K09003C耐碱重组蛋白A琼脂糖凝胶4FF亲和层析填料

耐碱重组蛋白A琼脂糖凝胶4FF亲和层析填料

本公司利用基因工程技术改造原始蛋白A，从而实现重组蛋白A的耐碱特性。将此蛋白A与活化的琼脂糖微球4FF偶联得到的柱料，可用于从血清、腹水、细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。本品具有耐酸碱能力强、广谱IgG结合、高Fc段结合能力、高抗体吸附量等特点。
 

技术参数

配基：耐碱重组蛋白A
基质：活化的琼脂糖微球4FF
配基密度：不小于15 mg 耐碱protein A/mL填料
吸附载量：不小于60 mg 人 IgG/mL填料
亲和介质的颗粒大小：90 μm
最大流速：300 cm/h
最高耐压：0.3 MPa
pH稳定性：3~10（长时间）；2~12（工作pH）
耐碱能力：0.5 M NaOH冲洗200 h抗体吸附载量不降低
耐酸能力：pH 2.7甘氨酸缓冲液冲洗10 h抗体吸附载量不降低
使用温度：常温
 

成分

耐碱Protein A琼脂糖凝胶4FF            20%乙醇溶液

注意事项

1.使用前应将凝胶从冰箱中取出在室温下缓慢恢复到室温后装柱，以避免产生气泡影响柱效。
2.装柱时应使凝胶长径比处于5：3-2：1之间，长径比过大将导致洗脱峰拖尾，洗脱体积增大；长径比过小将导致样品与填料接触时间短，吸附不充分，填料吸附蛋白量小。
3.过柱上样时，若样品抗体浓度过高，应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/mL，以免上样浓度过高影响柱效。
4.可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高抗体结合量。
5.用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短，洗脱后尽快用中性缓冲液中和至pH中性，以延长介质使用寿命。
6.洗脱后，应立刻用中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性，以避免失活，保持抗体的生物活性。
7.填料使用后应用0.1 M 柠檬酸钠缓冲液（pH3.0）做再生处理，长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
8.柱料多次使用（一般使用10次以上）后，应进行充分洗涤和再生，即先用20%乙醇洗5个柱体积，再用70%乙醇洗5-10个柱体积，可洗去疏水性较强的蛋白质和脂类，避免介质的载量下降。

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