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SYBR Green检测冻干制剂:具有高度的特异性和灵敏度

武汉艾美捷科技有限公司2024年4月24日 3:40 点击:415

SYBR Green检测冻干制剂:具有高度的特异性和灵敏度

 

SYBR Green检测冻干制剂是为使用荧光DNA染料SYBR Green进行DNA样本的定量实时分析而设计的。在PCR过程中,主混合物中的荧光染料插入到扩增产物中,使得在不需要合成特异性标记探针的情况下,能够快速分析目标DNA。它提供了一个易于操作且功能强大的工具,可以在高达6个数量级的宽动态范围内,以卓越的灵敏度和精确度对样本DNA进行定量。

 

艾美捷SYBR Green检测冻干制剂/qPCR SybrMaster冻干品(PCR-173S)包含了进行qPCR所需的所有试剂(除了模板、引物和标记荧光探针),全部封装在单个珠子中。基于优化的热启动聚合酶,该混合物具有高度的特异性和灵敏度。其活性在常温下被阻断,并在初始变性开始时自动激活。热激活防止了在PCR设置期间低温下非特异性结合引物和引物二聚体的形成。

 

推荐的PCR检测:

1)每种引物的Z佳浓度可以在100500nM之间变化。

引物混合液的准备:

12个样本或4个样本的三重组合准备13体积的引物混合液,如说明书所述。使用无菌过滤头的移液管取液,并尽量减少标记的DNA探针暴露于光线下。应在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。在所有应用中都应包括无模板对照(NTC)。

分配主混合物:

彻底振荡引物/探针混合液以确保均匀性。向每个PCR管或板孔分配15微升。

加入模板DNA

向每个反应容器中加入5微升的模板DNA(或无模板对照),并盖紧或密封管子/板。每个反应的最终浓度不要超过200纳克DNA。在循环前应对管子或板进行离心,以去除可能的气泡。

建议的循环条件:

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2) 退火温度取决于所使用的引物的熔解温度。

3) 延伸时间取决于扩增子的长度。建议对最多500碱基对(bp)的片段使用30秒的时间。为了获得Z佳的特异性和扩增效果,对于每种新的模板DNA和引物对组合,可能需要特别对推荐的参数进行个别优化,尤其是退火温度。

 

https://www.amyjet.com/products/PCR-173S.shtml

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钌光引发剂足够用于>200毫升的生物墨水/水凝胶

 

钌是一种光引发剂,它利用可见光光交联(400-450nm)共价交联游离酪氨酸和丙烯酰基。 钌光引发剂已在 I 型胶原蛋白、明胶、丝素蛋白、甲基丙烯酸化透明质酸、甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化 I 型胶原蛋白和 PEGDA 上进行了测试。 钌可见光光交联试剂盒是组织工程、细胞培养和生物打印的理想选择。

 

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艾美捷钌光引发剂/ Ruthenium PhotoinitiatorABM-5248-1KIT非常适合组织工程、细胞培养和生物打印,这些应用中需要调节基质的机械性能。该套件提供的光引发剂足够用于>200毫升的生物墨水/水凝胶(按照推荐的浓度)。

 

钌光引发剂由两个组分组成,如所示

Item Catalog Number Package Size

Ruthenium Photoinitiator #5246 200 mg

Sodium Persulfate Photoinitiator #5247 1 gram

 

钌光引发剂存储/稳定性:

产品在常温下运输。将套件存放在室温下。称量所需量的粉末进行溶解。一旦溶解后,请在2周内使用钌和过硫酸钠。

未溶解的干粉(非溶解的)在室温下稳定存放超过1年。

 

钌光引发剂使用说明:

1. 计算所需的水凝胶或生物墨水(ECM + 细胞)的体积。

2. 将所需体积乘以0.02。这是您将添加到预水凝胶溶液中的钌和过硫酸钠(每种)的数量。

3. 37.4 mg/mL的浓度在水中或1X PBS中溶解所需的钌。

4. 119 mg/mL的浓度在水中或1X PBS中溶解过硫酸钠。

5. 将计算出的体积(步骤2)的钌添加到您的预水凝胶溶液中,并彻底混合。

6. 将计算出的体积(步骤2)的过硫酸钠添加到您的预水凝胶溶液中,并彻底混合。

注意事项:

