易于操作的SYBR Green检测冻干制剂/qPCR SybrMaster冻干品

易于操作的SYBR Green检测冻干制剂/qPCR SybrMaster冻干品

SYBR Green检测冻干制剂/qPCR SybrMaster冻干物：冻干实时聚合酶链式反应主混合物与SYBR 绿色荧光DNA染色。

SYBR Green检测冻干制剂/qPCR SybrMaster冻干液设计用于使用荧光DNA染色SYBR对DNA样本进行实时定量分析绿色主混合物中的荧光染料在PCR过程中插入扩增产物中，并且能够在不需要合成序列特异性标记探针的情况下快速分析靶DNA。它为在高达6个数量级的宽动态范围内定量样品DNA提供了一种易于操作和强大的工具，具有非凡的灵敏度和精度。冻干物在单个珠粒中包含qPCR所需的所有试剂（模板、引物和标记的荧光探针除外）。基于优化的热启动聚合酶的混合物的高特异性和敏感性。其活性在环境温度下被阻断，并在初始变性开始时自动开启。在PCR设置过程中，热激活可防止非特异性氰基化引物的延伸和引物二聚体在低温下形成。

艾美捷SYBR Green检测冻干制剂/qPCR SybrMaster冻干品（PCR-173S）：

内容：

qPCR Sybr Master 冻干粉包含抗体阻断的热启动聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP、KCl、(NH4)2SO4、MgCl2、SYBR Green DNA嵌入染料、添加剂和稳定剂以及PCR级水。

处理：

qPCR 主冻干粉以PCR反应管条或96孔板的形式交付，预装有完整的qPCR主混合物，以干燥、室温下稳定的格式。这种冻干粉结合了Z高的性能和使用的便利性及稳定性。无需进行冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤Z小化了错误或污染的风险。每个小瓶包含进行20 µl实时PCR检测所需的所有组分（除了引物和模板）。要执行PCR，只需将小瓶用引物混合物填充并加入DNA模板。这种冻干粉还可以与ROX参照染料一起使用，在兼容ROX信号评估的PCR仪器中。在这种情况下，ROX染料（#PCR-351）应以1倍浓度添加到PCR反应中。

运输：在常温下运输

储存条件：在常温下储存

附加储存条件：存放在镀铝袋中或干燥的地方。冻干粉在湿度水平超过70%时，打开密封可能会吸湿。

保质期：密封包装内12个月。

推荐的PCR检测冻干制剂：

制备引物混合物：为12个样本或4个样本的三重组合，按照规定准备13体积的引物混合物。使用无菌过滤头进行移液，并尽量减少标记的DNA探针暴露在光线下的时间。应在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。在所有应用中应包括无模板对照（NTC）。

分配主混合物：彻底振荡引物/探针混合物以确保均匀性。向每个PCR管或板孔分配15 µl。

添加模板DNA：向每个反应容器中添加5 µl的模板DNA（或无模板对照），并盖紧或密封管子/板。每个反应的最终浓度不要超过200 ng DNA。在循环前应对管子或板进行离心，以去除可能的气泡。

https://www.amyjet.com/products/PCR-173S.shtml

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ProbesMaster冻干制剂/qPCR探针主冻干物--易于操作且功能强大

qPCR ProbesMaster冻干液用于使用基于DNA探针的检测对DNA样本进行实时定量分析。建议将冻干物与双重标记荧光探针一起使用，例如TaqMan, 分子信标或FRET探针。它提供了一种易于操作且功能强大的工具，可在高达6个数量级的宽动态范围内以极高的灵敏度和精度对样本DNA进行定量。冻干物在单个珠粒中包含qPCR所需的所有试剂（模板、引物和标记的荧光探针除外）。基于优化的热启动聚合酶的混合物的高特异性和敏感性。其活性在环境温度下被阻断，并在初始变性开始时自动开启。在PCR设置过程中，热激活可防止非特异性氰基化引物的延伸和引物二聚体在低温下形成。

