EY-ES002CD40 免疫组化试剂盒

EY-ES002CD40 免疫组化试剂盒该试剂盒以 HRP 标记的链霉亲和素复合物（HRP Streptavidin Conjugate，

HRP-SA）为基础，可用于检测血液,细胞、组织内的特异性 CD40 抗原。该试剂盒

具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的 CD40 一抗与相

应靶抗原结合后，用生物化二抗与一抗特异性结合，最后加入 HRP-SA，形成抗

原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA 复合物，显微镜下观察成像。 

试剂盒所含试剂： 

试剂 A 通透液：0.1% Triton-X 100   10 mL（选用） 

试剂 B 封闭缓冲液（封闭用） 20 mL 

试剂 C （原装进口分装）已稀释的即用型 CD40 一抗（2.5ml） 

试剂 D （原装进口分装）生物素化羊抗兔 IgG 1 支 

（浓度 1.5 mg/mL，稀释比为 1:300~1:500）50 μL+抗体稀释液 20ml 

试剂 E HRP-SA 复合物 1 支（浓度 1 μM，稀释比 1:50~1:200）100 μL 

试剂 F DAB 显色液 5ml 

用户自备试剂： 

1． 10mM TBS（pH7.2~7.4） 

三羟基氨基甲烷 1.21g 

氯化钠 7.6g 

加蒸馏水 800mL，浓盐酸调 pH 值至 7.2~7.4，最后定容至 1000mL 

TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%体积比） 

2．抗原修复液（依检测抗原不同而选择不同的修复液） 

10mM pH6.0 柠檬酸缓冲液 

柠檬酸 0.38g 

柠檬酸三钠 2.45g 

加蒸馏水 900mL，浓盐酸调 pH 值至 6.0，最后定容至 1000mL 

或：0.5M EDTA 修复液（pH8.0） 

EDTA·2H2O 186.1g 

加蒸馏水 700mL，用 10mM NaOH 调 pH 值至 8.0，最后定容至 1000Ml 

3. 缓冲甘油封固剂 10 mL 

4. Tween 20 5 mL 

附 1： 

EY-ES002CD40 免疫组化试剂盒抗原修复方法

常用抗原修复液：柠檬酸缓冲液（0.01M pH6.0）、EDTA 抗原修复液（pH8.0 或

9.0）等等。 

一、酶消化修复法酶消化修复

切片脱蜡水化处理，TBS 冲洗，在组织上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育

20~30min 后 TBS 冲洗即可。 

二、微波抗原修复法

微波盒中加入抗原修复液微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的切片置于耐高温塑料

切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档或高档继续微波 10~15min，取出微波

盒冷却至室温后，自来水冲洗，取出切片。因不同微波炉微波处理时间存在差异，

须自行调整。 

三、直接高压抗原修复法

取修复液于不锈钢高压锅中加热至沸腾，将组织切片置于耐高温切片架上，修复

液沸腾后放入切片架，盖上锅盖，待喷气后计时 1.5~2.5min 即可脱离热源，自

然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。 

四、EY-ES002CD40 免疫组化试剂盒隔水式高压抗原修复法

不锈钢高压锅中加自来水加热至沸腾，微波盒中加入修复液于微波炉中加热至沸

腾，将切片放入微波盒中，再将微波盒放入高压锅中盖上锅盖，待喷气后计时

4~8 min 即可关闭热源，自然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用

于较难检测或核抗原的修复。