饰的H3或其他同一赖氨酸位点的修饰物无交叉反应。
3、方便地包含对照用于H3K18ac的定量。
4、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
5、简单、可靠且一致的实验条件。
基本信息:
质量控制:每一批次的EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K18 ELISA试剂盒(比色法)均经过预设规格的测试,以确保产品质量的一致性。EpigenTek保证所有产品按照产品说明书中描述的方式发挥性能。
安全:在使用本产品时,需要穿戴合适的实验服、一次性手套,并佩戴适当的眼部保护装置。
产品更新:EpigenTek保留变更或修改任何产品的权利,以提升其性能和设计。本用户指南中的信息可能会随时更改,恕不另行通知。因此,在使用试剂盒时,请仅使用随试剂盒提供的用户指南。
使用限制:EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K18 ELISA试剂盒(比色法)仅供研究使用,不适用于诊断或治疗应用。
原理与操作流程:
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K18 ELISA试剂盒(比色法)是用于测量血浆或血清中总H3K18ac的。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中乙酰化于K18的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K18ac抗体的条带孔捕获。捕获的H3K18ac蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K18ac的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K18ac的绝对量。
图:从HL-60细胞中使用EpiQuik™总组蛋白提取试剂盒(产品编号:OP0006)制备组蛋白提取物,并将其以不同浓度加入牛血浆中。随后利用EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K18 ELISA试剂盒(比色法)测定了H3K18ac的含量。
运输与储存:
该试剂盒分两部分运输:第一部分在常温下运输,第二部分在4℃的冷冻冰袋中运输。收到试剂盒后:(1)将DAb和标准对照置于–20℃,避免光照;(2)将WB、HAB、DS、8孔检测条和对照检测条置于4℃,避免光照;(3)将剩余组分(SS和粘性覆盖膜)置于室温,避免光照。
当储存条件合适时,试剂盒的所有组分自发货之日起稳定期为6个月。
注意事项:(1)使用前检查WB(10倍洗液)中是否含有盐沉淀。如果有,请在室温或37℃下加热并摇晃缓冲液,直至盐重新溶解;(2)检查DS(显色液)中是否呈现蓝色,这表明溶液受到污染,不应使用。为了避免污染,在将DS加入检测孔之前,先将所需的DS量转移到一个次级容器(试管或小瓶)中。
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EpiQuik循环乙酰基组蛋白 H3K27 ELISA试剂盒(比色法)使用说明&注意事项
表观遗传基因失活的主要机制是DNA甲基转移酶引起的基因组DNA中CpG岛的甲基化。组蛋白乙酰转移酶(HATs)和去乙酰化酶(HDACs)通过染色质依赖的转录抑制或激活来控制或调节DNA甲基化。HATs将乙酰基团从乙酰辅酶A转移到组蛋白的赖氨酸残基上。P300是主要的HAT,它催化哺乳动物细胞中组蛋白H3在赖氨酸27(H3K27)上的乙酰化。HDACs和SIRTs是使H3K27去乙酰化的组蛋白去乙酰化酶。H3K27ac一直被视为转录活性基因的标志性标记,它仅存在于启动子下游的5'区域。H3K27ac的水平也可以通过抑制或激活HATs或HDAC/SIRTs而改变。在血浆或血清中检测到的循环H3K27ac已被证明是许多不同疾病或病理变化(如癌症进展)的标志物。因此,检测循环H3K27ac能够为更好地理解基因激活和沉默的表观遗传调控、与组蛋白修饰相关的病理过程、疾病相关生物标志物的筛选以及开发针对组蛋白修饰的药物提供有用信息。
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K27 ELISA试剂盒(比色法)是一种方便的工具包,允许实验者从生物液体样本(如人类、小鼠或大鼠的血浆和血清)中特异性地检测循环乙酰化组蛋白H3K27(H3K27ac)。
艾美捷EpiQuik循环乙酰基组蛋白 H3K27 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3136-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在2.5小时内完成。
2、高灵敏度和特异性。检测限低至0.5 ng/孔,在血浆/血清中指示量范围内的动态范围为1-20 ng/孔。仅识别H3K27ac,与未修饰的H3或其他同一赖氨酸位点的修饰物无交叉反应。
3、方便地包含对照用于H3K27ac的定量。
4、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