艾美捷ProbesMaster冻干制剂/qPCR探针主冻干物（PCR-156S）：

qPCR探针主冻干粉：包含抗体阻断的热启动聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP、KCl、(NH4)2SO4、MgCl2、添加剂和稳定剂以及PCR级水。

处理：qPCR主冻干粉以PCR反应管条或96孔板的形式交付，预装有完整的qPCR主混合物，以干燥、室温下稳定的格式。这种冻干粉结合了高性能与使用的便利性和稳定性。无需进行冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤Z小化了错误或污染的风险。每个小瓶包含进行20 µl实时PCR检测所需的所有组分（除了引物、双标记探针和模板）。要执行PCR，只需将小瓶用引物/探针预混液填充并加入DNA模板。这种冻干粉还可以与ROX参照染料一起使用，在兼容ROX信号评估的PCR仪器中。在这种情况下，ROX染料（#PCR-351）应以1倍浓度添加到PCR反应中。

双标记DNA探针：基于双标记DNA探针的实时PCR技术提供了一个高灵敏度和高特异性的PCR系统，具有多重能力。它需要两个标准的PCR引物和能够与扩增子内部部分杂交的DNA探针。双标记DNA探针的序列应避免二级结构和引物-二聚体形成。

引物/探针混合物的制备：在定量PCR反应中推荐制备引物/探针预混液，以减少移液误差。使用无菌过滤头进行移液，并尽量减少标记的DNA探针暴露在光线下的时间。应在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。在所有扩增中应包括无模板对照（NTC）。

推荐的PCR检测冻干制剂：

1) 每个引物的Z佳浓度可能从100到500纳摩尔(nM)不等。

2) 要获得Z佳结果，可能需要对DNA探针的浓度进行滴定，范围在50到800纳摩尔(nM)之间。

3) 退火温度取决于所使用的引物和DNA探针的熔解温度。

4) 延伸时间取决于扩增子的长度。建议对于Z长500碱基对(bp)的片段，使用1分钟的时间。

分配主混合物：将引物/探针混合物彻底振荡（Vortex）以确保均匀性。向每个PCR管或板孔分配15微升(µl)。

添加模板DNA：向每个反应容器中加入5微升(µl)的模板DNA（或无模板对照），并盖紧或封住管子/板。每个反应的最终浓度不要超过10纳克(ng) DNA。在循环前应对管子或板进行离心，以去除可能的气泡。

https://www.amyjet.com/products/PCR-156S.shtml

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高灵敏度和高特异性RT-qPCR探针主冻干物/RT-qPCR master mix

SCRIPT RT-qPCR探针Master冻干液设计用于在单管中方便地进行Z大灵敏度和特异性的RT-q聚合酶链式反应。该酶混合物基于具有增强的热稳定性的基因工程RT聚合酶，从而提高了特异性、更高的cDNA产量和对高度结构化的长cDNA片段的改进的效率。冻干物在一个试管中包含RTPCR所需的所有试剂（模板和引物除外），以确保用Z少的移液步骤快速简便地制备。优质的酶混合物、超纯的dNTP和优化的完全反应缓冲液确保了卓越的扩增结果。SCRIPT RT-qPCR ProbesMaster用于从单链RNA模板中扩增双链DNA。在RT步骤中，逆转录酶合成与RNA模板互补的单链DNA分子（cDNA）。在PCR步骤的第一个循环中，Taq DNA聚合酶合成与cDNA互补的DNA分子，从而产生双链DNA模板。在随后的循环中，DNA聚合酶以指数方式扩增这种双链DNA模板。在一步RT-qPCR中，在开始反应之前，将RT和PCR的所有组分混合在一个试管中，从而在不打开试管的情况下依次进行。当应用于分析来自多个RNA样本的单个靶标时，这提供了极大的便利，并将污染风险降至Z低。

艾美捷RT-qPCR探针主冻干物/RT-qPCR master mix（PCR-159S）：

SCRIPT RT-qPCR 探针主冻干粉：包含预装的SCRIPT逆转录酶、热启动聚合酶抗体+、dNTPs（去氧核苷酸三磷酸）、反应缓冲液、MgCl2和稳定剂的冻干粉。PCR级水。