在添加到预水凝胶之前,不要将钌和过硫酸钠混合在一起。您会得到一个快速的氧化还原反应,它们会立即沉淀。

7. 如果需要,添加细胞。

8. 400-450nm的波长下进行光交联。最初的建议是50 mW/cm²超过3分钟以保持形状/水凝胶保真度。您可以调整光引发剂浓度、光强度和光交联时间,以定制最终水凝胶的硬度。

 

注意

如果使用中和的I型胶原,您可以允许胶原在37°C下聚合形成水凝胶,然后进行光交联以进一步交联并调节凝胶硬度。

 

https://www.amyjet.com/products/ABM-5248-1KIT.shtml

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LAP光引发剂 (405nm),非无菌Irgacure 2959更适合生物应用

 

LAP 是一种水溶性光引发剂,用于水凝胶或生物墨水的聚合。 LAP 通过 405 nm 蓝光进行光交联,由于细胞相容性得到改善,通常优于 Irgacure 2959

 

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艾美捷LAP光引发剂ABM-5269-500MG使用说明

注:对于LAP,以下建议将产生大约0.03%ZLAP浓度。对于某些应用,如DLP打印,ZLAP浓度应增加到大约0.25-0.5%

1.通过将水凝胶溶液或生物墨水的体积乘以0.02来计算要添加的光引发剂体积。如果得出的数字是200微升,例如,您将添加200微升的LAP

2.1X PBS或细胞培养基中以17毫克/毫升的浓度溶解所需数量的LAP(步骤1)。

3.将计算出的光引发剂体积添加到所需的水凝胶或生物墨水溶液体积中,并彻底混合。

4.如果需要,将您的细胞添加到HA溶液中。

5.将您的溶液分配或生物打印到所需的培养容器中(例如6孔板,48孔板)。

6.对于光交联,将水凝胶溶液直接放置在405纳米光交联源下。

7.您可以调整光引发剂浓度、光强度和光交联时间,以定制Z终水凝胶的硬度。

 

LAP光引发剂 (405nm),非无菌Q & A

什么是与LAP交联的良好光源?

我们Z近一直在使用亚马逊上的这种现成的405nm蓝光。对于我们Z初的使用甲基丙烯酰化水凝胶的LAP交联研究,这盏灯似乎效果很好,但我们正在努力验证这盏灯是否适用于组织工程和细胞培养目的(确认波长、光强度等)。

 

该产品通过凝胶包装运输。将产品储存在2-8°C的条件下。称取所需的粉末量以溶解。一旦溶解后,请在两周内使用。

 

未溶解的干粉在2-8°C的条件下可以稳定保存超过1年。

 

LAP光引发剂相关产品:

PureCol I型胶原蛋白溶液,3 mg/ml(来自牛)#5005

Nutragen I型胶原蛋白溶液,6 mg/ml(来自牛)#5010

FibriCol I型胶原蛋白溶液,10 mg/ml(来自牛)#5133

PureCol EZ凝胶中和I型胶原蛋白溶液,约5 mg/ml(来自牛)#5074

PureCol冻干I型胶原蛋白粉,15 mg(来自牛)#5006

VitroCol I型胶原蛋白溶液,3 mg/ml(来自人)#5007

VitroCol冻干I型胶原蛋白粉,15 mg(来自人)#5008

 

https://www.amyjet.com/products/ABM-5269-500MG.shtml

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Bst聚合酶:配合绿色荧光DNA染料稳健扩增DNA

 

Bst聚合酶/Sapphire Bst GreenMaster冻干液:用于等温DNA扩增的冻干粉,配合绿色荧光DNA染料。

 

