金刚烷胺检测试剂盒 （瑞森穗科）

金刚烷胺快速检测试剂盒（瑞森穗科）

【原    理】

本试剂盒采用直接竞争 ELISA 方法检测鸡肉、鸭肉、猪 肉等样本中的金刚烷胺，在微孔条上预包被上单克隆抗体， 我司所研发之金刚烷胺 (Amantadine) 酵素免疫检验试剂， 主要是利用抗原与抗体之特异性免疫化学反应的基本原理 来进行的，换句话说，就是利用脢标记物与检体中之 ATD 对 微孔中之抗体来进行竞争反应。

在整个反应当中，如果样品中之 ATD 残留的越多，相对 地就会竞争掉越多的脢标记物，使得能结合上抗体的脢标记 物相对地就会很少，因此，反应中之脢标记物-底物溶液之呈 色就会很淡，甚至几乎没有颜色，此即为阳性反应；反之， 若样品中没有含 ATD，则呈色会比较深，与阴性标准品呈色 几乎是一样的，此即为阴性反应。

【试剂盒组份】

1、  酶联板：8 孔/条，12 条/板

2、 Amantadine 标准溶液(1.5ml/瓶)： 0 ppb、0.15 ppb、0.4 ppb、1.2 ppb、2.4 ppb、6 ppb

3、 100  倍酶标记物…………………………100ul

4、 10  倍浓缩样品稀释液……………………50ml

5、 酶标记物稀释液…………………………10ml

6、 底物溶液 ………………………………12  ml

7、 终 止 液 …………………………………7  ml

8、 10×浓缩洗液 ……………………………50ml

【试剂盒技术指标】 试剂盒灵敏度： 0.1ppb

样本检测下限：

鸡肉，鸭肉 ……………………………………0.45ppb 

猪肉    ……………………………………0.45ppb 

交叉反应率： 金刚烷胺（Amantadine）………………………100%

阿莫西林(Amoxicillin) ……………………………﹤1% 

氯唑西林(Cloxacillin) ……………………………﹤1%

苯唑西林(Oxacillin) ………………………………< 1% 回收率：

鸡肉、鸭肉、猪肉 ……………………………70-130%

【 所需仪器和试剂】

所需仪器：微孔酶标仪、氮气吹干装置、打印机、均质器 、 振荡器、离心机、恒温箱、天平（感量 0.01g）、 刻度移液管、微量移液器( 单道 20μl-200μl 、 100μl-1000μl、多道 250μl)

所需试剂：正己烷

【样本前处理】

样本处理前须知：

1．实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更 换吸头。

2．实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实 验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。

鸡肉、鸭肉、猪肉样品的处理 待测物为鸡肉、鸭肉、猪肉、牛肉

1 . 取2 g已均质检体置入离心管中，加入2 mL原倍样 品稀释液和2 mL正己烷（n-Hexane）。

2. 振荡混合约1分钟。

3.  以离心机离心10分钟（3000 rpm）。

4. 取 0.4 mL中层液（原倍浓缩稀释液层）至1.5 mL 或2 mL微量离心管并加入0.2 mL原倍样品稀释 液准备进行测试 (一个检测需0.1 mL)。

样品品敏感度: 0.45 ppb

稀释倍数: 3

【检测程序】

1、于适当微孔分别加入80 μL标准溶液（0 ppb，0.15 ppb，0.4 ppb，1.2 ppb， 2.4 ppb与6 ppb）。 2、在另外的微孔加入80 μL已完成前处理之样品溶液。

3、再于每一微孔另再加入80 μL已稀释完全之脢标记 物。 4、轻敲盘子四周，使其充分混合后于室温下避光静置

30分钟。

5、将微孔中之反应液甩掉，再将清洗液加满每一微孔 后甩掉，重复洗3次。 6、最后一次甩掉后，在吸水纸上拍干。

7、于每一微孔加入底物溶液100 μL后，轻敲盘子四周， 使其充分混合

8、于室温下避光静置20分钟

9、加入反应终止液，每一微孔加入100 μL

10、酵素免疫分析读值仪以单波长450 nm或双波长450 nm /

650 nm判读。

【结果判定】 利用Excel将标准品浓度取Log，与相对应吸光值之B / B0

（相对于0值标准品吸光值之百分比）做线性回归分析

（semi-log），再将待测检体之B / B0值代入，则可推算出 待测检体浓度（如Fig.1所示

【注意事项】

1、 用前将所有试剂温度回升至室温 20-25℃。

2、 用之后立即将所有试剂放回 2-8℃冰箱。

3、 在 ELISA 分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一 致性，仔细按照推荐的洗板顺序操作是 ELISA 测定程序 中的要点。

4、 所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微 孔板。

5、 室温低于 20℃或试剂及标本没有回到室温（20-25℃） 会导致所有标准的 OD 值偏低。

6、 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会伴随着出 现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍 干后应立即进行下一步操作。

7、 混合要均匀，否则会出现重复性不好的现象。

8、 反应终止液为 2M 硫酸，避免接触皮肤。

9、 不要使用过了有效日期的试剂盒，稀释或搀杂使用会引 起灵敏度、OD 值的变化。不要交换使用不同批号的盒 中试剂。

10、 不用的微孔板放进自封袋重新密封；标准物质和无色的 发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

11、 显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0 标准的吸 光度值小于 0.5 时，表示试剂可能变质。

【规   格】  96T

【贮  藏】 2～8 ℃，避光保存

【有 效 期】  一年 (生产日期及批号见包装盒)

【生产企业】 广州瑞森生物科技股份有限公司

【地   址】 广州市番禺区市新路新水坑段6号B座5楼

【电   话】  020－34697803

【传   真】  020－34697836