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EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒
EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒
  • EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒

EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒

产品报价:1160元

更新时间:2020/9/17 16:02:03

地:上海

牌:TSZELISA

号:EY-00026

厂商性质:

公司名称: 上海一研生物科技有限公司

产品关键词: 人过氧化氢酶   CAT   ELISA试剂盒  

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EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒检测原理


试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人过氧化氢酶(CAT)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人过氧化氢酶(CAT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。


样品收集、处理及保存方法


1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。


2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。


3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。


4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。


5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒自备物品


1.     酶标仪(450nm)


2.     高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL


3.     37℃恒温箱


EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒操作注意事项


1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。


2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。


3.  标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。


4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。


5.  所有液体组分使用前充分摇匀。


试剂盒组成


名称


96孔配置


48孔配置


备注


微孔酶标板


12孔×8条


12孔×4条



标准品(32 ng/mL)


0.6mL


0.6mL


按说明书进行稀释


标准品稀释液


6mL


3mL



样本稀释液


6mL


3mL



检测抗体-HRP


10mL


5mL



20×洗涤缓冲液


25mL


15mL


人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒按说明书进行稀释


底物A


6mL


3mL



底物B


6mL


3mL



终止液


6mL


3mL



封板膜


2张


2张



说明书


1份


1份



自封袋


1个


1个



注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:32、16、8、4、2、1ng/mL l


试剂的准备


 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。


洗板方法


1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。


2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。


EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒操作步骤


1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。


2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;


3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;


4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。


5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。


6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。


7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


结果判断


 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。



EY-00026人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒试剂盒性能


1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。


2.  灵敏度:zui低检测浓度小于1.0 ng/mL。


3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。


4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。


5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。


6.  人过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒有效期:6个月