Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1U/μl) 虾碱性磷酸酶10322ES72
产品报价:656元
更新时间:2024/3/25 11:30:24
产地:上海
品牌:翌圣生物
型号:10322ES72
厂商性质: 生产型,贸易型,服务型,
公司名称: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
翌圣生物科技(上海)股份有限公司 : (13916792673) (400-6111-883)
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产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl) 虾碱性磷酸酶 | 10322ES72 | 250 U | 656.00 |
产品描述
Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板。
本品为虾来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。该酶作用于末端去磷酸化,无论末端为粘端,还是平端。SAP 也可以用来降解PCR 反应中的dNTPs,用于后续测序和SNP分析。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 |
10322ES72(250 U) | ||
20429-A | Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP) (1 U/μl) | 250 U |
20429-B | 10×rSAP buffer | 1.25 ml |
产品性质
来源(Source) | 携带北极虾(Pandalus borealis)碱性磷酸酶基因表达质粒的毕赤酵母 |
分子量(Molecular Weight) | 单体分子量54 kDa;rSAP为同源二聚体。 |
质量控制(Quality Control) | 无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染 |
比活(Specific Activity) | ~3000 U/mg |
纯度(Purity)SDS-PAGE | >95% |
热灭活(Thermal Inactivation) | 65℃温浴5 min,活性完全不可逆丧失 |
储存液条件(Storage conditions) | 25 mM Tris-HCl (pH7.5), 1 mM MgCl2, 50% Glycerol |
活性定义(Unit definition) | 在37℃条件下,1ml反应体系中1min内能水解对硝基苯酚磷酸盐(p-nitrophenylphosph- ate)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存。
注意事项
1)本品同其他碱性磷酸酶类似,具有Zn2+和Mg2+依赖性,本品配方中酶活性中心有紧密结合的锌原子,反应中无需再次补充。
2)金属离子螯合剂(如EDTA)、无机磷酸盐等会抑制该酶活性。单价盐离子会使活性增强。
3)DTT、β-ME等还原剂存在时,该酶活性会降低。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
DNA去磷酸化
① 在EP管中加入下列试剂*:
组分 | 体积 |
DNA 片段** | 1 pmol |
10×rSAP buffer | 2 μl |
Shrimp Alkaline Phosphatase (1 U/μl) | 1 μl |
无菌ddH2O | Up to 20 μl |
【*】可根据比例相应放大反应体系。
【**】1 pmol DNA片段量约相当于1ug 3kb大小的质粒。
② 混匀上述试剂,于37℃孵育30 min。
③ 将EP管65℃,5 min温浴,终止反应。
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