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HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML
HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML
  • HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML

HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML

产品报价:138元

更新时间:2020/3/26 9:00:24

地:美国

牌:yeasen

号:20541ES03

厂商性质: 生产型,贸易型,服务型,

公司名称: 上海翊圣生物科技有限公司

产品关键词: HiSep   DEAE弱阴离子纯化预装柱  

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HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML

HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML

产品信息

产品名称          

产品编号

规格

储存

价格(元)

HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML

HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML

20541ES03

1ml

4

138.00

产品描述

离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

DEAE弱阴离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化,离子交换基团-O-CH2CH2-N (C2H5)2

本品HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱是一种以DEAE弱阴离子交换树脂为填料的中压预装柱,规格为1ml,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如?KTA等,方便客户操作。

产品性质

基质(Matrix

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径(Bead size

45-165μm

离子交换类型(Type

弱阴离子

载量(Capacity

0.11-0.16mmol Cl-/ml 基质

流速(Flow Rate

300-600cm/h

pH范围(pH Range

2-12

储存缓冲液(Buffer

20%乙醇

柱子尺寸(Column Size

0.7×2.5cm1ml

运输和保存方法

冰袋运输。4保存,有效期2年。

使用方法

1 缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用前最好用0.22μm0.45μm滤膜过滤。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22μm0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱,推荐流速为1ml/min

4)利用泵或注射器上样。

【注】:样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer 采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如 20 倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

4 SDS-PAGE 检测

将得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。

5填料清洗

离子交换树脂每次使用后可以用1MNaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIPCleaning In Place)清洗

离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

2倍柱体积的1M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton?X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2Resin使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)所有操作过程中,样本需要在4或冰上操作。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22μm0.45μm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

树脂重复多次使用

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。

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规格

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