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Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺 10607ES15
Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺 10607ES15
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Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺 10607ES15

产品报价:426元

更新时间:2020/4/7 14:30:31

地:上海

牌:翊圣生物

号:10607ES15

厂商性质: 生产型,贸易型,服务型,

公司名称: 上海翊圣生物科技有限公司

产品关键词: 牛胰腺   10607ES15   脱氧核糖核酸酶  

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Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas

脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

产品信

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas

脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

10607ES15

15 KU

553.00

10607ES81

10×15 KU

4153.00

产品描述

脱氧核糖核酸酶IDNase I),即Deoxyribonuclease I一种发现于多种细胞和组织的核酸内切酶,靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。最佳的工作范围是pH7-8DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co 2+Mn2+Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下,该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。

本品来自牛胰腺,由四种色谱区分的组分ABCD构成,摩尔比为4:1:1,而D组分非常少。分子生物学实验中常用于清除蛋白或RNA样品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应,酶活力≥2000 Kunit Units/mg蛋白

产品性质

CAS号(CAS NO.

9003-98-9

分子量(Molecular Weight

~31 kDa

孔尼茨单位(Kunitz Units

≥2000 Kunit Units/mg protein

类型(Type

Type IV

最佳PHOptimal pH

78

外观(Appearance

白色至浅褐色冻干粉

纯度(Purity

Protein: ≥80% by Biuret

溶解性(Solubility

0.15 M NaCl5 mg/mL,无色透明溶液

激活剂(Activators

多种二价金属离子如Mg2+Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+

抑制剂(Inhibitors

β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白

活力单位定义(Unit Definition

25℃pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。

运输和保存方法

冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存,有效期2年。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

DNase Ⅰ储存溶液

20 mM sodium acetatepH 6.55 mM CaCl20.1 mM PMSF50%甘油。

DNase Ⅰ失活或抑制

加入EDTA至终浓度为2.5 mM后,65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%SDSDTT、巯基乙醇等还原剂,50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。

使用方法(仅供参考,具体实验可做适当调整)

1、应用于蛋白提取实验

1)反应体系:蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I储存液(使其终浓度为20 U/mL),1/100体积加入1 M MgCl2

2)反应条件:37℃30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。

【注】由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否则会降低DNase I的消化能力。

2、应用于RNA提取实验

10×反应缓冲液:200 mM Tris-HClpH 8.4),20 mM MgCl2500 mM KCl

1)反应体系:1 μg RNA样本,1 μL 10×反应缓冲液,1 μL DNase I1 U/μL),DEPC水补足至10 μL

【注】体系中最好加入适量RNase InhibitorCat NO.10603ES),以防止RNA降解。

2)反应条件:37℃10-15 min

【注】消化时间不要超过15 min或温度不要超过37℃,否则残留的RNase A污染可能会降解RNA

3)终止反应:加入1 μL 25 mM EDTA65℃加热处理 10 min

【注】在不同的反应缓冲体系内,用于完全消化一定量DNA所需的DNase Ⅰ量不一样,请根据具体实验的工作体系确定。

HB200109