处理：SCRIPT RT-qPCR 探针主冻干粉以PCR反应管条或96孔板的形式交付，预装有完整的qPCR主混合物，以干燥、室温下稳定的格式。这种冻干粉结合了高性能与使用的便利性和稳定性。无需进行冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤Z小化了错误或污染的风险。每个小瓶包含进行20 μl RT-qPCR检测所需的所有组分（除了引物和模板）。要执行检测，只需将小瓶用引物和RNA模板的混合物填充。

灵敏度：一般可以从10 pg至500 ng的polyA RNA或10 pg至1 μg的总RNA中检测到目标。即使是更少量的RNA，也可以通过使用高表达的转录本成功扩增。

RT-qPCR检测准备：

1. RNA/引物混合物的准备：将以下组分加入到无核酸酶的微管中，并通过轻轻上下移液进行混合：

2. 变性和引物退火（可选）：请注意：对于表现出高度二级结构的RNA靶标、自互补或交叉互补的引物以及新靶标的初始实验，特别推荐样本变性。对于许多标准的RNA和引物组合，即使省略热处理也不会对结果产生负面影响。将混合物在70°C下孵化5分钟，然后放置在室温下5分钟。

3. 分配主混合物：向每个含有冻干粉的管子或板孔分配20微升(µl)的RNA/引物混合物。

逆转录和热循环：将小瓶放入PCR循环仪中，并启动以下程序。

1) 建议进行10分钟的逆转录时间，以获得100至200碱基对(bp)之间的Z佳扩增子长度。更长的扩增子，达到500碱基对，可能需要延长孵化时间至15分钟。每增加100碱基对，增加3分钟。Z优温度取决于RNA的结构特征。对于具有高二级结构的难扩增模板，将温度提高到55°C。请注意，每个特定的RNA，应调整Z优的反应时间和温度。

2) 建议进行5分钟的初始变性时间，以灭活逆转录酶。

3) 退火温度取决于所使用的引物和DNA探针的熔解温度。

4) 延伸时间取决于扩增子的长度。建议对1,000碱基对的片段进行1分钟的时间。为了获得Z佳的特异性和扩增效果，可能需要对推荐的参数进行个别优化。请注意，每个特定的RNA/引物对，应调整Z优的反应时间和温度。

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Bst聚合酶/Saphir Bst GreenMaster冻干粉：快速、稳健扩增DNA

Saphir-Bst GreenMaster冻干液是一种冷冻干燥的主混合物，用于使用LAMP（环介导等温扩增）等温扩增DNA。该混合物基于Bst聚合酶的活性，是在恒定温度（60至65°C）下快速、稳健扩增DNA的理想选择。该酶显示出高转移置换活性，并产生高达109的扩增因子，这与PCR测定中的约.30个循环相当。Saphir-Bst GreenMaster冻干液允许在10-20分钟内检测目标基因。

艾美捷Bst聚合酶/Saphir Bst GreenMaster冻干粉（PCR-398S）：

内容：Saphir Bst Green 大师冻干粉含有Saphir Bst聚合酶、dNTPs（去氧核苷酸三磷酸）、反应缓冲液、绿色DNA嵌入染料、添加剂和稳定剂，以冻干形式提供，用于20微升Z终检测体积的PCR级水。

处理：Saphir Bst Green 大师冻干粉以8管条或96孔板的形式交付，预装有完整的主混合物，以干燥、室温稳定的格式。这种冻干粉结合了高性能与使用的便利性和稳定性。无需进行冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤Z小化了错误或污染的风险。每个小瓶包含进行20微升LAMP（环介导等温扩增）检测所需的所有组分（除了引物和模板）。要执行检测，只需将小瓶用引物混合物填充并加入DNA模板。这种冻干粉还可以与ROX参照染料一起使用，在兼容ROX信号评估的PCR仪器中。在这种情况下，ROX染料（#PCR-351）应以1倍浓度添加到PCR反应中。

