产品报价：3263元
更新时间：2024/4/15 9:30:47
产地：上海
品牌：翌圣生物
型号：12607ES24
厂商性质： 生产型,贸易型,服务型,
公司名称： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
翌圣生物科技（上海）股份有限公司 : (13916792673) (400-6111-883)
（联系我时，请说明是在来宝网上看到的，谢谢！）Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation Module
快速DNA连接模块
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） | 促销价（元） |
Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation Module 快速DNA连接模块 | 12607ES08 | 8T | 1423.00 | 1423.00 |
12607ES24 | 24T | 2933.00 | 2053.00 | |
12607ES96 | 96T | 9773.00 | 6841.00 |
Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation Module是针对Illumina?高通量测序平台文库构建专业设计的DNA连接模块。本产品可在双链平末端DNA片段或双链3′-dA DNA片段的两端连接Illumina?测序平台适用的DNA接头，具有连接效率高、简便、可实现自动化等优势。本产品已与Hieff NGS? End Repair/dA-Tailing Module（Cat#12608），2×Hieff Canace?Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12621）共同用于DNA文库构建，通过Illumina?高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分，都经过严格的质量与功能验证，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。产品描述
产品组分
产品编号 | 组分名称 | 规格 | |
12607ES24 | 12607ES96 | ||
12607-A | Fast-Pace T4 DNA Ligase | 120 μL | 480 μL |
12607-B | 5×Fast-Pace Ligation Buffer | 480 μL | 960×2 μL |
质量控制
Fast Pace T4 DNA Ligase
1. SDS-PAGE纯度：>95%。
2. 16小时孵育检测：50 μL反应体系中包含5μl本酶和1 μg HindIII-λDNA，37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检
测，条带无降解；50 μL反应体系中包含5μl本酶和1 μg T3 DNA，37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，条
带无降解。
3. RNase活性：5μl本酶中加入40 ng FAM-RNA及，37°C下孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，条带无降解。
4. 核酸内切酶活性：50 μL反应体系中加入5μl本酶和1 μg φX174 RF I DNA，37°C下孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳
检测，RF II转化比率<10%。
5. 核酸外切酶活性：50 μL反应体系中加入至少5μl本酶和1 μg声振的[3H]DNA（105 cpm/μg），37°C下孵育4小时，
释放的放射性<0.1%。
6. 功能活性（平末端连接）：50 μL反应体系，在1×Fast Pace Ligation Buffer中，加入0.5 μL Fast Pace T4 DNA Ligase，18 μg
HaeIII φX174，16°C孵育7.5分钟。经琼脂糖电泳检测，片段连接率>95%。
7. 功能活性（接头连接）：50 μL反应体系，在1×Fast Pace Ligation Buffer中，加入0.125 μL Fast Pace T4 DNA Ligase，8 nmol
12 bp接头，16°C孵育过夜。经琼脂糖电泳检测，无明显未连接接头。
Fast Pace Ligation Buffer
1. 16小时孵育检测：50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer和1 μg HindIII-λDNA，37°C下孵育16小时。经琼
脂糖凝胶电泳检测，条带无降解；50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer和1 μg T3 DNA，37°C下孵育16小时。
经琼脂糖凝胶电泳检测，条带无降解。
2. 核酸内切酶活性：50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer和1 μg φX174 RF I DNA，37°C下孵育4小时。经
琼脂糖凝胶电泳检测，RF II转化比率<10%。
3. RNase活性：在1×Fast Pace Ligation Buffer中加入40 ng FAM-RNA，37°C下孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，
条带无降解。
4. 磷酸酶活性检测：在磷酸酶活性检测缓冲液中加入1×Fast Pace Ligation Buffer和2.5 mM对硝基苯磷酸，37°C下孵育4
小时。经光谱测定法检测，405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。
测序验证
本品与Hieff NGS? End Repair/dA-Tailing Module（Cat#12608），2×Hieff Canace?Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12621）共同用于DNA文库构建，通过Illumina?高通量平台测序验证其有效性。
运输与保存方法
冰袋运输。
-20℃保存，效期一年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
目前主流的合并法DNA建库试剂盒，其末端修复和加A处理后一般不纯化，直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容，进行接头连接。反应体系请参考如下配制，并涡旋混匀几秒钟，瞬离后至于20℃，反应15分钟即可。
表1 Adapter Ligation体系
名称 | 体积（μL） |
dA-tailed DNA | 60 |
5×Fast-Pace Ligation Buffer | 20* |
Fast-Pace T4 DNA Ligase | 5 |
DNA Adapter | X** |
dd2O | To 100 |
【注】：*对于Ligation Enhancer，请上下颠倒、振荡，充分混匀并瞬时后离心使用。
**根据自身需求加入适量的接头。
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