耐碱蛋白A亲和层析介质优势及使用注意事项

        在生物医药行业，抗体(单克隆抗体)药已广泛用于疾病的诊断、预防和治疗，也越来越受到人们的关注。但是在单克隆抗体药生产过程中，对分离纯化工艺的效率和成本要求非常高。其中，Protein A亲和层析介质备受关注，约70-80%的抗体纯化都采用Protein A亲和层析介质，因此，其性能决定了抗体药的纯度和收率。
 

        目前市场上的Protein A层析介质，其基质主要以琼脂糖凝胶为主。此外，因抗体药GMP生产的无菌、无热原要求，在操作中经常需要使用NaOH清洗，但天然或重组的protein A配基对NaOH并不耐受，易变性或脱落，因此，选择耐碱性高的Protein A尤其重要。
 

        必拓生物为满足国内市场需求自主研发出一类耐强碱的亲和层析介质：耐碱Protein A琼脂糖凝胶4FF，它是普通Protein A琼脂糖凝胶4FF的升级产品。必拓生物首先利用基因工程技术改造原始Protein A，从而实现重组Protein A的耐碱特性，再将此耐碱Protein A与活化的琼脂糖微球4FF偶联得到。可用于从血清、腹水、细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。
 

产品优势
耐碱性强：0.5 M NaOH冲洗200h抗体吸附载量不降低
耐酸性强：pH 2.7甘氨酸缓冲液冲洗10h抗体吸附载量不降低
吸附性强：纯化载量高，载量高于40mg 人 IgG/mL填料
稳定性强：配基不易脱落，寿命长
性价比更高：可大大降低您的生产成本

技术参数

使用注意事项
1. 使用前应将凝胶从冰箱中取出在室温下缓慢恢复到室温后装柱，以避免产生气泡影响柱效。
2. 装柱时应使凝胶长径比处于5：3-2：1之间，长径比过大将导致洗脱峰拖尾，洗脱体积增大；长径比过小将导致样品与填料接触时间短，吸附不充分，填料吸附蛋白量小。
3. 过柱上样时，若样品抗体浓度过高，应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/mL，以免上样浓度过高影响柱效。
4. 可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高抗体结合量。
5. 用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短，洗脱后尽快用中性缓冲液中和至pH中性，以延长介质使用寿命。
6. 洗脱后，应立刻用中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性，以避免失活，保持抗体的生物活性。
7. 填料使用后应用0.1 M 柠檬酸钠缓冲液（pH3.0）做再生处理，长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
8. 柱料多次使用（一般使用10次以上）后，应进行充分洗涤和再生，即先用20%乙醇洗5个柱体积，再用70%乙醇洗5-10个柱体积，可洗去疏水  性较强的蛋白质和脂类，避免介质的载量下降。

产品目录

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