检测设计：等温扩增是一种极其敏感的检测方法，应当注意避免实验设置区域和设备与之前反应的DNA发生污染。一个可能出现的问题是，由于携带污染或非特异性退火引物或引物二聚体形成，导致无模板对照中出现扩增。

引物设计：通常，使用4种不同的引物来识别6个不同的DNA区域，允许特定目标基因的扩增。额外一对引物可以进一步加速扩增，将总检测时间缩短至10-20分钟。由于反应序列复杂，手动设计引物可能具有挑战性。为了简化设计过程，建议使用引物设计软件。由于计算机设计的引物在灵敏度和非模板扩增方面可能会有所不同，建议在Z终选择之前评估2-4组真实引物集。

检测设置：使用无菌过滤头进行移液，并在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。所有扩增中都应包括无模板对照。首先，准备一个10倍浓度的引物预混合液。其次，设置等温扩增检测：

分配主混合物：将引物/探针混合物彻底振荡（Vortex）以确保均匀性。向每个PCR管或板孔分配20微升(μl)。

• 使用特定的等温扩增检测仪器或实时PCR循环仪来运行检测。

• 将仪器设置为在60至65°C之间的恒定孵化温度（取决于引物退火温度）。

• 以1分钟的间隔测量荧光强度，持续Z多30分钟。

运输：在常温下运输。

储存条件：在常温下储存。

附加储存条件：应存放在镀铝袋中或干燥的地方。当密封打开时，冻干粉在湿度水平超过70%的情况下可能会吸湿。

保质期：6个月。

相关产品：

Saphir Bst Polymerase, #PCR-389

Saphir Bst GreenMaster, #PCR-387

Saphir Bst GreenMaster high ROX, #PCR-388

https://www.amyjet.com/products/PCR-398S.shtml

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Saphir Bst Turbo GreenMaster冻干粉（Bst聚合酶）：超快速和稳健扩增DNA

Saphir-Bst-Turbo-GreenMaster冻干液专为等温扩增DNA而设计。这种混合物是基于下一代基因增强的Bst聚合酶。该混合物是在恒定温度（60至65°C）下超快速和稳健扩增DNA的理想选择。该酶显示出高链置换活性，并产生高达109的扩增因子，这在PCR测定中相当于大约.30个循环。聚合酶比Saphir-Bst聚合酶（#PCR-389/#PCR-388/#PCR-387）快2-3倍，并且允许在5-10分钟内检测靶基因。

艾美捷Saphir Bst Turbo GreenMaster冻干粉/Bst聚合酶（PCR-395S）：

Saphir Bst Turbo GreenMaster冻干粉：包含Saphir Bst Turbo 聚合酶、dNTPs（去氧核苷酸三磷酸）、反应缓冲液、绿色DNA嵌入染料、添加剂和稳定剂以及PCR级水。

处理：Saphir Bst Turbo Green 大师冻干粉以8管条或96孔板的形式提供，预装有完整的主混合物，以干燥、室温稳定的格式。这种冻干粉结合了高性能与使用的便利性和稳定性。无需进行冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤Z小化了错误或污染的风险。每个小瓶包含进行20 μl LAMP（环介导等温扩增）检测所需的所有组分（除了引物和模板）。要执行检测，只需将小瓶用引物混合物填充并加入DNA模板。这种冻干粉还可以与ROX参照染料一起使用，在兼容ROX信号评估的PCR仪器中。在这种情况下，ROX染料（#PCR-351）应以1倍浓度添加到PCR反应中。

检测设计：等温扩增是一种极其敏感的检测方法，应当注意避免实验设置区域和设备与之前反应的DNA发生污染。一个可能出现的问题是，由于携带污染或非特异性退火引物或引物二聚体形成，导致无模板对照中出现扩增。

