Liposoma/艾美捷Clodronate脂质体解决方案
- 武汉艾美捷科技有限公司2025年3月24日 3:07 点击:60
Liposoma/艾美捷Clodronate脂质体解决方案
氯膦酸二钠脂质体在生物医学研究中具有广泛的应用。它能够有效清除特定的细胞类型,如巨噬细胞,从而为研究细胞功能和疾病机制提供了有力的工具。此外,氯膦酸二钠脂质体还可以用于药物递送,提高药物的靶向性和疗效。在肿瘤学研究中,氯膦酸二钠脂质体被用于研究肿瘤微环境中的免疫细胞,帮助科学家更好地理解肿瘤的发生和发展机制。
Liposoma介绍
Clodronate Liposomes是由荷兰阿姆斯特丹Vrije University Medical Center(VUMC) 的Nico van Rooijen教授(著名免疫学家),在单核巨噬细胞领域,做了很多开创性的基础工作研发。
Liposoma的技术核心在于其独特的Clodronate脂质体,这种脂质体能够有效地耗尽巨噬细胞。在体内给药后,巨噬细胞会吞噬并消化脂质体的磷脂双层,而Clodronate则会在细胞内积累,最终通过启动程序性细胞死亡来消除巨噬细胞。这一机制为治疗某些疾病提供了新的思路和方法。
艾美捷 Liposoma特色产品线:
氯膦酸盐脂质体(Clodronate Liposomes):这是Liposoma的核心产品之一,主要用于实验动物体内或体外清除单核巨噬细胞。该产品通过巨噬细胞的内吞机制,将氯磷酸带入细胞内,从而达到去除巨噬细胞的目的。Liposoma优化了脂质体的组分,确保了产品的封装效率、粒径分布和无菌操作等关键参数。
对照(空)脂质体(Control Liposomes):用于对照实验,不含活性成分,但具有与氯膦酸盐脂质体相同的物理和化学性质。
荧光脂质体(Fluorescent Liposomes):用于标记和追踪脂质体在生物体内的分布和行为。
Liposoma热销产品:
C-002 ClodronateLiposomes 2mL
C-005 ClodronateLiposomes 5mL
C-010 ClodronateLiposomes 10mL
CP-002-002 ClodronateLiposomes &Control Liposomes 2mL+2mL
CP-005-005 ClodronateLiposomes &Control Liposomes 5mL+5mL
CP-010-010 ClodronateLiposomes &Control Liposomes 10mL+10mL
I-005 Dil Liposomes 5mL
I-010 Dil Liposomes 10mL
P-002 Control Liposomes 2mL
P-005 Control Liposomes 5mL
P-010 Control Liposomes 10mL
CI-005-005 ClodronateLiposomes &Dil Liposomes 5mL+5mL
CI-010-010 ClodronateLiposomes &Dil Liposomes 10mL+10mL
总之,Liposoma通过其创新的技术以及对全球市场的深入布局,正成为生物科技领域的一颗璀璨明星。未来,随着更多研究成果的公布和应用的拓展,Liposoma有望在全球生物科技领域发挥更大的影响力,为人类健康和科学研究做出更多贡献。
在这个充满挑战和机遇的时代,Liposoma正以其独特的视角和坚定的步伐,探索着生物科技的无限可能。共同期待Liposoma带来的更多惊喜和突破,开启脂质体科技的新篇章。
作为Liposoma合作特约伙伴,艾美捷将为中国客户提供全面的Liposoma产品。
https://www.amyjet.com/news/Liposoma-new.shtml
Liposoma氯膦酸二钠脂质体CLODRONATE LIPOSOMES作用原理解析
