全能核酸酶20156ES25
产品报价:418元
更新时间:2024/3/25 11:30:24
产地:上海
品牌:翌圣生物
型号:20156ES25
厂商性质: 生产型,贸易型,服务型,
公司名称: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
翌圣生物科技(上海)股份有限公司 : (13916792673) (400-6111-883)
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产地:上海
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(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)UCF·ME? UltraNuclease 全能核酸酶
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格 |
UCF·ME? UltraNuclease 全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU | -20℃ | 418.00 |
20156ES50 | 50 KU | -20℃ | 768.00 | |
20156ES60 | 100 KU | -20℃ | 1398.00 |
产品描述
UltraNuclease(全能核酸酶),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,纯度>95%,可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究,并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-Cl pH 8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
产品性质
来源 | E. coli |
分子量(Molecular Weight) | 26.5 kDa |
等电点 | 6.85 |
纯度(Purity) | ≥ 95%(SDS-PAGE) |
酶活(Enzyme Activity) | ≥ 250 U/μL |
比活(Specific Activity) | ≥ 2.0×106 U/mg蛋白 |
最适pH(Optimum pH) | 8.0(工作范围pH 6-10) |
最适温度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范围0-42℃) |
辅助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
蛋白酶活性(Protease) | Undetected |
储存缓冲液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-Cl pH8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,50%甘油 |
活性单位定义(Unit Definition) | 在37℃,pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
推荐使用条件
条件参数 | 最佳条件 | 有效条件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
温度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巯基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
单价阳离子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根离子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
推荐使用量
UltraNuclease用量(终浓度) | 处理时间 |
0.25 U/mL | > 1 h |
2.5 U/mL | 15 min |
25 U/mL | 2 min |
使用方法
1、样本准备
贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。
悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。
大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。
3、酶的添加
按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加UltraNuclease,也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。
【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
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