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Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module12608ES24
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  • Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module12608ES24

Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module12608ES24

产品报价:2066元

更新时间:2024/3/25 11:30:24

地:上海

牌:翌圣生物

号:12608ES24

厂商性质: 生产型,贸易型,服务型,

公司名称: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司

产品关键词: 磷酸酶活性   DNA产物   文库构建  

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翌圣生物科技(上海)股份有限公司 : (13916792673) (400-6111-883)

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Hieff NGS? Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module

快速末端修复/A尾添加模块

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS?   Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module

快速末端修复/A尾添加模块

12608ES24

24 T

2066.00

12608ES96

96 T

6166.00

产品描述

Hieff NGS? Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是针对Illumina?高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块,具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA,可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应,得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化,即可使用Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation ModuleCat#12607)进行文库构建接头连接反应。

本产品已与Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation ModuleCat#12607),2×Hieff Canace? High-Fidelity Mix for Library AmplificationCat#12620)共同用于DNA文库构建,通过Illumina?高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检,最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。

产品组分

组分编号

组分名称

24 T

96 T

12608-A

End   Repair/dA-Tailing Buffer

144 μL

576 μL

12608-B

End   Repair/dA-Tailing Enzyme

96 μL

384 μL

质量控制

Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme

1. SDS-PAGE纯度:>95%

2. 核酸内切酶活性:50 μL反应体系中加入10 μL本酶和1 μg φX174 RF I DNA37°C孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%

3. 磷酸酶活性:在磷酸酶活性检测缓冲液中加入10 μL本酶和2.5 mM对硝基苯磷酸,37°C孵育4小时。经光谱测定法检测,405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。

4. 功能活性:在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme中加入1 μL本酶和0.5 μg包含5'3'突出末端的片段化DNA25°C孵育20分钟。经毛细管电泳检测,末端修复、加dA尾并磷酸化的DNA比率>95%

Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer

1. 16小时孵育检测:50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer1 μg HindIII-λDNA37°C孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解;50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer1 μg T3 DNA37°C孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解。

2. 核酸内切酶活性:50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer1 μg φX174 RF I DNA37°C孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比<10%

3. RNase活性:在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer中加入40 ng FAM-RNA37°C孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,条带无降解。

4. 磷酸酶活性:在磷酸酶活性检测缓冲液中加入1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer2.5 mM对硝基苯磷酸,37°C下孵育4小时。经光谱测定法检测,405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。

测序验证

本品与Hieff NGS? Fast-Pace DNA Ligation ModuleCat#12607),2×Hieff Canace? High-Fidelity Mix for Library AmplificationCat#12620)共同用于DNA文库构建,已通过Illumina?高通量平台测序验证其有效性。

运输与保存方法

冰袋运输。

-20℃保存,有效期1年。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 将表1中各试剂解冻后,颠倒混匀,置于冰上备用。

2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。

1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系

名称

体积(μL

Fragmented DNA

x

End   Repair/dA-Tailing Buffer

6

End   Repair/dA-Tailing Enzyme

4

ddH2O

Up to 60 μL

3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液离心至管底。

4. 将上述PCR管置于PCR仪,设置表2所示反应程序,进行末端修复/dA尾添加反应。

2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序

温度

时间

热盖105°C

On

20°C

30 min

65°C

30 min

4°C

Hold

5. 产物如需纯化,可使用Hieff NGS? DNA Selection BeadsCat#12601)或AMPure XP BeadsCat#A63880)或其他等效产品。

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建库模块

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS? Fast-Pace   DNA Ligation Module

12607ES24/96

24/96 T

3263/10863

Hieff NGS? Fast-Pace   End Repair/dA-Tailing Module

12608ES24/96

24/96 T

2066/6166

2×Super Canace? High-Fidelity Mix for Library Amplification

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产品编号

规格

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Hieff NGS? Library   Quantification Kit for Illumina?, qPCR Master Mix

12302ES05

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HB190103

 

 


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| 第17

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