清除巨噬细胞(depletion of macrophages)是研究巨噬细胞功能的重要方法。荷兰阿姆斯特丹Vrje Universiy的Nico van Roojen教授开发的一款ClodronateLiposomes,可以利用巨噬细胞的内吞机制,将脂质体包裹的膜不通运性的氯磷酸(dlodronate)带入细胞内,利用“特洛伊木马机制”从而达到去除巨噬细胞的目的。
作用原理:
两亲性磷脂分子在水中可以形成同心圆形式的磷脂双分子层球体,磷脂双分子层中间通过水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸盐在形成脂质体的过程中被包裹进磷脂双分子层之间的水相中。游离的氯磷酸盐不能自由的通过脂质体的磷脂双分子层。随着脂质体被巨噬细胞吞噬,在巨噬细胞溶酶体磷酸酶的作用下,溶解在脂质体水相中的氯磷酸盐就可以被逐步释放出来,并累积在细胞内,当其达到一定浓度时,巨噬细胞将会受到不可逆转的损伤,从而进入凋亡过程。从死亡的巨噬细胞中释放出来的氯磷酸盐在细胞外的半衰期极短(大约15min),可以通过泌尿系统排除体外。
艾美捷 Liposoma氯膦酸二钠脂质体CLODRONATE LIPOSOMES(C-005)由磷脂酰胆碱和胆固醇组成。将所有脂质体制剂悬浮在无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)中:
-10 mM的Na2HPO4;
-10毫米NaH2PO4;
-140毫米氯化钠。
我们所有的脂质体均带负电荷,因此不会一起阻塞。悬浮液中的脂质体没有大小,这意味着它也包含越来越大的脂质体(大3微米)。平均而言,脂质体的大小为1.7微米。
氯膦酸盐脂质体:人工制备的脂质襄泡的悬浮液,包裹了氯膦酸盐。悬浮液中氯膦酸盐的浓度约为。5毫克/毫升氯膦酸盐以CH2Na2Cl2O6P2-5 H2O的形式封装在脂质体襄泡中。
PBS脂质体:人工制备的脂质囊泡的悬浮液,其中包裹了PBS水溶液。这些不含氯膦酸盐,可用于对照实验。
荧光Dil脂质体:人工制备的脂质襄泡的悬浮液,其中包封了PBS水溶液,并用荧光染料Dil标记。它们不含氯膦酸盐,可用于研究通过特定给药途径注射的脂质体是否能够到达要研究的巨噬细胞。
Liposoma/clodronateliposomes脂质体C-005构成:
氯膦酸盐脂质体:
由同心磷脂双层构成的人造球,该双层包裹着含有氯膦酸盐的PBS(磷酸盐缓冲液)水溶液。脂质体是颗粒,大小大。3微米。它们在PBS中形成悬浮液,在储存时会沉淀,在试管或烧瓶的底部形成沉淀。在对实验动物给药之前,应先摇晃悬浮液,以回收均匀的悬浮液。
对照脂质体(PBS):
对照脂质体不含氯膦酸盐。它们仅含有PBS,可用于对照实验,以查明注射氯膦酸盐脂质体后观察到的效果是否仅是由于巨噬细胞耗竭所致。
储存和使用说明
到达脂质体后,应将其储存在4-8℃(或39-47°F)之间。脂质体悬浮液不得冷冻,也不要暴露于高温下。这可能会对磷脂双层造成干扰,可能导致氯膦酸盐从脂质体中泄漏出来。
给药前,首先使脂质体达到室温,然后轻轻摇动或搅拌悬浮液。一段时间后,脂质体易于沉淀,导致小瓶中的分布不均匀。当注射花费太多时间时,脂质体甚至可能在注射器中沉淀。如果使用同一注射器注射多只动物,可能会导致剂量不同。
不建议稀释悬浮液,但如有必要,请使用PBS或盐水。
我们建议客户在发货后16周内使用脂质体制剂。强烈建议不要在到期日期之后使用。在此期间之后,污染的风险会增加,并且可能会发生轻微的功能丧失。
作用机理
巨噬细胞在免疫和非免疫防御机制中起重要作用。它们是抵御渗透到脊椎动物体内的细菌,病毒和其他形式的微生物污染的首道防线。巨噬细胞是大型细胞,几乎存在于所有身体组织中,它们可以具有不同的形式和名称(例如库普弗细胞,肺泡巨噬细胞,小胶质细胞,破骨细胞,红髓巨噬细胞)。巨噬细胞“清除”,它们摄入并消化可能是潜在病原体的所有异物,微生物,癌细胞和细胞碎片。该过程称为吞噬作用。巨噬细胞主要通过可溶性分子如细胞因子和趋化因子的介导来进一步调节许多非吞噬细胞的功能。他们参与先天免疫,
