NanoTag-RFP选择器--捕获广泛的RFP衍生物
- 武汉艾美捷科技有限公司2025年9月2日 3:22 点击:39
NanoTag-RFP选择器--捕获广泛的RFP衍生物
RFP选择器基于一种高亲和力的单域抗体(sdAb),该抗体通过共价键固定在4%交联琼脂糖或磁性琼脂糖珠上。
通过柔性连接链实现的定向和选择性连接,确保了sdAb的高度可及性,并且大大消除了批次间差异。
由于sdAb的单链特性及其共价固定,在使用SDS样品缓冲液洗脱时,不会观察到IgG的轻链和重链“泄漏”。因此,RFP选择器对RFP融合蛋白具有高亲和力和卓越的容量,同时显示出可忽略不计的非特异性背景。
RFP选择器能够捕获广泛的RFP衍生物。
RFP选择器与常规生理缓冲液以及更严格的组成兼容。RFP选择器为根据实验需求调整结合和洗涤条件提供了极大的灵活性。
艾美捷RFP选择器:
货号:N0410
克隆:2B12
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:免疫沉淀(IP)
容量:每微升包装珠子可结合>3微克RFP
靶标:mRFP
特异性:mRFP(红色荧光蛋白)以及其他衍生物,如mOrange、dsRed1、dsRED2、tdTomato、mCherry和mScarlet-i
配方:
PBS中的50%悬浮液,含有20%乙醇
运输:常温
储存:在4℃下储存,最长可达12个月。切勿冷冻!
缓冲液兼容性:
-pH 5至9的常见缓冲液物质
-2% Triton X-100、1% Tween-20、1% NP-40、1% CHAPS、1%脱氧胆酸钠、0.1% SDS
-4 M NaCl、2 M KCl、1 M MgCl₂、100 mM EDTA
-4 M尿素
-10 mM DTT、10 mM 2-巯基乙醇
-RNase A、DNase I、Benzonase、蛋白酶抑制剂
文献参考:
Kojima T, Wasano K, Takahashi S, Homma K. Cell death-inducing cytotoxicity in truncated KCNQ4 variants associated with DFNA2 hearing loss. Dis Model Mech. 2021;14(11):dmm049015. doi:10.1242/dmm.049015 (CoIP)
Thornton DT. Characterization of HSP90 subpopulation conformations targeted by inhibitors and the effect of phosphorylation on HSP90’s association with co-chaperone and client proteins. Master’s Thesis (2019). University of New Hampshire.
https://www.amyjet.com/products/N0410.shtml
NanoTag-sdAb抗标签FP生物素:解锁荧光蛋白检测的高特异性
sdAb抗TagFP是一种自主研发的单域抗体(sdAb),对来自Entacmaea quadricolor的荧光蛋白(包括TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2)具有高亲和力和特异性。
荧光蛋白(FPs)作为细胞生物学和显微镜学中广泛使用的蛋白标签,彻底革新了蛋白成像和生化应用。TagRFP是一种单体红色荧光蛋白,它是由TurboRFP(源自Entacmaea quadricolor)改造而来的,具有延长的荧光寿命和增强的光稳定性(Merzlyak等,2007)。通过进一步的突变,这种红色发光蛋白被转化为蓝色发光的TagBFP(Subach等,2008)。几年后,一个改进版本mTagBFP2被引入,提供了更高的亮度和稳定性(Subach等,2011)。2007年,mKate从TagRFP中开发出来,以其出色的远红荧光和光稳定性而闻名(Shcherbo等,2007)。目前可获得的最新变体可以在开源的荧光蛋白数据库FPbase上找到。
