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abs9229 RIPA Lysis Buffer (Strong)
abs9229 RIPA Lysis Buffer (Strong)
价 格：360
产 地：上海更新时间：2025/10/14 11:19:37
品 牌：absin型 号：abs9229
状 态：正常点击量：837
联 系 人：爱必信
电 话：021-38015121
传 真：021-38015121
等 级： (第 16年)
性 质：生产型,服务型,
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产品参数
| 保存方法 | -20℃冻存，1年稳定。 |
| 分子量 | 174.2 g/mol |
| 操作步骤 | 如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量，取每1mlRIPA加入10ulPMSF，使PMSF的最终浓度为1mM，混匀备用（PMSF现用现加）。
1. 样品前处理：
a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必须分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。（如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量）。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2. 将裂解后的样品10000-14000离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。 |
| 用法说明 | 注意事项：
本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，若细胞量多会造成细胞裂解液粘稠：此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳；若想测定浓度，可加入少量SDS（1%），煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清。 |
产品介绍
| 描述 | RIPA 裂解液（RIPA Lysis Buffer），本意为 Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对组织和细胞都有较好的裂解作用。RIPA 的配方有很多种，根据其裂解强度的不同，大致可分为强、 中、弱三类，应用上会有一些差异。 本品为裂解性较强的 1×RIPA 裂解液，主要成分为 50mM Tris-HCl (pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100,1% 脱氧胆酸钠，0.1% SDS，以及正钒酸钠，氟化钠，EDTA 和抑肽酶等多种抑制剂，可广谱且有效抑制蛋白 降解，经本品裂解所得的蛋白样品，适用于蛋白免疫印迹（Western Blot），免疫沉淀（IP），和免疫共沉淀（Co-IP）等实验。经本品裂解收集的蛋白样品，可使用增强型 BCA 蛋白浓度测定试剂盒 测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的去垢剂，不适合用 Bradford 法来测定总蛋白浓度。 |
| 别名 | RIPA裂解液（强） |
| 产品组分 | 主要成分为 50mM Tris-HCl (pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100,1% 脱氧胆酸钠，0.1% SDS，以及正钒酸钠，氟化钠，EDTA 和抑肽酶等多种抑制剂 有效成分为1% Triton X-100，1%脱氧胆酸钠，0.1% SDS |