艾美捷Bst聚合酶/Sapphire Bst GreenMaster冻干液PCR-398S):

描述:

Saphir Bst Green Master Lyophilisate是一种用于等温DNA扩增的冻干主混合物,使用LAMP(环介导等温扩增)技术,并配合绿色荧光DNA染料。该混合物基于Bst聚合酶的活性,是快速且稳健地在恒定温度(6065°C)下扩增DNA的理想选择。该酶显示出高链置换活性,可产生高达10^9的扩增因子,相当于PCR检测中大约30个循环。

Saphir Bst Green Master Lyophilisate允许在10-20分钟内检测到目标基因。

 

Bst聚合酶内容:

Saphir Bst Green Master Lyophilisate

Saphir Bst聚合酶、dNTPs(脱氧核苷酸三磷酸)、反应缓冲液、绿色DNA插入染料、添加剂和稳定剂,以冻干形式提供,最终检测体积为20微升。

 

Bst聚合酶处理:

Saphir Bst Green Master Lyophilisate8管条或96孔板的形式提供,预装有完整的主混合物,以干燥、室温稳定的格式。该冻干粉结合了高性能与使用的便利性和稳定性。无需冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤最大限度地减少了错误或污染的风险。

每个小瓶包含所有组分(除引物和模板外),适用于20微升LAMP检测。

要执行检测,只需向小瓶中加入引物混合液并添加DNA模板。

该冻干粉还可以与ROX参考染料一起使用,在与ROX信号评估兼容的PCR仪器中。在这种情况下,应将ROX染料(#PCR-351)以1倍浓度添加到PCR反应中。

 

Bst聚合酶检测设计:

等温扩增是一种极其敏感的检测方法,应小心避免将DNA污染到设置区域和设备中,以防止与之前反应的DNA交叉污染。可能会出现无模板对照中的扩增问题,原因是携带污染或非特异性结合引物或引物二聚体的形成。

 

Bst聚合酶引物设计:

通常使用4种不同的引物来识别6个不同的DNA区域,允许特异性扩增目标基因。另外一对引物可以进一步加速扩增,将总检测时间缩短到10-20分钟。

由于反应序列复杂,手动设计引物可能具有挑战性。为了简化设计过程,建议使用引物设计软件。

由于计算机设计的引物的灵敏度和非模板扩增可能会有所不同,建议在选定最终组之前评估2-4组真实的引物集。

 

Bst聚合酶检测设置:

使用无菌过滤头的移液管,并在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。在所有扩增中都应包括无模板对照。

首先,准备一个10倍浓度的引物预混合液。其次,设置等温扩增检测:

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Bst聚合酶分配主混合物

彻底振荡引物/探针混合液以确保均匀性。

向每个PCR管或板孔分配20微升。

 

使用特定的等温扩增检测仪器或实时PCR循环仪来运行检测

将仪器设置为在6065°C之间的恒定孵化温度(取决于引物的退火温度)

1分钟的间隔测量荧光强度,持续Z30分钟。

 

Bst聚合酶相关产品:

Saphir Bst Polymerase, #PCR-389

Saphir Bst GreenMaster, #PCR-387

Saphir Bst GreenMaster high ROX, #PCR-388

 

https://www.amyjet.com/products/PCR-398S.shtml

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艾美捷LDN Labor Diagnostika Nord体外诊断测试系统方案

 

LDN Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG(简称LDN)旨在开发、制造和向临床和研究实验室市场提供专业的体外诊断测试系统和创新技术。ELISA试剂盒产品涉及食品安全、食品不耐受、神经递质和氨基酸等相关诊断领域。使用免疫测试系统测定生物胺类,如 5-羟色胺,组胺,多巴胺,去甲肾上腺素,等多种指标。

 

此外,LDN Labor Diagnostika Nord提供一个全面的内分泌产品组合,如游离睾酮、17-OH孕酮、嗜铬粒蛋白aDHT、雌酮。LDN持续的不断创新,平均每年开发5-7种新产品。LDN符合EN ISO 90012015EN ISO 134852016 + AC2016认证标准的质量体系。

