食品中香兰素的高效液相色谱仪(HPLC)检测方案

香兰素(Vanillin)，又名香草醛，为一种广泛使用的可食用香料，可在香荚兰的种子中找到，也可以人工合成，有浓烈奶香气息。广泛运用在各种需要增加奶香气息的调香食品中，如蛋糕、冷饮、巧克力、糖果;还可用于香皂、牙膏、香水、橡胶、塑料、医药品。

　　目前还没有相关报道说香兰素对人体有害。但是不可过量，据欧盟专家委员会2000年2月24日报导，大剂量可导致头痛、恶心、呕吐、呼吸困难，甚至损伤肝、肾等，故正商订降低允许剂量中。

　　赛智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪，经实践检验可提供食品中香兰素的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于食品类添加香兰素的测定，仅供广大用户参考。

　　以下是食品中香兰素的液相色谱仪测定的详细检测方法。

　　1 仪器与试剂

　　1.1仪器

　　LC-10Tvp高效液相色谱仪;

　　Vertex色谱柱250mm×4.6mm×5μm;

　　超声波水浴;

　　万分之一天平;

　　组织捣碎机;

　　微孔滤膜：0.45μm，水相。

　　1.2试剂

　　甲醇：色谱纯。

　　无水乙醇。

　　磷酸溶液：0.01mol/L

　　香兰素标准工作液：称取一定量的香兰素用流动相溶解配置成100mg/l的溶液，逐级稀释到一定的浓度作为工作液。

　　2 测定原理

　　样品加适量乙醇经超声波提取，经高效液相色谱仪测定，外标法定量。

　　3 色谱条件

　　色谱柱：Vertex色谱柱250mm×4.6mm×5μm;

　　流动相：甲醇 磷酸水溶液0.01mol/L(25 75);

　　流速：1mL/min;

　　进样量：20μL;

　　检测波长：350nm。

　　4 试样溶液的制备

　　样品制备：固体样品经组织捣碎机捣碎混匀后备用;液体样品摇匀后备用。

　　试样处理：准确称取一定量的(精确至0.01g)试样至500mL离心管中，加入20mL乙醇，混匀，经超声波浸提30min后，4000r/min离心5min，取上清液1ml，加入4ml的流动相，混匀，经0.45μm微孔滤膜过滤后，待液相色谱测定。

　　5 结果分析

　　在添加0.25g/kg-5.0g/kg范围内，回收率在89%-106之间，相对标准偏差小于5%。