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YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒
YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒
  • YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒

YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒

产品报价:3980元

更新时间:2020/1/20 11:46:02

地:上海

牌:R&D

号:YS-0000109

厂商性质:

公司名称: 上海一研生物科技有限公司

产品关键词: YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒   YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒   YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒  

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YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒样本采集、存放及运输:

1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;

2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);

3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点:

1.即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,操作简单,定量准确快速。

2.引物经过优化,特异性强。预期的PCR产物长度为560 bp。

3. PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

4.提供阳性对照,便于分析试验结果。

YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒用途:

1.方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR实验。

2.快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。

3.本产品A型含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。

4.由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA样品。

5.产物可直接用于T载体克隆,不需要额外的加A反应。

使用及效果:将本产品15 μL与用户自备的模板,引物和水共15 μL混合后,直接进行PCR反(PCR参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL电泳检查扩增结果。

YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒反应五要素:

鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G C含量以40-60%为宜,G C太少扩增效果不佳,G C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

YS-0000109鲍氏不动杆菌PCR定量试剂盒避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。注意事项:

①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。