脂质体是人工制备的球体,由同心磷脂双层组成。当磷脂分散在水中时,亲水性头部将构成脂质体的两个外部部分,而疏水性脂肪酸基团将构成内部部分。水室分隔双层,亲水分子可以溶解在其中,形成脂质体包封的分子。氯膦酸盐(二氯亚甲基双膦酸酯或Cl2MBP)是一种亲水性分子,可以封装在磷脂双层中。游离氯膦酸盐不易穿过细胞膜,并通过肾脏系统从循环中迅速清除(即数分钟内)。但是,氯膦酸盐脂质体包埋在脂质体中时,会被巨噬细胞吞噬,无法逃脱。磷脂双层被溶酶体磷脂酶消化,而氯膦酸盐未被消化并且保留在巨噬细胞中。巨噬细胞摄入的磷脂双层和脂质体越多,在巨噬细胞内积累的氯膦酸盐越多。超过一定的细胞内浓度,氯膦酸盐将通过启动程序性细胞死亡(即凋亡)来消除巨噬细胞。
PBS脂质体主要用于对照实验。但是,这些也可以在某些时间段内通过饱和来阻止吞噬作用。因此,PBS脂质体不能代表正常健康的,未阻断的,未抑制的和未活化的巨噬细胞的对照实验。当比较氯膦酸盐脂质体和PBS脂质体的作用时,其作用因此可能小于预期。
作为Liposoma合作特约伙伴,艾美捷将为中国客户提供全面的Liposoma产品。
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Liposoma-ClodronateLiposomes巨噬细胞清除套装,高效去除巨噬细胞的科研利器
脂质体包括的氯膦酸二钠脂质体和PBS,用于小泉等动物体外或者体外清除单核巨噬细胞。ClodronateLiposomes巨噬细胞清除套装。
艾美捷 Liposoma-ClodronateLiposomes巨噬细胞清除套装(CP-005-005):
活性成分:氯膦酸二钠(Clodronate Disodium) CAS:22560-50-5浓度:5mg/mL
反应属性:
Irvivo:Mouse;Rat;Rabit;Dog(Proven and PublishedM)
Irwitro:Monoruclear macrophages(Proven and PublishedM)
颗粒分布:平均直径约1.7um
注意事项:
1.存放于冰箱4-8度,切记千万不要冻
2.久置易沉淀,每次用前一定上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡沫
3.尽量无菌操作
4.试剂严禁接触到氯仿,甲醇,乙醇等有机试剂,否则脂质体结构会被破坏
5.试剂严禁接触到表面去垢剂或者表面活性剂,否则脂质体结构会被破坏
6.不建议稀释,除非特殊实验需要
7.为避免污染,每次用无菌注射器抽完试剂后,可以用封口膜封住胶塞针眼
Liposoma-ClodronateLiposomes巨噬细胞清除套装作用机理:
巨噬细胞在免疫和非免疫防御机制中起重要作用。它们是抵御渗透到脊椎动物体内的细菌,病毒和其他形式的微生物污染的首道防线。巨噬细胞是大型细胞,几乎存在于所有身体组织中,它们可以具有不同的形式和名称(例如库普弗细胞,肺泡巨噬细胞,小胶质细胞,破骨细胞,红髓巨噬细胞)。巨噬细胞“清除”,它们摄入并消化可能是潜在病原体的所有异物,微生物,癌细胞和细胞碎片。该过程称为吞噬作用。巨噬细胞主要通过可溶性分子如细胞因子和趋化因子的介导来进一步调节许多非吞噬细胞的功能。他们参与先天免疫,脂质体是人工制备的球体,由同心磷脂双层组成。当磷脂分散在水中时,亲水性头部将构成脂质体的两个外部部分,而疏水性脂肪酸基团将构成内部部分(见图1)。水室分隔双层,亲水分子可以溶解在其中,形成脂质体包封的分子。氯膦酸盐(二氯亚甲基双膦酸酯或Cl2MBP)是一种亲水性分子,可以封装在磷脂双层中。游离氯膦酸盐不易穿过细胞膜,并通过肾脏系统从循环中迅速清除(即数分钟内)。但是,氯膦酸盐脂质体包埋在脂质体中时,会被巨噬细胞吞噬,无法逃脱(见图2)。磷脂双层被溶酶体磷脂酶消化,而氯膦酸盐未被消化并且保留在巨噬细胞中。巨噬细胞摄入的磷脂双层和脂质体越多,在巨噬细胞内积累的氯膦酸盐越多。超过一定的细胞内浓度,氯膦酸盐将通过启动程序性细胞死亡(即凋亡)来消除巨噬细胞。
图1.氯膦酸盐脂质体的示意图。囊泡由同心的磷脂双层构成,被水性隔室隔开。双层由亲水和疏水基团组成。将氯膦酸盐(在此以黑色方块表示)溶解在水溶液中并封装在脂质体内。