sdAb抗TagFP与TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2具有很强的结合力。
艾美捷sdAb抗标签FP生物素:
货号:N0505-BIOTIN
克隆:1H7
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:
免疫荧光(细胞内染色)、免疫组化
注意:本品不推荐用于Western blot检测蛋白,因为sdAb主要识别天然/折叠蛋白。
靶标:TagFP
特异性:识别TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2。
配方:DBCO和生物素偶联的sdAb(C端1:1标记)是从pH 7.4的PBS中冻干的。未偶联的sdAb是从10 mM KPi pH 6.0、150 mM NaCl、1 mM EDTA中冻干的。用250 ul纯水复溶后立即使用(未偶联的sdAb),或用250 ul去离子水中的50%甘油复溶后在-80°C下保存(DBCO和生物素偶联的sdAb)。
kDa:16.0
消光系数:20128
运输:常温
储存:含有冻干蛋白的安瓿可在4°C下保存长达6个月。含有复溶蛋白的安瓿应保存在-20°C或更低温度下。
注意事项:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。
文献参考:
Hellmeier J, Strauss S, Xu S, et al. Quantification of absolute labeling efficiency at the single-protein level. Nat Methods. Published online April 24, 2024. doi:10.1038/s41592-024-02242-5 (ICC/IF; DNA-PAINT)
Unterauer EM, Shetab Boushehri S, Jevdokimenko K, et al. Spatial proteomics in neurons at single-protein resolution. Cell. 2024;187(7):1785-1800.e16. doi:10.1016/j.cell.2024.02.045 (ICC/IF; DNA-PAINT)
https://www.amyjet.com/products/N0505-BIOTIN.shtml
NanoTag-TagFP选择器,更优的缓冲液兼容性与实验灵活性
TagFP选择器基于一种高亲和力的单域抗体(sdAb),该抗体通过共价键固定在4%交联琼脂糖珠上。
抗体固定与性能优势
通过柔性连接链实现的定向和选择性连接,确保了sdAb的高度可及性,并且大大消除了批次间差异。
由于sdAb的单链特性及其共价固定,在使用SDS样品缓冲液洗脱时,不会观察到IgG的轻链和重链“泄漏”。因此,TagFP选择器对TagFP融合蛋白具有高亲和力和卓越的容量,同时显示出可忽略不计的非特异性背景。
TagFP选择器的结合范围
TagFP选择器能够捕获广泛的“Tag”荧光蛋白衍生物,包括TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2。
缓冲液兼容性与实验灵活性
TagFP选择器与常规生理缓冲液以及更严格的组成兼容。因此,TagFP选择器为根据实验需求调整结合和洗涤条件提供了极大的灵活性。
艾美捷TagFP选择器:
货号:N0510
克隆:1H7
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:免疫沉淀(IP)
稀释:不适用
容量:每微升包装珠子可结合>3微克BFP
靶标:TagFP
特异性:识别TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2。可能与其他未测试的TagRFP衍生物发生反应。
配方:PBS中的50%悬浮液,含有20%乙醇
运输:常温
储存:在4℃下储存,最长可达12个月。切勿冷冻!