引物设计：通常，使用4种不同的引物来识别6个不同的DNA区域，允许特定目标基因的扩增。额外一对引物可以进一步加速扩增，将总检测时间缩短至10-20分钟。由于反应序列复杂，手动设计引物可能具有挑战性。为了简化设计过程，建议使用引物设计软件。由于计算机设计的引物在灵敏度和非模板扩增方面可能会有所不同，建议在Z终选择之前评估2-4组真实引物集。

检测设置：

使用无菌过滤头进行移液，并在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。所有扩增中都应包括无模板对照。

首先，准备一个10倍浓度的引物预混合液。其次，设置等温扩增检测：

分配主混合物：将引物/探针混合物彻底振荡（Vortex）以确保均匀性。向每个PCR管或板孔分配20微升(μl)。

• 使用特定的等温扩增检测仪器或实时PCR循环仪来运行检测。

• 将仪器设置为在60至65°C之间的恒定孵化温度（取决于引物退火温度）。

• 以1分钟的间隔测量荧光强度，持续Z多30分钟。

运输：在常温下运输。

储存条件：在常温下储存。

附加储存条件：应存放在镀铝袋中或干燥的地方。当密封打开时，冻干粉在湿度水平超过70%的情况下可能会吸湿。

保质期：密封包装内6个月。

相关产品：

Saphir Bst Turbo Polymerase, #PCR-390

Saphir Bst Turbo GreenMaster, #PCR-393

Saphir Bst Turbo GreenMaster high ROX, #PCR-394

https://www.amyjet.com/products/PCR-395S.shtml

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Irgacure 5929光引发剂/Photoinitiator (365nm)，高效自由基光引发剂

IRGACURE 2959是一种的非黄变自由基光引发剂，用于紫外光固化系统，如水凝胶和生物墨水。Irgacure Z有效地通过365纳米波长的紫外光激活。由于Irgacure在水中不溶解（与LAP和钌不同），它必须在甲醇中溶解。

Irgacure 5929光引发剂被认为是非无菌的。建议向您的细胞培养系统中添加抗生素，或进行无菌过滤。进行无菌过滤时，重新悬浮所需数量的Irgacure，并通过0.2微米的小按钮过滤器过滤。请在2周内使用无菌光引发剂。此产品附带5克干粉。

Irgacure 5929光引发剂存储/稳定性：

产品装在凝胶包中运输。将产品存放在2-8°C。称量所需量的粉末进行溶解。一旦溶解后，请在2周内使用。

未溶解的干粉在2-8°C下稳定存放超过1年。

艾美捷Irgacure 5929光引发剂（ABM-5200-5GM）使用说明：

要溶解光引发剂，将Irgacure在纯甲醇中以10%的溶液（100 mg/ml）中溶解。注意：溶液中的光引发剂保质期为2周。只溶解所需的光引发剂量。将剩余的光引发剂（粉末或溶液）存放在2到10°C。

通过将所需总溶液体积（例如，甲基丙烯酰化胶原）乘以0.01，计算所需的光引发剂体积。例如，如果您正在制备10 ml的甲基丙烯酰化胶原，计算出的要添加的光引发剂体积为100微升。

将计算出的光引发剂体积添加到所需的交联溶液体积中，并彻底混合。

将您的细胞添加到预水凝胶/光引发剂溶液中。

将您的水凝胶/光引发剂/细胞溶液分配或生物打印到所需的培养容器中（例如6孔板，48孔板）。

对于紫外光交联，将预水凝胶/打印结构直接放置在365 nm紫外光交联源下。注意：更长时间的曝光允许更多的交联，尽管每种细胞类型承受不同程度紫外光和自由基曝光（由光引发剂产生）的耐受性，这些曝光介导了交联。

您可以调整光引发剂浓度、光强度和光交联时间，以定制最终水凝胶的硬度。

Irgacure 5929光引发剂Q & A：

您在Irgacure交联研究中使用了什么光强度？

在我们的实验室中，我们使用CL-1000 UVP交联仪进行我们的紫外光交联研究。CL-1000 UVP指南指出，能量大约是每平方厘米每分钟170,000微焦耳。样品通常距离光源约6厘米远。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5200-5GM.shtml