图2.巨噬细胞对氯膦酸盐脂质体的摄取和消化示意图。巨噬细胞通过胞吞作用摄入氯膦酸盐脂质体,然后与含有磷脂酶的溶酶体(L)融合(箭头)。磷脂酶破坏的磷脂双层越多,在巨噬细胞内释放的氯膦酸盐(黑色方块)越多。巨噬细胞终通过凋亡被杀死。(N =巨噬细胞核)。
因此,氯膦酸盐脂质体可用于通过消耗巨噬细胞来研究巨噬细胞功能。例如,它们可以应用于各种自身免疫性疾病,移植,神经系统疾病和基因治疗的模型。氯膦酸盐脂质体只有在可以达到的情况下才能耗尽巨噬细胞。一些组织可以形成脂质体的屏障。通过选择氯膦酸盐脂质体的正确给药途径,可以耗尽特定的器官或组织的巨噬细胞。有关管理协议的更多信息,请单击此处。
PBS脂质体主要用于对照实验。但是,这些也可以在某些时间段内通过饱和来阻止吞噬作用。因此,PBS脂质体不能代表正常健康的,未阻断的,未抑制的和未活化的巨噬细胞的对照实验。当比较氯膦酸盐脂质体和PBS脂质体的作用时,其作用因此可能小于预期。
有关更多信息,请参见:
-Van Rooijen,N.和Sanders,A.(1994)。脂质体介导的巨噬细胞耗竭:作用机理,脂质体制备和应用。免疫学杂志,174(1-2),83-93。
-Van Roojen,N.,Sanders,A和van den Berg,TK(1996)。脂质体介导的氯腾酸盐和丙am的细胞内递送诱导的巨噬细胞凋亡。免疫学杂志,193(1),93-99。
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Liposoma-单核巨噬细胞示踪脂质体Dil LPOSOME,助力细胞膜荧光标记
Dil即DiIC18(3),全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3°3'tetramethylindocarbocyanine perchlorate,是常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。Dil是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。Dil在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。常与DiA一起用于细胞膜双色标记。
Dil作为示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer),可以被广泛用于正向或逆向,活的或固定的神经等细胞或组织。Dil通常不会影响细胞的生存力(viability)。被Dil标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周,在体内可以长达一年。Dil在被固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6 mm/day,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为6mm/day。
Dil除了用于细胞膜荧光标记外,还可用于检测细胞的融合和粘附,发育或移植过程中细胞的迁移,通过FRAP(Fluorescence RecoveryAfter Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
Dil染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用0.1%TritonX-100透化)后,也可以很好地进行质膜染色。
Liposoma-单核巨噬细胞示踪脂质体Dil LPOSOME:用于体内示踪单核巨噬细胞。Dil是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。Dil在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。常与DiA一起用于细胞膜双色标记。
艾美捷 Liposoma-单核巨噬细胞示踪脂质体Dil LPOSOME:
货号:I-005
