流感病毒分离无血清培养基 NC0204

【流感病毒分离无血清培养基 NC0204   用途与描述】

在使用MDCK细胞培养分离流感病毒的操作中，该产品用于接种流感病毒后，维持MDCK细胞生长。

 特别说明：
1. 该产品在使用前需要添加终浓度为2ug/ml的TPCK-胰酶和双抗（青霉素终浓度100U/ml；链霉素100ug/ml）。
2. 在流感病毒分离中，需配套使用MDCK细胞无血清培养基（NC0201），方能在24h小时内观察到细胞病变和分离到流感病毒。

【流感病毒分离无血清培养基 NC0204   规格与保存】

【流感病毒分离无血清培养基 NC0204   主要成分】

 在基础培养基之上，添加了一些适合维持MDCK细胞生长和流感病毒快速复制需要的组分，以达到快速分离出流感病毒。

【流感病毒分离无血清培养基 NC0204   使用方法】

流感病毒的分离与培养

1） 选取融合度90％-100％且处于对数生长期的MDCK细胞，弃去培养液，用PBS或不含钙镁的Hank’s液清洗细胞2-3遍。

2）加入200 μL的流感病毒样本，温和摇动数次。

3）置于37℃，5% CO 培养箱中吸附1-2小时。

4）吸出接种物，加入6 mL该产品（使用前需要添加抗生素及终浓度为2ug/mL的TPCK-胰酶）于培养瓶中，
放置于33℃-35℃，5%CO₂ 培养箱中培养，每日观察病变。

5）当75%-100%的细胞出现病变时即可准备收获病毒。

6）温和摇动细胞瓶2-3次。将培养瓶中的病毒液置于15mL离心管中。

7）为了提高病毒滴度，可将离心管置于-70度冰箱或液氮上方反复冻融一到两次。

8）收获的病毒液可立即进行血凝试验，或负80度冰箱冷冻长期保存。

【MDCK细胞培养操作视频】

【MDCK细胞接种病毒后的细胞状态】

接种流感病毒后，无血清培养基对MDCK细胞维持能力强。

病毒接种24h时 MDCK细胞状态	未接种病毒， 24h时MDCK细胞状态	病毒接种48h时 MDCK细胞状态图片	未接种病毒， 48h时MDCK细胞状态