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LAP光引发剂 (405nm)，非无菌：水溶性、细胞相容的光引发剂

LAP是一种水溶性、细胞相容的光引发剂，用于水凝胶或生物墨水的聚合。由于其增加的水溶性、在365纳米光下增加的聚合速率，以及在400纳米处的吸收能力，允许使用可见光进行聚合，这种光引发剂比Irgacure 2959更适合生物应用。改进的聚合动力学使细胞包埋能够在较低的引发剂浓度和更长的波长光下进行，这已被证明可以减少引发剂毒性并增加细胞存活率。

LAP光引发剂 (405nm)，非无菌，500mg被认为是非无菌的。建议向您的细胞培养系统中添加抗生素，或进行无菌过滤。进行无菌过滤时，重新悬浮所需数量的LAP，并通过0.2微米的小按钮过滤器过滤。请在2周内使用无菌光引发剂。此产品附带500毫克的干粉。

LAP光引发剂 (405nm)，非无菌，500mg存储/稳定性：

产品装在凝胶包中运输。将产品存放在2-8°C。称量所需量的粉末进行溶解。一旦溶解后，请在2周内使用。

未溶解的干粉（非溶解的）在2-8°C下稳定存放超过1年。

艾美捷LAP光引发剂（ABM-5269-500MG）使用说明：

注：对于LAP，以下建议将产生大约0.03%的Z终LAP浓度。对于某些应用，如DLP打印，Z终LAP浓度应增加到大约0.25-0.5%。

1.通过将水凝胶溶液或生物墨水的体积乘以0.02来计算要添加的光引发剂体积。如果得出的数字是200微升，例如，您将添加200微升的LAP。

2.在1X PBS或细胞培养基中以17毫克/毫升的浓度溶解所需数量的LAP（步骤1）。

3.将计算出的光引发剂体积添加到所需的水凝胶或生物墨水溶液体积中，并彻底混合。

4.如果需要，将您的细胞添加到HA溶液中。

5.将您的溶液分配或生物打印到所需的培养容器中（例如6孔板，48孔板）。

6.对于光交联，将水凝胶溶液直接放置在405纳米光交联源下。

7.您可以调整光引发剂浓度、光强度和光交联时间，以定制Z终水凝胶的硬度。

LAP光引发剂 (405nm)，非无菌Q & A：

什么是与LAP交联的良好光源？

我们Z近一直在使用亚马逊上的这种现成的405nm蓝光（点击这里查看）。

对于我们Z初的使用甲基丙烯酰化水凝胶的LAP交联研究，这盏灯似乎效果很好，但我们正在努力验证这盏灯是否适用于组织工程和细胞培养目的（确认波长、光强度等）。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5269-500MG.shtml

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钌光引发剂/ Ruthenium Photoinitiator，可见光光交联试剂盒

LAP是一种水溶性、细胞相容的光引发剂，用于水凝胶或生物墨水的聚合。由于其增加的水溶性、在365纳米光下增加的聚合速率，以及在400纳米处的吸收能力，允许使用可见光进行聚合，这种光引发剂比Irgacure 2959更适合生物应用。改进的聚合动力学使细胞包埋能够在较低的引发剂浓度和更长的波长光下进行，这已被证明可以减少引发剂毒性并增加细胞存活率。

LAP光引发剂 (405nm)，非无菌，500mg被认为是非无菌的。建议向您的细胞培养系统中添加抗生素，或进行无菌过滤。进行无菌过滤时，重新悬浮所需数量的LAP，并通过0.2微米的小按钮过滤器过滤。请在2周内使用无菌光引发剂。此产品附带500毫克的干粉。

LAP光引发剂 (405nm)，非无菌，500mg存储/稳定性：

产品装在凝胶包中运输。将产品存放在2-8°C。称量所需量的粉末进行溶解。一旦溶解后，请在2周内使用。

未溶解的干粉（非溶解的）在2-8°C下稳定存放超过1年。

艾美捷钌光引发剂/ Ruthenium Photoinitiator（ABM-5248-1KIT）：

钌可见光光交联套件非常适合组织工程、细胞培养和生物打印，这些应用中需要调节基质的机械性能。该套件提供的光引发剂足够用于>200毫升的生物墨水/水凝胶（按照推荐的浓度）。