5、简单、可靠且一致的实验条件。
原理与操作流程:
本试剂盒用于测量血浆或血清中的总H3K27ac。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中乙酰化于K27的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K27ac抗体的条带孔捕获。捕获的H3K27ac蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K27ac的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K27ac的绝对量。
起始材料
起始材料应为血浆或血清。每次实验所需的血浆或血清量为10至40 µl,最佳量为30 µl。
图:从HL-60细胞中使用EpiQuik™总组蛋白提取试剂盒(产品编号:OP0006)制备组蛋白提取物,并将其以不同浓度加入牛血浆中。随后利用EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K27 ELISA试剂盒(比色法)测定了H3K27ac的含量。
使用说明:
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K27 ELISA试剂盒(比色法)适用于从人类、小鼠或大鼠的血浆和血清等生物液体样本中特异性地测量循环乙酰化组蛋白H3K27(H3K27ac)。每次实验所需的血浆或血清量为10至40 µl,最佳量为30 µl。由于不同个体以及正常和疾病状态下H3K27ac的含量可能不同,建议进行重复样本检测以确保信号的可靠性。鉴于血浆或血清中组蛋白H3的含量可能不同,我们强烈建议同时进行总组蛋白H3的平行测量,以提高H3K27ac定量的准确性。EpigenTek提供EpiQuik™循环总组蛋白H3定量试剂盒(比色法)(产品编号:P3091),可用于此目的。
注意事项:
为了避免交叉污染,请小心将样本或溶液加入条带孔中。使用防气溶胶的移液枪头,并在每次液体转移之间更换移液枪头。在整个实验过程中佩戴手套。如果手套与样本接触,请立即更换手套。
运输与储存:
该试剂盒分两部分运输:第一部分在常温下运输,第二部分在4℃的冷冻冰袋中运输。收到试剂盒后:(1)将DAb和标准对照置于–20℃,避免光照;(2)将WB、HAB、DS、8孔检测条和对照检测条置于4℃,避免光照;(3)将剩余组分(SS和粘性覆盖膜)置于室温,避免光照。当储存条件合适时,试剂盒的所有组分自发货之日起稳定期为6个月。
注意事项:
(1)使用前检查WB(10倍洗液)中是否含有盐沉淀。如果有,请在室温或37℃下加热并摇晃缓冲液,直至盐重新溶解;(2)检查DS(显色液)中是否呈现蓝色,这表明溶液受到污染,不应使用。为了避免污染,在将DS加入检测孔之前,先将所需的DS量转移到一个次级容器(试管或小瓶)中。
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EpiQuik循环乙酰组蛋白H3K56 ELISA试剂盒(比色法),组蛋白方案
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K56 ELISA试剂盒(比色法)是一种方便的工具包,允许实验者从生物液体样本(如人类、小鼠或大鼠的血浆和血清)中特异性地检测循环乙酰化组蛋白H3K56(H3K56ac)。
艾美捷EpiQuik循环乙酰组蛋白H3K56 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3138-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在2.5小时内完成。
2、高灵敏度和特异性。检测限低至0.5 ng/孔,在血浆/血清中指示量范围内的动态范围为1-20 ng/孔。仅识别H3K56ac,与未修饰的H3或其他同一赖氨酸位点的修饰物无交叉反应。
3、方便地包含对照用于H3K56ac的定量。
4、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
5、简单、可靠且一致的实验条件。
基本信息:
质量控制:每一批次的EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K56 ELISA试剂盒(比色法)均经过预设规格的测试,以确保产品质量的一致性。EpigenTek保证所有产品按照产品说明书中描述的方式发挥性能。
安全:在使用本产品时,需要穿戴合适的实验服、一次性手套,并佩戴适当的眼部保护装置。
产品更新:EpigenTek保留变更或修改任何产品的权利,以提升其性能和设计。本用户指南中的信息可能会随时更改,恕不另行通知。因此,在使用试剂盒时,请仅使用随试剂盒提供的用户指南。
使用限制:EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K56 ELISA试剂盒(比色法)仅供研究使用,不适用于诊断或治疗应用。
原理与操作流程:
EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K56 ELISA试剂盒(比色法)是用于测量血浆或血清中总H3K56ac的。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中乙酰化于K56的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K56ac抗体的条带孔捕获。捕获的H3K56ac蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K56ac的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K56ac的绝对量。
图:从HL-60细胞中使用EpiQuik™总组蛋白提取试剂盒(编号:OP0006)制备组蛋白提取物,并将其以不同浓度加入牛血浆中。随后利用EpiQuik™循环乙酰化组蛋白H3K56 ELISA试剂盒(比色法)测定了H3K56ac的含量。
组蛋白结合:
a. 预先确定实验所需的条带孔数量。建议进行重复样本检测(包括空白和阳性对照)以确保信号的可靠性。小心地从板架上移除不需要的条带孔,并将其放回袋子中(密封袋口并置于4℃保存)。
b. 空白孔:向每个空白孔中加入50 ul的HAB。
c. 标准孔:向每个标准孔中加入50 ul的HAB和1 ul的稀释标准对照,浓度范围为0.5 - 50 ng/ul(基于步骤1c中的稀释表;参见“建议的条带孔设置”部分下的表2作为示例)。
d. 样本孔:向每个样本孔中加入50 ul的HAB和30 ul的血浆或血清样本。
注意:请按照建议的孔设置图进行操作。
e. 用粘性覆盖膜紧密覆盖条带微孔板,以防止蒸发,并在37℃下孵育60分钟。
注意:可根据使用的条带数量,将粘性覆盖膜剪切成所需大小以覆盖条带。
f. 从每个孔中移除反应溶液。用稀释的WB(1倍洗液)每次150 ul,清洗每个孔三次。
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EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA Easy试剂盒(比色法)原理与操作流程
EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA简易试剂盒(比色法)是一套完整的优化缓冲液和试剂,允许实验者使用来自广泛物种的核提取物或纯化酶,以简便快捷的方式测量DNA甲基转移酶(DNMT)活性或抑制情况。这些物种包括哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒,形式多样,包括但不限于培养细胞以及新鲜和冷冻组织。该试剂盒即用型,提供了进行成功的DNMT活性/抑制实验所需的所有基本组分,无需放射性物质或任何特殊设备。
核提取物可以使用您自己成功的方法制备。为了方便您并获得最佳结果,EpigenTek还提供了一种与该试剂盒配套优化的核提取试剂盒。核提取物可以立即使用,或在–80℃下储存以供后续使用。纯化酶可以是重组蛋白中的活性DNMTs,也可以是从细胞/组织中分离出来的。
EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA简易试剂盒(比色法)是其前身试剂盒的进一步改进版本,通过简化步骤、显著减少检测时间和提高检测灵敏度来实现。
艾美捷EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA Easy试剂盒(比色法)(#P-3139-48)优势与特点:
1、快速:减少步骤,整个过程仅需2小时10分钟。
2、灵敏:检测限低至0.2纳克纯化酶,比前身试剂盒提高了十倍。
3、便捷:即用型,包含所有基本组分。无需放射性物质或任何特殊设备。
4、稳定:改进的试剂盒组分使检测具有更大的“信号窗口”,并减少了重复样本之间的变异。
5、灵活:96孔条带微孔板格式使检测适用于手动或高通量分析。EpiQuik核提取试剂盒也已针对该试剂盒进行了优化。
图:高灵敏度和特异性的证明通过使用DNA实现DNMT活性/抑制甲基化酶M.ssI与EpiQuik™DNMT的结合活性/抑制ELISA简易试剂盒(比色法)。
原理与操作流程:
该试剂盒包含测量DNMT活性或抑制所需的所有试剂。在此检测中,一种通用的DNMT底物被稳定地涂覆在微孔板孔中。DNMT酶将一个甲基基团从AdoMet转移到胞嘧啶上以甲基化DNA底物,而甲基化的DNA可以通过抗5-甲基胞嘧啶抗体进行识别。通过在微孔板分光光度计上以450纳米波长读取吸光度,通过类似ELISA的反应测量与酶活性成正比的甲基化DNA的比例或量。DNMT酶的活性与测量到的光密度强度成正比。
起始材料:
每次检测所需的核提取物量可在0.5微克到20微克之间,最佳范围为5微克到10微克。纯化酶的用量可在0.2纳克到100纳克之间,具体取决于酶的纯度和催化活性。
文献引用:
Omran MM et. al. (June 2025). Dual Targeting EZH2 and Histone Deacetylases in Human Uterine Sarcoma Cells Under Both 2D and 3D Culture Conditions. J Cell Mol Med. 29(11):e70626.
