Endotoxin Removal Kit 内毒素去除试剂盒 60404ES03
产品报价:1680元
更新时间:2024/3/25 11:30:28
产地:美国
品牌:翌圣生物
型号:60404ES03
厂商性质: 生产型,贸易型,服务型,
公司名称: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
翌圣生物科技(上海)股份有限公司 : (13916792673) (400-6111-883)
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产地:美国
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(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)Endotoxin Removal Kit 内毒素去除试剂盒
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
Endotoxin Removal Kit 内毒素去除试剂盒 | 60404ES03 | 1Kit | 4℃ | 1680.00 |
产品描述
细菌内毒素可引起机体免疫功能受损,严重者可引发脓毒性休克,急性呼吸窘迫综合症,弥散性血管内凝血,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭等。因此对于用于疾病治疗的基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品必须通过一定的方法去除内毒素。
翊圣提供的内毒素去除树脂以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,可高效特异的将生物制品中内毒素去除,经纯化样品最终的内毒素水平可<0.1EU/ml,适合于蛋白,多肽,抗体,多糖等多种形式样品的纯化。本品以预装柱的形式提供,另附带用于去除内毒素的其他试剂(如相关缓冲液)以及无热源耗材等,方便客户使用。
产品性质
基质(Matrix) | 4%琼脂糖微球 |
配体(Ligand) | 修饰的多粘菌素B(PMB) |
孔径(Bead size) | 80-100μm |
载量(Capacity) | >2,000,000EU/ml树脂 |
pH稳定范围(pH range) | 5-10 |
离子范围(Ion Range) | 0.1-0.5M NaCl |
平衡缓冲液(Equilibration Buffer) | PBS,pH8.0 |
耐受试剂(tolerant reagent) | 20%DMSO,20%乙醇,20%甘油; 0.05%吐温-20,10mM DTT;1M尿素;300mM咪唑等 |
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 规格 |
60404-A | Endotoxin RemovalChromatography Column内毒素去除树脂预装柱 | 2ml |
60404-B | Regeneration Buffer 再生缓冲液 | 125ml |
60404-C | Equilibration Buffer平衡缓冲液 | 125ml |
60404-D | Pyrogen-free Tubes无热源接收管 | 1包(3个/包) |
60404-E | Pyrogen-free Tips无热源吸头(1ml) | 3包(4个/包) |
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期至少1年。
使用方法
1. 样品处理:多粘菌素B和内毒素是通过静电作用,离子作用,亲水作用和分子间相互作用等多种因素共同作用的结果,因此实验中存在的若干因素都可能会影响内毒素去除效率,如:缓冲液的pH值,内毒素浓度,内毒素与树脂的接触时间,离子强度,温度以及样品的特性等。其中样品pH值和离子强度对于内毒素的去除效率影响尤其重要,纯化前可用处理过的氯化钠,0.1M的NaOH或0.1M HCl来调节离子强度或pH值。
【注】:①虽然结合内毒素的pH范围在5-10,但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。
②合适的离子浓度可降低非特异性吸附,保持0.15-0.5MNaCl的条件可以得到一个较好的去除效果。
2. 活化树脂:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除顶部盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5ml再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25ml/min(或10滴/min),待再生缓冲液流干后再加入5ml再生缓冲液,再重复操作2次,确保体系保持无热源(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。该步操作大约需要60min完成。
3. 平衡树脂:活化完毕后加入6ml的平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5ml/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复2次。这步操作大约需要40min完成。
4. 内毒素去除:将流速控制器关闭,使用无热源枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25ml/min,流出液体积达到1.5ml后,使用无热源接收管接收样品,样品流干后,再加入1.5ml-3.0ml的平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱按照步骤2重新再生,然后上样纯化。
6. 保存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10ml平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5ml的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化钠)。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附表
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
去除效率低 | 样品与树脂接触时间太短 | 降低样品流速,或通过低温孵育来提高结合效率 |
样品的pH值没有在7-8之间 | 调节pH值至7-8 | |
去除或检测系统受到外来因素污染 | 使用无热源的实验仪器,保证体系不受污染 | |
内毒素与目的蛋白结合太牢固 | ①优化样品的pH值,使它们解离; ②增加样品与树脂的接触时间 | |
样品损失高 | 样品通过非特异性作用结合在树脂上 | 增加样品和平衡缓冲液中NaCl的含量 |
目的蛋白与内毒素结合牢固,一起结合在树脂上 | ①优化样品的pH值,使它们解离; ②增加样品与树脂的接触时间 | |
样品被污染 | 树脂用于处理过其他的样品 | 尽量避免使用同一个预装柱处理不同样品。如果无法避免,可以在处理一个样品之后,用10-20ml 2M NaCl淋洗树脂,然后再处理另外一种样品 |
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