 

作为LDN Labor Diagnostika Nord在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的LDN Labor Diagnostika Nord产品。

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艾美捷LDN Labor Diagnostika Nord部分特色产品推荐:

货号  名称 规格

AA E-1000R  Androstenedione ELISA (RUO)Kit 96determinations

AA E-1100R  DHEA-S ELISA(RUO)Kit 96determinations

AA E-1200R  SHBG ELISA (RUO)Kit 96determinations

AA E-1300R  Testosterone ELISA (RUO)Kit 96determinations

AA E-1500R  Androstanediol-Glucuronide ELISA (RUO)Kit 96determinations

AA E-1600R  DHEA ELISA (RUO)Kit 96determinations

AA E-1800R  Free Testosterone ELISA 2nd generation (RUO)Kit 96determinations

AA E-1900R  DHT ELISA (RUO)Kit 96determinations

AR E-8000R  Testosterone mouse ELISA (RUO)Kit 96determinations

AR E-8100R  Corticosterone mouse/rat ELISA (RUO)Kit 96determinations

AR E-8300R  Estrone3-Sulfate equine ELISA (RUO)Kit 96determinations

AR E-8500R  TSH canine ELISA (RUO)Kit 96determinations

AR E-8600R  TSH Rat ELISA (RUO)Kit 96determinations

AR E-8700R  Progesterone rat/mouse (RUO)Kit 96determinations

AR E-8800R  Estradiol rat ELISA (RUO)Kit 96determinations

BA E-1000R  Histamine ELISA (RUO)Kit 96determinations

BA E-1100R  Histamine Release (RUO)Kit 96determinations

BA E-1900R  5-HIAA ELISA (RUO)Kit 96determinations

BA E-2200R  Kynurenine ELISA (RUO)Kit 96determinations

BA E-2400R  Glutamate ELISA (RUO)Kit 96determinations

 

艾美捷科技是LDN Labor Diagnostika Nord的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/news/LDN-new.shtml

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艾美捷LDN Labor Diagnostika Nord雄激素二酮ELISA检测原理

 

LDN Labor Diagnostika Nord雄激素二酮ELISA是一种酶免疫测定法,用于定量测定血清和EDTA血浆中的雄激素二酮。

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艾美捷LDN Labor Diagnostika Nord雄激素二酮ELISAAA E-1000R):

名称:雄烯二酮ELISA

描述:

用于血清和EDTA血浆中雄烯二酮定量测量的酶免疫测定法。

设计:ELISA

样本体积:

20微升血清或血浆

总检测时间:1小时30分钟

标准范围:

0/0.1 10纳克/毫升

灵敏度:

0.021纳克/毫升

储存条件:2 8°C

试剂盒:96次测定

CE认证:是

 

LDN Labor Diagnostika Nord雄激素二酮ELISA检测原理

雄烯二酮酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒是一种固相酶联免疫吸附试验,基于竞争性结合的原理。

微孔板被涂覆有针对雄烯二酮分子抗原位点的多克隆(兔源)抗体。

在第一次孵化过程中,添加的样本中的雄烯二酮与添加的酶结合物竞争,该酶结合物是与辣根过氧化物酶结合的雄烯二酮分子,以与涂覆的抗体结合。

经过一个洗涤步骤,去除所有未结合的物质后,固相与底物溶液孵化。通过添加停止溶液突然停止反应,并测量生成的黄色产物的光密度(OD)。颜色的强度与样本中分析物的浓度成反比。

通过绘制标准品的OD值与浓度的标准曲线,并使用该标准曲线确定未知样本的浓度。

 

LDN Labor Diagnostika Nord雄激素二酮ELISA参考文献:

1. Kicman, A. T., Bassindale, T., Cowan, D. A., Dale, S., Hutt, A. J., and Leeds, A. R. Effect ofandrostenedione ingestion on plasma testosterone in young women; a dietary supplement with potentialhealth risks. Clin Chem 2003, 49:167-169.