Omran MM et. al. (March 2025). Utilising Human Myometrial and Uterine Fibroid Stem Cell-Derived Three Dimentional Organoids as a Robust Model System for Understanding the Pathophysiology of Uterine Fibroids. Cell Prolif. :e70025.
Bai H et. al. (February 2025). MyD88 inhibitor TJ-M2010-5 alleviates spleen impairment and inflammation by inhibiting the PI3K/miR-136-5p/AKT3 pathway in the early infection of Trichinella spiralis. Vet Res. 56(1):28.
https://www.amyjet.com/products/P-3139-48.shtml
EpiQuik CRISPR/Cas9检测ELISA试剂盒(比色法),创新的比色法高通量检测
CRISPR(成簇规律间隔短回文重复序列)和Cas9(CRISPR相关系统或CRISPR相关蛋白9核酸酶)的发现,是细菌用来抵御外来DNA的一种防御机制,已被证明是基因编辑和基因组工程应用中靶向和修改遗传序列的无价工具。CRISPR/Cas9系统通过将RNA引导的Cas9核酸酶和适当的引导RNA(gRNA)送入细胞,实现对靶向基因组位点的序列特异性切割。此外,紧随特异性序列之后的原间隔相邻基序(PAM)序列对于Cas9核酸酶的成功结合是必需的。监测Cas9编辑蛋白的水平或在转染细胞中追踪Cas9编辑蛋白是重要且关键的,因为它可以告知转染效率并优化整个细胞群体中的编辑过程。
EpiQuik™ CRISPR/Cas9检测ELISA试剂盒(比色法)适用于使用纯化的Cas9核酸酶和从各种物种的组织和培养细胞中分离的全细胞提取物,特异性定量测量与CRISPR相关的蛋白9(Cas9和dCas9:化脓性链球菌)的量。
艾美捷EpiQuik CRISPR/Cas9检测ELISA试剂盒(比色法)(#P-4060-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在3小时内完成。
2、创新的比色法高通量检测,无需电泳即可定量测量Cas9蛋白量,特别适合筛选Cas9转染克隆。
3、高灵敏度和特异性。检测限低至0.1 ng/孔,在全细胞提取物中指示量范围内的动态范围为0.5-20 ng/孔。仅识别化脓性链球菌Cas9。
4、方便地包含对照用于Cas9量的定量。
5、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
6、简单、可靠且一致的实验条件。
原理与操作流程:
本试剂盒用于测量各种细胞和组织的全细胞提取物或纯化Cas9蛋白中的Cas9水平。在使用该试剂盒的实验中,样本中的Cas9蛋白被紧密且稳定地固定在条带孔上。随后,结合的Cas9蛋白可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。Cas9的比例与吸光强度成正比。通过与Cas9对照比较,可以定量Cas9的绝对量。
起始材料:
起始材料应为纯化的Cas9核酸酶或全细胞提取物。每次实验所需的全细胞提取物量可在0.5 µg到5 µg之间,最佳范围为1到2 ug。起始材料的总体积不应超过4 ul。
文献引用:
Rai MN et. al. (March 2025). Efficient mutagenesis and genotyping of maize inbreds using biolistics, multiplex CRISPR/Cas9 editing, and Indel-Selective PCR. Plant Methods. 21(1):43.
Sharma H et. al. (April 2023). A Scalable High-Throughput Isoelectric Fractionation Platform for Extracellular Nanocarriers: Comprehensive and Bias-Free Isolation of Ribonucleoproteins from Plasma, Urine, and Saliva. ACS Nano.
Baron et. al. (December 2021). Improved alpharetrovirus-based Gag.MS2 particles for efficient and transient delivery of CRISPR/Cas9 into target cells Molecular Therapy: Nucleic Acid.
https://www.amyjet.com/products/P-4060-48.shtml
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