常见缓冲液物质:pH5至9
表面活性剂:
-2%TritonX-100
-1%Tween-20
-1%NP-40
-1%CHAPS
-1%脱氧胆酸钠
-0.1%SDS
盐类:
-4MNaCl
-2MKCl
-1MMgCl₂
-100mMEDTA
其他:
-4M尿素
-10mMDTT
-10mM2-巯基乙醇
酶类:
-RNaseA
-DNaseI
-Benzonase
-蛋白酶抑制剂
文献参考:
Han Y, Georgii E, Priego-Cubero S, et al. Arabidopsis histone deacetylase HD2A and HD2B regulate seed dormancy by repressing DELAY OF GERMINATION 1. Front Plant Sci. 2023;14:1124899. Published 2023 May 29. doi:10.3389/fpls.2023.1124899 (CoIP; Arabidopsis)
https://www.amyjet.com/products/N0510.shtml
NanoTag-sdAb抗鸡IgY BIOTIN:用于高要求免疫标记和成像应用
sdAb抗鸡IgY(Smart Secondaries)是一种针对鸡IgY的单域抗体,客户可以自行对其进行标记或固定,使其成为用于高要求免疫标记和成像应用的有效二级工具。
鸡免疫库的特点
与任何其他哺乳动物相比,鸡的免疫库要简单得多,只产生一种免疫球蛋白同型(IgY),没有亚类。近年来,使用鸡产生的多克隆抗体的需求稳步增长,这主要是由于在进行多靶点免疫荧光时需要增加一个新的“物种”。
sdAb抗鸡IgY与鸡IgY具有强烈且特异性的结合。
艾美捷sdAb抗鸡IgY BIOTIN:
货号:N0705-BIOTIN
克隆:3G2
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:免疫荧光(IF)、Western blot(WB)
靶标:鸡IgY
特异性:特异性识别鸡IgY。不与以下物种的抗体发生交叉反应:小鼠、兔、豚鼠、大鼠或山羊。
配方:DBCO和生物素偶联的sdAb(C端1:1标记)是从pH 7.4的PBS中冻干的。
未偶联的sdAb是从5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中冻干的。
复溶:用250 uL纯去离子水复溶后立即使用。
用250 uL无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。更多详情,请点击上方的“协议”按钮并查看“复溶和储存”。
其他信息
分子量:14.9 kDa
消光系数:14628
运输:常温
储存:含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后,在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。
注意事项:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。
示例应用:
使用鸡抗MAP2(SYSY编号188006)和与Sulfo-Cyanin 5(绿色)结合的sdAb抗鸡IgY对PFA固定的鼠脑切片进行间接免疫染色。细胞核通过DAPI染色(蓝色)进行可视化。
https://www.amyjet.com/products/N0705-BIOTIN.shtml
NanoTag-sdAb抗人IgM单域抗体:精准靶向人IgM的创新工具
sdAb抗人IgM是一种自主研发的单域抗体,能够以高亲和力和特异性结合细胞表面(例如作为B细胞受体)以及血清中的人IgM。
抗体特性与定制化
抗人IgM单域抗体是一种自主研发的羊驼源性sdAb,能够特异性识别IgM。它与人IgG分子没有交叉反应性。本品可以完全定制以满足您的需求,例如,sdAb抗人IgM也可作为麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白提供,以增加其大小,非常适合用于侧流层析检测中的固定化。
艾美捷sdAb抗人IgM单域抗体:
货号:N1101-1MG
克隆:2F2
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:酶联免疫吸附测定(ELISA)、流式细胞术(FACS)、免疫荧光(IF)、免疫沉淀(IP)
抗原:IgM
靶标:IgM
特异性:特异性针对人IgM。与人IgG、IgE或IgA没有交叉反应性。与小鼠、豚鼠或兔的IgM没有显著交叉反应性。未测试其他物种。
配方:
-未偶联的sdAb是从5mMKPipH6.0、300mMNaCl、0.5mMEDTApH6.0中冻干的。
-sdAb-MBP融合蛋白是从pH7.4的PBS中冻干的。
复溶:
-用500uL纯去离子水复溶(未偶联的sdAb,用于立即与马来酰亚胺化合物标记)。
-用500uL无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存(sdAb-MBP融合蛋白)。
其他信息
分子量:15.7kDa(N1101)和55.7kDa(N1105)
消光系数:21618(N1101)和87905(N1105)
运输:常温
