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Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module 快速DNA连接模块12607ES24
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Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module 快速DNA连接模块12607ES24

产品报价:3263元

更新时间:2019/6/24 14:19:40

地:上海

牌:翊圣生物

号: 12607ES24

厂商性质: 生产型,贸易型,服务型,

公司名称: 上海翊圣生物科技有限公司

产品关键词: DNA连接模块   NGS   DNA文库构建  

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Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation Module

快速DNA连接模块

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation Module

快速DNA连接模块

12607ES24

24T

3263.00

12607ES96

96T

10863.00

产品描述

Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation Module是针对Illumina?高通量测序平台文库构建专业设计的DNA连接模块。本产品可在双链平末端DNA片段或双链3′-dA DNA片段的两端连接Illumina?测序平台适用的DNA接头,具有连接效率高、简便、可实现自动化等优势。本产品已与Hieff NGS? End Repair/dA-Tailing ModuleCat#12608),2×Hieff Canace?Ⅱ High-Fidelity Mix for Library AmplificationCat#12621)共同用于DNA文库构建,通过Illumina?高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分,都经过严格的质量与功能验证,最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。

产品组分

产品编号

组分名称

规格

12607ES24

12607ES96

12607-A

Fast-Pace T4 DNA Ligase

120 μL

480 μL

12607-B

5×Fast-Pace Ligation Buffer

480 μL

960×2 μL

质量控制

Fast Pace T4 DNA Ligase

1. SDS-PAGE纯度:>95%

2. 16小时孵育检测:50 μL反应体系中包含5μl本酶和1 μg HindIII-λDNA37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检

测,条带无降解;50 μL反应体系中包含5μl本酶和1 μg T3 DNA37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条

带无降解。

3. RNase活性:5μl本酶中加入40 ng FAM-RNA及,37°C下孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,条带无降解。

4. 核酸内切酶活性:50 μL反应体系中加入5μl本酶和1 μg φX174 RF I DNA37°C下孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳

检测,RF II转化比率<10%

5. 核酸外切酶活性:50 μL反应体系中加入至少5μl本酶和1 μg声振的[3H]DNA105 cpm/μg),37°C下孵育4小时,

释放的放射性<0.1%

6. 功能活性(平末端连接):50 μL反应体系,在1×Fast Pace Ligation Buffer中,加入0.5 μL Fast Pace T4 DNA Ligase18 μg

HaeIII φX17416°C孵育7.5分钟。经琼脂糖电泳检测,片段连接率>95%

7. 功能活性(接头连接):50 μL反应体系,在1×Fast Pace Ligation Buffer中,加入0.125 μL Fast Pace T4 DNA Ligase8 nmol

12 bp接头,16°C孵育过夜。经琼脂糖电泳检测,无明显未连接接头。

Fast Pace Ligation Buffer

1. 16小时孵育检测:50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer1 μg HindIII-λDNA37°C下孵育16小时。经琼

脂糖凝胶电泳检测,条带无降解;50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer1 μg T3 DNA37°C下孵育16小时。

经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解。

2. 核酸内切酶活性:50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer1 μg φX174 RF I DNA37°C下孵育4小时。经

琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%

3. RNase活性:在1×Fast Pace Ligation Buffer中加入40 ng FAM-RNA37°C下孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,

条带无降解。

4. 磷酸酶活性检测:在磷酸酶活性检测缓冲液中加入1×Fast Pace Ligation Buffer2.5 mM对硝基苯磷酸,37°C下孵育4

小时。经光谱测定法检测,405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。

测序验证

本品与Hieff NGS? End Repair/dA-Tailing ModuleCat#12608),2×Hieff Canace?Ⅱ High-Fidelity Mix for Library AmplificationCat#12621)共同用于DNA文库构建,通过Illumina?高通量平台测序验证其有效性。

运输与保存方法

冰袋运输。

-20℃保存,效期一年。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

目前主流的合并法DNA建库试剂盒,其末端修复和加A处理后一般不纯化,直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容,进行接头连接。反应体系请参考如下配制,并涡旋混匀几秒钟,瞬离后至于20℃,反应15分钟即可。

1 Adapter Ligation体系

名称

体积(μL

dA-tailed   DNA

60

5×Fast-Pace Ligation Buffer

20*

Fast-Pace T4 DNA Ligase

5

DNA   Adapter

X**

dd2O

To   100

【注】:*对于Ligation Enhancer,请上下颠倒、振荡,充分混匀并瞬时后离心使用。

**根据自身需求加入适量的接头。

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产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS? Fast-Pace   DNA Ligation Module

12607ES24/96

24/96 T

3263/10863

Hieff NGS? Fast-Pace   End Repair/dA-Tailing Module

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