2. Brown, G.A., Vukovich, M.D., Martini, E.R., Kohut, M.L., Franke, W.D., Jackson, D.A., and King, D.S.Endocrine responses to chronic androstenedione intake in 30- to 56-year-old men.J Clin Endocrinol Metab 2000, 85:4074-4080.

3. Erickson GF 1993 Normal regulation of ovarian androgen production.Seminars in Reproductive Endocrinology 11:307-3124. Mango D, Scirpa P, Battaglia F, Tartaglia E, Manna P. Diagnostic significance of steroid hormones inpatients with ovarian cancer. J Endocrinol Invest. 1986 Aug;9(4):307-14

 

LDN Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG(简称LDN)旨在开发、制造和向临床和研究实验室市场提供专业的体外诊断测试系统和创新技术。艾美捷科技是LDN Labor Diagnostika Nord的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/news/LDN-new.shtml

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艾美捷LDN Labor Diagnostika Nord-DHEA-S ELISA定量方案

 

LDN Labor Diagnostika Nord-DHEA-S ELISA:用于人血清中硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)直接定量测定的酶免疫测定法。

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艾美捷LDN Labor Diagnostika Nord-DHEA-S ELISAAA E-1100R):

名称:DHEA-S ELISA

描述:用于人血清中DHEA-S直接定量测定的酶免疫测定法。

设计:ELISA

样本体积:25微升血清

总检测时间:60分钟

标准范围:0/0.005 10微克/毫升

灵敏度:0.005微克/毫升

储存条件:2 8°C

试剂盒:96次测定

CE认证:是

 

LDN Labor Diagnostika Nord-DHEA-S ELISA检测原理

在未标记的抗原(存在于标准品、对照品和样品中)和无酶标记抗原(缀合物)之间发生竞争,争夺微孔板上有限数量的抗体结合位点。洗涤和倾析程序去除未结合的材料。在洗涤步骤之后,酶底物被除去。通过加入终止溶液终止酶促反应。吸光度通过微量滴定板读数器进行测量。所形成的颜色的强度与样品中DHEA-S的浓度成反比。一组标准用于绘制标准曲线,从该曲线可以直接读取DHEA-S样品和对照的量。

 

LDN Labor Diagnostika Nord-DHEA-S ELISA参考文献:

1. Chasalow FI, Blethen SL, Bradlow HL. Dehydroepiandrosterone Sulfate (DHEAS) and DHEAS-likeCompounds in Fibrocystic Disease of the Breast. Steroids. 1988; 52(3):20515.

2. Chasalow FI, et al. Serum Levels of Dehydroepiandrosterone Sulfate as Determined by Commercial Kitsand Reagents. Steroids. 1989;54(4):37381.

3. de Peretti E, Forest MG. Pattern of Plasma Dehydroepiandrosterone Sulfate Levels in Humans from Birthto Adulthood: Evidence for Testicular Production. J Clin Endocrinol Metab. 1978; 47(3):57277.

4. Holtzclaw WD, Gordon GB. Measurement of Serum Levels of Dehydroepiandrosterone Sulfate: AComparison of Radioimmunoassay and Enzymatic Analysis. Steroids. 1989; 54(4): 35571.

5. Koritnik DR, et al. A Radioimmunoassay for Dehydroepiandrosterone Sulfate in the Circulation of RhesusMonkeys. Steroids. 1983; 42(6):65367.

6. Orentreich N, et al. Age Changes and Sex Differences in Serum Dehydroepiandrosterone SulfateConcentrations Throughout Adulthood. J Clin Endocrol Metab. 1984; 59(3):55155.

7. Smith MR, et al. A Radioimmunoassay for the Estimationof Serum Dehydroepiandrosterone Sulphate inNormaland Pathological Sera. Clin Chim Acta. 1975; 65(1): 513.

8. Check JH, et al. Falsely Elevated Steroidal Assay Levels Related to Heterophile Antibodies Against VariousAnimal Species. Gynecol Obstet Invest. 1995; 40(2):13940.

