【免疫细胞无血清培养基 NC0101   使用方法】

1、采集与分离外周血
采集外周血，Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。

2、单个核细胞的接种与诱导活化
1) 0d时，绷胞计数。按细胞密度2x10⁶cell/mL接种至对应体积的培养液中。
    添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。
2) ld时(24小时)，添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。
    将YC005添加至未经使用的培养基中，待用。

3、细胞的连续培养与扩增
1) 3d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。同时添加新加入培养液体积l0%比例的自体血浆。补液比例大致
    在1：2左右（原有培养液体积：新加培养液体积）
2) 5d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。补液比例大致在1：3左右。
3) 7d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。补液比例大致在1：2左右。
4) 9d时，将剩余培养液全部加入。

4、收获细胞
培养周期结束后，依据细胞量收获细胞。

【供参考的补液程序范围】

2L培养体系补液体积示意表：50mL外周血，接种密度2.0x10⁶ cell/mL。

 
备注：
1)补液后最优密度区间为(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。若按体积补液与最优密度区间有冲突的话，请以最优密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于50mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。 

3L培养体系补液体积示意表：100mL外周血，接种密度2.0x10⁶ cell/mL。

备注：
1)补液后最优密度区间为(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。若按体积补液与最优密度区问有冲突的话，请以最优密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于100mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。

【免疫细胞无血清培养基 NC0101     规格与保存 】

【免疫细胞无血清培养基 NC0101  用途与描述 】

免疫细胞无血清培养基，用于脐带血或外周血中分离到的单核细胞向CIK细胞（细胞因子诱导的杀伤细胞）的体外诱导及体外大规模扩增培养。

【免疫细胞无血清培养基 NC0101    产品性能之外周血样本】

1. 细胞总数：125亿，折合62.5亿/L。

2、CD3+CD56+阳性率在25%-55%

3. 细胞支持密度更高。
培养14天后，细胞密度可至5.7×10⁶cell/mL。 培养15天后，细胞密度可至6.2×10⁶cell/mL。

4. 培养后期补液结束后，细胞维持能力更强。
最后一次补液（9d），持续至17天，细胞数量一直维持增长，未见明显下降。

【免疫细胞无血清培养基 NC0101  产品性能之脐带血样本】

50mL脐带血

细胞生长曲线

CIK细胞阳性率