外观:可溶于乙醇、DMF、DMSO的深红色固体
λEx/λ Em(MeOH)=549/565 nm
贮存条件:-20℃避光保存
保质期:12个月
CAS号:41085-99-8
分子式:C59 H97 CIN204
分子量:933.88
Dil在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。Dil被激发后可以发出橙红色的荧光,Dil和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。其中,大激发波长为549nm,大发射波长为565nm。
注意事项:
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。(本品是棕色避光玻璃瓶)
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System Biosciences(SBI)/艾美捷外泌体从分离到功能研究的全套解决方案
System Biosciences(简称:SBI),总部位于美国加州湾区。其致力于为分子和细胞生物学研究提供创新产品和服务。SBI 一直专注于为科研人员提供创新的产品和服务,帮助科研人员可以迅速使用最新、强大的工具开展研究。SBI是第1家提供外泌体研究试剂和 CRISPR/Cas9 载体的公司。尤其在外泌体领域具有显著优势,提供外泌体分离、纯化、检测和标记的相关产品,从分离到功能研究的全套解决方案。
艾美捷System Biosciences(SBI)主要产品线:
1.外泌体研究全套整合方案
2.CRISPR/Cas9
3.慢病毒研究
4.分子研究工具
5.miRNA&lncRNA研究
6.质粒
外泌体研究全套整合方案
SBI支持您的外泌体研究的各个方面,SBI的产品实现定量,高通量和高质量的研究。
获得研究和使用外泌体所需的一切,从分离和表征到货物分析和工程等等。无论您选择哪种方法-无论您使用ExoQuick还是密度梯度超离心,还是需要基于QPCR的外泌体miRNA分析或RNA-Seq方法-我们都有高质量的外泌体研究产品来支持您的科学研究并推进您的工作。
外泌体纯化
SBI主要运用沉淀法和尺寸排阻色谱法进行外泌体的分离纯化。
ExoQuick是SBI公司专用的预包装的双戊酸树脂柱,用于快速外泌体沉淀分离。操作简单便利,手动操作时间小于20min,可以纯化到高纯度,高产量的的外泌体,提供临床前级的外泌体提取产品,更适用于外泌体药物研发企业。
SBI采用新型专用的SmartSEC 尺寸排阻技术。它提供了尺寸排除和亲和相互作用模式的双重功能。在单一的树脂介质中结合这两种模式,消除了经典SEC的耗时和劳动密集型的过程。在SmartSEC中,多孔珠的内部核心以亲和相互作用模式功能化,可以捕获和保留可达400 kDa(15-20 nm)的蛋白质杂质,如IgG和白蛋白。珠子的外壳是惰性的,这最大限度地减少了非特异性结合。
外泌体检测
EXO-Flow系列提供磁珠和染料可用于捕获,纯化,表征外泌体,适用于流式细胞术和免疫沉淀(IP)实验。Exo-Flow 2.0磁珠被链霉亲和素包裹,可以选择性和SBI的外泌体特异性抗体预偶联,用来捕获外泌体。SBI最新一代的Exo-Flow试剂盒包含增强版试剂,防止外泌体的非特异性结合,实现外泌体亚群的高度特异性捕获。ExoFlow-ONE EV Labeling 试剂盒是专用于流式细胞术的外泌体表征产品。通过一种专有的、高量子效率的ExoFlow-ONE染料专门标记外泌体内部组件,可以实现接近单囊泡分辨率,用于更强大的流式细胞术和FACS研究,帮助您对外泌体生物学产生更深入的见解。SBI还提供外泌体检测专用抗体,指标包含但不仅限于CD9,CD63,CD81供您进行选择。
外泌体定量
SBI 提供一系列商品化外泌体定量试剂盒来满足您的定量需求。SBI 新版ExoELISA-ULTRA?试剂盒——可用于检测CD63、CD9或CD81——可用于进行直接酶联免疫吸附试验(ELISA)。以ExoELISA-ULTRA CD63试剂盒为例提供高灵敏(低至1-200?g 蛋白)和高快速(4小时实验流程)。如果您需要更快的实验操作,也可以选择不需要依赖抗体结合的 EXOCET 试剂盒和更有高灵敏度荧光检测试剂盒FLuoroCet 系列。