储存:含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后,在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。
注意事项:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。
示例应用:
用与Atto647N结合的抗人IgM单域抗体染色的活Ramos B细胞。
https://www.amyjet.com/products/N1101-1MG.shtml
NanoTag-sdAb抗小鼠BIOTIN特异性结合所有带有κ轻链的小鼠免疫球蛋白同型
大多数研究用单克隆抗体都是在小鼠中产生的。这些动物拥有丰富的免疫球蛋白(Ig)库,表现出各种同型(IgA、IgD、IgG、IgE和IgM)。小鼠IgG可以进一步分为五个亚类:IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c和IgG3。除了这些亚类外,每个IgG分子还可以配备λ或κ轻链。
NanoTag的抗小鼠κ轻链单域抗体(sdAb)能够特异性结合所有带有κ轻链的小鼠免疫球蛋白同型。
艾美捷sdAb抗小鼠BIOTIN:
货号:N1205-BIOTIN
克隆:1A23
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、Western blot(WB)
靶标:小鼠κ轻链
特异性:特异性识别小鼠免疫球蛋白κ轻链。不与以下物种的抗体发生交叉反应:大鼠、豚鼠、兔、鸡或山羊。
配方与复溶
配方:DBCO和生物素偶联的sdAb(C端1:1标记)是从pH 7.4的PBS中冻干的。
未偶联的sdAb是从10 mM KPi、150 mM NaCl、1 mM EDTA pH 6.0中冻干的。
复溶:
用250 uL纯水复溶后立即使用。
用250 uL 50%甘油复溶后在-80°C下保存。
其他信息
分子量:16.2 kDa
消光系数:33078
运输:常温
储存:
含有冻干蛋白的安瓿可在4°C下保存长达6个月。
含有复溶蛋白的安瓿应保存在-20°C或更低温度下。
注意事项:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。
文献参考:
Unterauer EM, Schentarra EM, Jevdokimenko K, et al. Protocol for SUM-PAINT spatial proteomic imaging generating neuronal architecture maps in rat hippocampal neurons. STAR Protoc. 2025;6(1):103637. doi:10.1016/j.xpro.2025.103637 (ICC/IF; DNA-PAINT)
Hellmeier J, Strauss S, Xu S, et al. Quantification of absolute labeling efficiency at the single-protein level. Nat Methods. Published online April 24, 2024. doi:10.1038/s41592-024-02242-5 (ICC/IF; DNA-PAINT)
https://www.amyjet.com/products/N1205-BIOTIN.shtml
NanoTag-sdAb抗小鼠Ig kappa轻链Halo融合,可用作免疫荧光中的二级试剂
抗小鼠κ轻链单域抗体Halo融合蛋白将一种针对所有带有κ轻链的小鼠免疫球蛋白同型具有特异性的单域抗体(sdAb)与基于脱卤酶的技术相结合。Halo蛋白标签序列被融合到了抗小鼠κ轻链单域抗体的C末端。
单克隆抗体研究背景
大多数研究用单克隆抗体都是在小鼠中产生的。这些动物拥有丰富的免疫球蛋白(Ig)库,表现出各种同型(IgA、IgD、IgG、IgE和IgM)。小鼠IgG可以进一步分为五个亚类:IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c和IgG3。除了这些亚类外,每个IgG分子还可以配备λ或κ轻链(KLC)。
抗小鼠κ轻链单域抗体Halo融合蛋白特性
抗小鼠κ轻链单域抗体Halo融合蛋白将一种针对所有带有κ轻链的小鼠免疫球蛋白同型具有特异性的单域抗体(sdAb)与基于脱卤酶的技术相结合。Halo蛋白标签序列被融合到了抗小鼠κ轻链单域抗体的C末端。
Halo指的是一种经过改造的细菌酶——卤代烷脱卤酶,该酶被设计为能够与合成配体共价结合。这些配体可以与各种功能团(如荧光团、生物素或珠子)结合,从而实现众多生化、蛋白质组学和成像应用。当与荧光Halo配体结合时,抗小鼠κ轻链单域抗体Halo融合蛋白可用作免疫荧光中的二级试剂,特异性结合所有带有κ轻链的小鼠免疫球蛋白同型。
货号:N1241
克隆:1A23
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)
稀释:对于免疫细胞化学(ICC),使用抗小鼠κ轻链单域抗体Halo融合蛋白时,稀释比例为1:500。
靶标:小鼠κ轻链
特异性:特异性识别小鼠免疫球蛋白κ轻链。不与以下物种的抗体发生交叉反应:大鼠、豚鼠、兔、鸡或山羊。
