毛细管气相色谱法测定阿奇霉素中的丙酮残留量

　摘要：目的建立阿奇霉素中丙酮残留量的测定方法。方法采用毛细管气相色谱法，氢火焰离子化检测器(FID)，以N，N二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂，弹性石英毛细管柱DB624(30m×053mm，3μm)；柱温40℃维持10min，以40℃/min的速率升温至200℃，维持10min；载气：高纯氮气，线速度4ml/min；氢气：40ml/min；进样口温度250℃；检测口温度280℃；空气400ml/min；尾吹25ml/min；分流比2∶1；进样量1μl。结果加样回收率为9984%，RSD为087%。结论本法简便、灵敏、专属、准确，毒性小。

　　关键词：毛细管气相色谱法；阿奇霉素；丙酮；残留溶剂

　　阿奇霉素是新一代大环内酯类抗生素，在制备工艺中可能残留丙酮，中国药典2000年版规定阿奇霉素应做丙酮的残留量检查。药典规定用苯做溶剂来测定，但苯属于ICH规定的一类溶剂，毒性大，致癌性大，应该避免使用。本文采用毛细管气相色谱法，氢火焰离子化检测器(FID)，以N，N二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂，弹性石英毛细管柱DB624(30m×053mm，3μm)做丙酮的残留量检查的方法学考察，结果表明，该法简便、灵敏、专属、准确，毒性小，完全可以代替2000年版中国药典测定阿奇霉素中的丙酮残留量的方法。

　　1、仪器与试药

　　6890N气相色谱仪(安捷伦公司)配氢火焰离子化检测器(FID)；阿奇霉素原料药(批号040229，040333，040415)由宁波亚太药业有限公司提供；丙酮、DMF等有机溶剂均为分析纯。

　　2、色谱条件

　　色谱柱为弹性石英毛细管柱DB624(30m×053mm，3μm)；柱温40℃维持10min，以40℃/min的速率升温至200℃，维持10min；载气为高纯氮气，线速度4ml/min；氢气40ml/min；进样口温度250℃；检测口温度280℃；空气400ml/min；尾吹25ml/min；分流比2∶1；进样量：1μl。

　　3、方法与结果

　　3.1溶液的配制标准储备溶液精密称取丙酮02g，于100ml容量瓶中，用DMF定容。标准溶液取标准储备溶液0、10、20、30、40和50ml于200ml容量瓶中用DMF定容。样品溶液准确称取样品0400g于10ml容量瓶中，用DMF溶解并定容。

　　3.2标准曲线的制备及结果取上述系列标准溶液进样，以测得丙酮峰的峰面积对丙酮浓度作回归，得到的回归方程为y=44241x+15818r=09993

　　3.3检出限在上述色谱条件下，测得的丙酮最低检出限为2μg(S/N=3)。

　　3.4精密度与回收率对该方法的精密度和回收率测试进测试，加样回收率为9984%，RSD为087%(n=6)。

　　3.5样品测定测定结果见表1。

　　4、讨论

　　为保证样品中残留丙酮完全释放，必须选择合适的溶剂完全溶解待测样。阿奇霉素在水中几乎不溶，在甲醇、无水乙醇、稀盐酸中易溶。本实验曾尝试用顶空法，80℃恒温45min，以水为溶剂来测定样品中的表1样品测定结果(n=6)批号测定结果丙酮残留量，结果测得值明显偏低，说明样品在热水中的溶解度也是极小的，无法用水做溶剂来测定。药典规定的溶剂为苯，苯为致癌的有机溶剂，应尽量避免使用；用甲醇或无水乙醇作为溶剂，出峰时间比待测丙酮早且与丙酮峰距离太近，会干扰丙酮的检出，不予考虑；使用稀盐酸会影响毛细管柱的使用寿命，也不采用。根据ICH关于药品中溶剂残留量的指导原则，本文选择DMF为溶剂，结果令人满意。该实验也适用于所有不溶于水而溶于DMF的抗生素原料药中残留丙酮的检查，前提是原料药在精制过程中曾用过丙酮作为提取溶剂。