外泌体可视化
使用ExoGlow试剂盒,将您的外泌体可视化提升到高清晰度、低背景和高选择性的水平。和常规的高背景信号的通用标记试剂不同,SBI ExoGlow系列——ExoGlow-Protein、ExoGlow-RNA和ExoGlow-Membrane——通过特定标记和低水平的背景信号提高了您跟踪和定位外泌体的能力,带来更加准确外泌体示踪可视化结果。除了体外标记外,SBI ExoGlow-Vivo EV labeling Kit 实现高灵敏度和高特异性活体标记,是研究外泌体生物分布和动力学实验的一大利器。
工程化外泌体
Exo-Fect系列是外泌体工程化专用转染试剂,可用于装载或“转染”含有siRNA、microRNA、mRNA、质粒DNA以及小分子。
XMIR和AXMIR试剂盒能够将特异性或anti-miRNA包装成外泌体。只需将SBI XMotif 标记 miRNA or慢病毒载体转染到您选择的外泌体产生细胞中。分泌的外泌体讲富含 miRNA,然后将其输送到靶细胞。这种方法非常适合敲除或上调受体细胞中靶点的表达。XStamp系列可以特意性递送外泌体。通过在外泌体表面放置组织特异性配体,您可以设计外泌体与特定的靶细胞相互作用。
除了外泌体领域,SBI在其他分子生物领域诸如CRISPR基因编辑,基因表达系统和也有着丰富的产品线,可以满足各位老师相应的实验需求。
作为System Biosciences (SBI)在中国的特约合作伙伴,艾美捷将为中国客户提供全面的System Biosciences (SBI)产品以及客户订制化服务。
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System Biosciences(SBI)外泌体快速提取试剂盒(TC型)-快速、可扩展的外泌体分离技术
System Biosciences(SBI)外泌体快速提取试剂盒(TC型):一种更好的外泌体分离方法,快速、可扩展的外泌体分离技术,适用于组织培养基。
需要分离外泌体吗?SBI的ExoQuick-TC能够从低体积(低至1毫升)的组织培养基和某些生物流体(唾液、尿液、卵泡液和母乳)中实现高通量、定量分离外泌体。需要注意的是,如果要从血清、血浆或腹水分离外泌体,请使用原始的ExoQuick配方(EXOQ5A-1或EXOQ20A-1)。ExoQuick-TC与多种下游应用兼容,是一种有效且经过验证的超速离心替代方法。
艾美捷System Biosciences(SBI)外泌体快速提取试剂盒(TC型)【EXOTC10A-1/EXOTC50A-1】的快速、无需超速离心的方法:
- 节省时间和劳力
- 可轻松扩展
- 保留珍贵样本
- 提供高产量、功能完整且高质量的外泌体
- 可用于多种下游应用的外泌体分离,包括:
1生物标志物研究
2外泌体微小RNA(miRNA)分析
3外泌体蛋白质组学
4外泌体脂质组学/代谢组学
5功能性研究,例如细胞间信号传导
6基础生物学研究,例如在肿瘤发生中的作用
ExoQuick-TC是一种专有的聚合物,能够温和地沉淀外泌体。首先,清除样本中的细胞和细胞碎片,然后将适量的ExoQuick-TC加入到已澄清的生物流体中,冷藏并离心。外泌体将沉淀在离心后的沉淀物中,准备好后可重新悬浮在适当的溶液中。
工作原理:
高通量、定量的外泌体回收
ExoQuick-TC可用于从多种组织培养基以及某些生物流体(如唾液、尿液、卵泡液和母乳)中纯化外泌体。凭借简单的工作流程、极低的手动操作时间和低样本输入量要求,ExoQuick-TC是需要纯化多个外泌体样本的研究人员的理想选择。
从组织培养基中分离外泌体的步骤如下:
- 加入适量的ExoQuick-TC。
- 在4°C下孵育过夜。
- 通过30分钟的低速离心(1500g)分离外泌体。
- 分离后的外泌体可在沉淀物中找到,并可重新悬浮于适当的溶液中。