 

LDN Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG(简称LDN)旨在开发、制造和向临床和研究实验室市场提供专业的体外诊断测试系统和创新技术。艾美捷科技是LDN Labor Diagnostika Nord的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/news/LDN-new.shtml

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艾美捷LDN Labor Diagnostika SHBG ELISA (RUO) Kit:用于人血清或血浆中SHBG的高精度定量检测

 

LDN Labor Diagnostika Nord-SHBG ELISA (RUO) Kit:血清或血浆中性激素结合球蛋白(SHBG)的酶免疫测定。

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艾美捷LDN Labor Diagnostika Nord-SHBG ELISA (RUO) KitAA E-1200R):

名称:SHBG ELISA

描述:

用于血清或血浆中性激素结合球蛋白(SHBG)定量测量的酶免疫测定法。

设计:ELISA

样本体积:

50微升预稀释的血清或血浆

总检测时间:2小时45分钟

标准范围:0/4 260纳摩尔/

灵敏度:0.408纳摩尔/

储存条件:2 8°C

试剂盒:96次测定

CE认证:是

 

LDN Labor Diagnostika Nord-SHBG ELISA (RUO) Kit检测原理

性激素结合球蛋白(SHBG)是一种95kD的同源二聚体糖蛋白,在肝脏中合成,在血浆中的半衰期为7天。SHBG以高亲和力特异性结合类固醇激素(DHT>睾酮-雌二醇;DHEA/雄烯二酮/雌三醇),其主要功能是性类固醇在血流内和血管外靶组织中的转运。SHBG还通过性类固醇对可用结合位点的竞争和SHBG浓度的波动,在调节生物可利用性类固醇浓度方面发挥关键作用。血液中SHBG浓度表现出高度的个体间变异性,并受雄激素/雌激素平衡、营养状况、体重指数、性别、胰岛素浓度等因素的影响。

 

LDN Labor Diagnostika Nord-SHBG ELISA (RUO) Kit参考文献:

1. Moore, JW and Bulbrook RD. The epidemiology and function of sex hormone binding globulin.IN Oxford Rewievs of Reproductive Biology, 1988; 10: 180 - 236.

2. Selby, C. Sex hormone binding globulin: origin, function and clinical significance.Ann. Clin. Biochem. 1990; 27: 532 - 541.

3. Tehernof A, Despres JP: Sex steroid hormone, sex hormone-binding globulin, and obesity in men andwomen.Horm. Metab. Res.2000; 32:526-536.

4. Kahn SM, Hryb DJ, Nakhle AM, Romas NA: Sex hormone-binding globulin is synthesized in target cells.J Endocrinol 2002; 175:113-120.

5. Hammond GL: Access of reproductive steroids to target issues.Obstet Gynecol Clin North Am 2002; 29:411-423.

6. 5. Elmlinger MW, Kuhnel W, Ranke MB: Reference ranges for serum concentrations of lutropin (LH),follitropin (FSH), estradiol (E2), prolactin, progesterone, sex hormone binding globulin (SHBG),dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S), cortisol and ferritin in neonates, children, and young adults.Clin Chem Lab Med 2002; 40(11):1151-1160.

7. Deswal ., Yadav A, Dang AS Sex hormone binding globulin - an important biomarker for predictingPCOS risk: A systematic review and meta-analysis.Syst Biol Reprod Med 2018; 64: 12-24.

8. Sanches de Melo et al. Hormonal contraception in women with polycystic ovary syndrome: choices,challenges, and noncontraceptive benefits.Open Access J Contracept.2017; 2;8:13-23.

 

LDN Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG(简称LDN)旨在开发、制造和向临床和研究实验室市场提供专业的体外诊断测试系统和创新技术。艾美捷科技是LDN Labor Diagnostika Nord的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/news/LDN-new.shtml

 

 

 

 

 


(来源: 武汉艾美捷科技有限公司    修改于:2024年4月24日 15:41)


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