产品报价：553元
更新时间：2024/4/15 9:30:47
产地：上海
品牌：翌圣生物
型号：10607ES15
厂商性质： 生产型,贸易型,服务型,
公司名称： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
翌圣生物科技（上海）股份有限公司 : (13916792673) (400-6111-883)
（联系我时，请说明是在来宝网上看到的，谢谢！）Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas
脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas 脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺 | 10607ES15 | 15 KU | 553.00 |
10607ES81 | 10×15 KU | 4153.00 |
产品描述
脱氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一种发现于多种细胞和组织的核酸内切酶，靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。工作范围是pH7-8，DNase的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co 2+，Mn2+，Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺，由四种色谱区分的组分A，B，C，D构成，摩尔比为4:1:1，而D组分非常少。分子生物学实验中常用于清除蛋白或RNA样品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应，酶活力≥2000 Kunit Units/mg蛋白。
产品性质
CAS号（CAS NO.） | 9003-98-9 |
分子量（Molecular Weight） | ~31 kDa |
孔尼茨单位（Kunitz Units） | ≥2000 Kunit Units/mg protein |
类型（Type） | Type IV |
PH（Optimal pH） | 7～8 |
外观（Appearance） | 白色至浅褐色冻干粉 |
纯度（Purity） | Protein: ≥80% by Biuret |
溶解性（Solubility） | 0.15 M NaCl：5 mg/mL，无色透明溶液 |
激活剂（Activators） | 多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+ |
抑制剂（Inhibitors） | β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白 |
活力单位定义（Unit Definition） | 25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。 |
运输和保存方法
冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存，有效期2年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
DNase Ⅰ储存溶液
20 mM sodium acetate（pH 6.5），5 mM CaCl2，0.1 mM PMSF，50%甘油。
DNase Ⅰ失活或抑制
加入EDTA至终浓度为2.5 mM后，65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。
使用方法（仅供参考，具体实验可做适当调整）
1、应用于蛋白提取实验
1）反应体xi：蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I储存液（使其终浓度为20 U/mL），1/100体积加入1 M MgCl2。
2）反应条件：37℃，30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。
【注】由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否则会降低DNase I的消化能力。
2、应用于RNA提取实验
10×反应缓冲液：200 mM Tris-HCl（pH 8.4），20 mM MgCl2，500 mM KCl。
1）反应tix：1 μg RNA样本，1 μL 10×反应缓冲液，1 μL DNase I（1 U/μL），DEPC水补足至10 μL。
【注】Tix中加入适量RNase Inhibitor（Cat NO.10603ES），以防止RNA降解。
2）反应条件：37℃，10-15 min。
【注】消化时间不要超过15 min或温度不要超过37℃，否则残留的RNase A污染可能会降解RNA。
3）终止反应：加入1 μL 25 mM EDTA，65℃加热处理 10 min。
【注】在不同的反应缓冲tix内，用于完全消化一定量DNA所需的DNase Ⅰ量不一样，请根据具体实验的工作tix确定。
HB200109