您可以使用多种方法验证外泌体的存在,包括通过Western blot检测通用外泌体标志物(CD63、CD9、CD81和HSP70)、NanoSight分析或电子显微镜(EM)(了解更多关于检测外泌体的不同方法,请参阅我们的《外泌体基础指南》)。
总结
使用ExoQuick-TC,您可以通过一种易于在多个样本上操作且仅需极低输入量的协议,从组织培养基和某些生物流体中获得高质量的外泌体。
System Biosciences(SBI)外泌体快速提取试剂盒(TC型)文献参考:
Yang J, et al. Detection of Tumor Cell-Specific mRNA and Protein in Exosome-Like Microvesicles from Blood and Saliva. PLoS ONE. 2014. 9(11): e110641. PMCID: PMC 4232306.
Alvarez ML. Isolation of urinary exosomes for RNA biomarker discovery using a simple, fast, and highly scalable method. Methods Mol Biol. 2014. 1182:145-70. PMID: 25055908.
Sohel MM, et al. Exosomal and Non-Exosomal Transport of Extra-Cellular microRNAs in Follicular Fluid: Implications for Bovine Oocyte Developmental Competence. PLoS One. 2013 Nov 4. 8(11):e78505. PMCID: PMC3817212.
Zhu L, et al. Novel method for extracting exosomes of hepatocellular carcinoma cells. World J Gastroenterol. 2014 June 7. 20(21): 6651-6657. PMCID: PMC4047354.
Gu Y, et al. Lactation-Related MicroRNA Expression Profiles of Porcine Breast Milk Exosomes. PLoS ONE. 2012. 7(8): e43691. PMCID: PMC3427246.
作为System Biosciences (SBI)在中国的特约合作伙伴,艾美捷将为中国客户提供全面的System Biosciences (SBI)产品以及客户订制化服务。
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System Biosciences(SBI)基础外泌体捕获套装工作原理说明
使用您自己的抗体定制Exo-Flow捕获试剂盒
基础Exo-Flow捕获试剂盒使您能够利用System Biosciences强大的Exo-Flow技术,结合您选择的任何外泌体标志物。除了生物素化抗体外,该试剂盒包含与其他Exo-Flow试剂盒相同的试剂——磁性链霉亲和素微珠、洗涤和洗脱缓冲液以及可逆的Exo-FITC染料(产品编号:EXOFLOW800A-1)。您需要提供生物素化抗体、流式细胞分选仪(FACS)以及可选的磁性支架(产品编号:EXOFLOW700A-1)。System Biosciences高质量的试剂盒组件确保了基于您选择的外泌体表面标志物的可靠、可重复的外泌体纯化。并且,由于System Biosciences使用的微珠尺寸大于典型尺寸(直径为9.1微米),外泌体捕获效率极高,有助于回收稀有外泌体群体。
请注意,我们还提供可逆的Exo-APC(编号:Exo-FLOW810A-1)作为Exo-FITC的替代染料。
艾美捷System Biosciences(SBI)基础外泌体捕获套装【CSFLOWBASICA-1】:
