产品报价：420元
更新时间：2018/3/28 12:43:27
产地：北京
品牌：Biomed
型号：20×100μl
厂商性质：
公司名称： 广州市智取生物科技有限公司
曾艳子 : (18102660079) (020-69716693)
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| BC301-01 | LBA4404 农杆菌感受态细胞 | 20×100μl | 420 |  {/else}暂无 |
产品介绍：
LBA4404菌株为Ach5型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404，此质粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移）。pAL4404型Ti质粒含有筛选标签：strep，赋予LBA4404菌株链霉素抗性，适用于菸草、番茄、烟草等植物的转基因操作，经植物双元pCAMBIA2301质粒检测，转化效率可达103 cfu/μg，-70℃保存6个月转化效率不发生改变。
基因型：Ach5 (rif R) Ti pAL4404 (StrR) Octopine
储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。
转化方法 （采用冻融方法）
1. 取-70℃保存的LBA4404农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化；
2. 无菌条件下，向感受态细胞中加入100ng质粒DNA，轻轻混匀，冰水浴中静置5分钟；
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟；（注：也可以用干冰和无水乙醇混合物代替液氮）
4. 然后快速将离心管置于37℃水浴中保持5分钟，不要晃动水面；
5. 将离心管放回冰水浴中，冰浴5分钟；
6. 无菌条件下加入800μl无抗生素的2×YT或LB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时，菌体复苏；
7. 5000rpm离心1分钟收菌，留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，取适量菌液，涂布于相应抗生素的LB平板上，于28℃培养箱中倒置培养48-72小时。
（具体操作详见说明书）