配方:抗小鼠Igκ轻链单域抗体Halo融合蛋白是从pH 7.4的PBS中冻干的,含有2% BSA(美国产地)。
复溶后,在200 μL无菌50%甘油(体积比)的去离子水中,抗小鼠Igκ轻链单域抗体Halo融合蛋白的最终浓度为0.25 mg/mL。
分子量:48.6 kDa
消光系数:91580
运输:常温
储存:含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后,在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。
注意事项:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。
示例应用:
A. 用4%多聚甲醛固定的HeLa细胞的免疫细胞化学。HeLa细胞用小鼠抗α微管蛋白一抗(Synaptic Systems编号302211;1:1000稀释)和抗小鼠Igκ轻链单域抗体Halo融合蛋白(产品编号N1241;10 nM)染色,并用荧光标记的Halo配体(品红色)检测。
B. 对应的DAPI染色(蓝色)的假彩色表示。
C. A和B的合并图像。
https://www.amyjet.com/products/N1241.shtml
NanoTag-sdAb抗mScarlet-i生物素,特异性且强烈地结合多种mScarlet变体
sdAb抗mScarlet-i是一种自主研发的单域抗体(sdAb),能够以高亲和力和特异性识别mScarlet变体(包括-i、H和3)。
mScarlet背景与特性
mScarlet是通过体外合成多种红色荧光蛋白的共识模板创建的(参考文献)。它是目前已知最亮的(大约比mCherry亮3倍)且真正的单体荧光蛋白之一,非常适合用于细胞成像(FPbase)。mScarlet通常有两种不同的版本,每个版本都带有一个独特的单氨基酸替换:mScarlet-I(T74I),其成熟速度更快;mScarlet-H(M164H),其光稳定性更高。目前可获得的最新变体可以在开源的荧光蛋白数据库“fpbase”中找到。
NanoTag的纳米抗体特异性且强烈地结合多种mScarlet变体(已验证包括mScarlet-I、mScarlet-H和mScarlet-3)。
货号:N1305-BIOTIN
克隆:2B12
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:免疫荧光(IF)
使用注意事项:本品不推荐用于Western blot检测蛋白,因为sdAb主要识别天然/折叠蛋白。
抗原:mScarlet-i
靶标:mScarlet-i、mCherry
特异性:在天然构象下识别mScarlet-i和mScarlet-3。与一些mRFP衍生的红色荧光蛋白(如mCherry)发生交叉反应。
配方:DBCO和生物素偶联的sdAb(C端1:1标记)是从pH 7.4的PBS中冻干的。
未偶联的sdAb是从5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中冻干的。
HRP偶联的sdAb是从HRP保护缓冲液中冻干的,应使用200 uL纯水复溶后在4°C下保存,或使用200 uL高纯度无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。
复溶:
用250 uL纯去离子水复溶后立即使用。
用250 uL无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。
运输:常温
储存:含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后,在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。
注意事项:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。
示例应用:
A. 用4%多聚甲醛固定的COS7细胞表达TOM70-nfScarlet融合蛋白(nf:非荧光)的灰度图像,使用FluoTag-X2抗mScarlet-i与Atto 488偶联(产品编号N1302-At488,稀释比例1:500)进行染色。
B. A图的假彩色表示,显示为绿色(根据所用荧光团的激发波长进行着色)。
C. 所描绘部分的相应DAPI信号。
D. A和C的合并图像。A的假彩色表示为绿色,C为蓝色。
文献参考:
Masullo LA, Kowalewski R, Honsa M, et al. Spatial and stoichiometric in situ analysis of biomolecular oligomerization at single-protein resolution. Nat Commun. 2025;16(1):4202. Published 2025 May 6. doi:10.1038/s41467-025-59500-z (ICC/IF; DNA-PAINT; Exchange-PAINT; CHO cells)
https://www.amyjet.com/products/N1305-BIOTIN.shtml
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