1大尺寸磁性微珠可提高外泌体捕获效率。
2可逆的Exo-FITC和Exo-APC染料在流式细胞分选(FACS)后可以完全去除。
3外泌体洗脱缓冲液可同时去除Exo-FITC(或Exo-APC),并从磁性微珠上洗脱外泌体,以便用于下游应用,例如功能研究。
超越基础试剂盒
为了便于开展最广泛的研究,SBI构建了高度模块化的Exo-Flow系统。除了基础Exo-Flow试剂盒外,我们还提供了一系列带有不同且经过验证的生物素化抗体的试剂盒。
工作原理
使用基础Exo-Flow捕获试剂盒通过流式细胞分选(FACS)轻松纯化外泌体
只需(1)将您的生物素化抗体连接到磁性链霉亲和素微珠上,(2)使用连接抗体的磁性微珠捕获通过ExoQuick®或超速离心分离的外泌体,(3)洗去未结合的外泌体,然后(4)用可逆的Exo-FITC染料进行染色(激发和发射波长分别为494纳米和518纳米)。
您的样本现在已准备好进行流式细胞分选(FACS)分析。
在流式细胞分选后使用纯化的外泌体时,加入试剂盒中提供的外泌体洗脱缓冲液,同时去除Exo-FITC染料并从微珠上洗脱完整的外泌体。
作为System Biosciences (SBI)在中国的特约合作伙伴,艾美捷将为中国客户提供全面的System Biosciences (SBI)产品以及客户订制化服务。
https://www.amyjet.com/news/SBI-new.shtml
System Biosciences(SBI)外泌体超灵敏ELISA完整试剂盒(CD63检测)--4小时内完成检测,无需过夜孵育
System Biosciences(SBI)外泌体超灵敏ELISA完整试剂盒(CD63检测)--提供超快速的基于ELISA的外泌体定量检测。
与广受欢迎的ExoELISA™试剂盒相比,ExoELISA-ULTRA CD63试剂盒【EXEL-ULTRA-CD63-1】提高了外泌体检测的灵敏度——低至1微克蛋白当量——同时将总检测时间缩短至仅4小时。
目前该试剂盒配置用于检测CD63,这是一种被广泛认可且流行的外泌体标志物。ExoELISA-ULTRA CD63基于一种超灵敏的直接捕获比色ELISA检测方法,几乎适用于所有生物流体。ExoELISA-ULTRA CD63试剂盒包含一个内部标准品,该标准品经过多种生物流体来源的外泌体校准。通过NanoSight分析进行校准,能够实现对目标样本中携带CD63的外泌体进行定量检测。一个ExoELISA-ULTRA CD63试剂盒包含进行多达96次反应所需的所有试剂(包括检测板)。
艾美捷System Biosciences(SBI)外泌体超灵敏ELISA完整试剂盒(CD63检测):
1灵敏:可检测低至1微克蛋白当量的外泌体
2快速:4小时内完成检测——无需过夜孵育
3灵活:与所有主要的外泌体分离方法兼容(例如ExoQuick®、超速离心、超滤和免疫亲和捕获),适用于人类样本
4定量:校准的内部标准品可实现对携带CD63的外泌体进行定量
5节省样本:所需样本量显著少于标准ExoELISA试剂盒,为其他下游应用保留更多样本
支持数据:
ExoELISA-ULTRA CD63的标准曲线显示出良好的线性关系,低至约1×10⁹个外泌体。
文献参考:
Kowal, J., et al. Proteomic comparison defines novel markers to characterize heterogeneous populations of extracellular vesicle subtypes. Proc Natl Acad Sci U S A. 2016. February 23. 113(8): E968–E977. PMCID: PMC4776515.
作为System Biosciences (SBI)在中国的特约合作伙伴,艾美捷将为中国客户提供全面的System Biosciences (SBI)产品以及客户订制化服务。
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