钌是一种利用可见光光交联（400-450纳米）来共价交联游离酪氨酸和丙烯酸基团的光引发剂。

钌光引发剂已在I型胶原、明胶、丝素蛋白、甲基丙烯酰化透明质酸、甲基丙烯酰化明胶、甲基丙烯酰化I型胶原和PEGDA上进行了测试。

钌是水溶性的，并且具有更好的细胞相容性和交联效率。

使用钌将可见光强度从3-100 mW/cm²增加并没有显著降低细胞存活率至90%以下。

将钌浓度增加10倍（10x）并没有降低细胞存活率至90%以下。

钌呈红色/黄色/橙色，并会改变您的溶液、水凝胶或打印构件的颜色。

这个钌可见光光交联套件被认为是非无菌的。建议向您的细胞培养系统中添加抗生素，或进行无菌过滤。进行无菌过滤时，分别重新悬浮整个体积的钌和过硫酸钠，并通过小的0.2微米按钮过滤器（分别）过滤。请在2周内使用无菌光引发剂。

钌可见光光交联套件由两个组分组成，如表1所示。

Item Catalog Number Package Size

Ruthenium Photoinitiator #5246 200 mg

Sodium Persulfate Photoinitiator #5247 1 gram

存储/稳定性：

产品在常温下运输。将套件存放在室温下。称量所需量的粉末进行溶解。一旦溶解后，请在2周内使用钌和过硫酸钠。

未溶解的干粉（非溶解的）在室温下稳定存放超过1年。

钌光引发剂使用说明：

1. 计算所需的水凝胶或生物墨水（ECM + 细胞）的体积。

2. 将所需体积乘以0.02。这是您将添加到预水凝胶溶液中的钌和过硫酸钠（每种）的数量。

3. 以37.4 mg/mL的浓度在水中或1X PBS中溶解所需的钌。

4. 以119 mg/mL的浓度在水中或1X PBS中溶解过硫酸钠。

5. 将计算出的体积（步骤2）的钌添加到您的预水凝胶溶液中，并彻底混合。

6. 将计算出的体积（步骤2）的过硫酸钠添加到您的预水凝胶溶液中，并彻底混合。

注意事项：

在添加到预水凝胶之前，不要将钌和过硫酸钠混合在一起。您会得到一个快速的氧化还原反应，它们会立即沉淀。

7. 如果需要，添加细胞。

8. 在400-450nm的波长下进行光交联。最初的建议是50 mW/cm²超过3分钟以保持形状/水凝胶保真度。您可以调整光引发剂浓度、光强度和光交联时间，以定制最终水凝胶的硬度。

附加说明：

如果使用中和的I型胶原，您可以允许胶原在37°C下聚合形成水凝胶，然后进行光交联以进一步交联并调节凝胶硬度。

如何将钌与Lifeink® 200和3D生物打印一起使用：

1. 根据推荐的协议打印Lifeink® 200，进入FRESH支撑浆料中。

2. 打印后，孵化打印物以熔化FRESH明胶支撑浆料。

3. 大约30分钟后，用温暖的细胞培养基替换熔化的明胶。

4. 例如，用移液管取出2 mL的熔化明胶，然后加入2 mL的培养基。重复此过程，直到移除明胶。

5. 准备钌和过硫酸钠的储备溶液（在上述协议中找到）。

6. 将您的Lifeink® 200结构漂浮着的培养基的总体积乘以2%，并在细胞培养基中直接添加等量的钌和过硫酸钠（在您的结构所在的相同盘子中）。

7. 使用可见光（400-450 nm）进行光交联，直到达到所需的交联。

8. 如第3步中所做的，轻轻地用新鲜培养基替换培养基。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5248-1KIT.shtml