HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML
HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML | 20541ES03 | 1ml | 4℃ | 138.00 |
产品描述
离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。
DEAE弱阴离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化,离子交换基团-O-CH2CH2-N (C2H5)2。
本品HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱是一种以DEAE弱阴离子交换树脂为填料的中压预装柱,规格为1ml,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如?KTA等,方便客户操作。
产品性质
基质(Matrix) | 高度交联的6%琼脂糖微球 |
粒径(Bead size) | 45-165μm |
离子交换类型(Type) | 弱阴离子 |
载量(Capacity) | ~0.11-0.16mmol Cl-/ml 基质 |
流速(Flow Rate) | 300-600cm/h |
pH范围(pH Range) | 2-12 |
储存缓冲液(Buffer) | 20%乙醇 |
柱子尺寸(Column Size) | 0.7×2.5cm(1ml) |
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期2年。
使用方法
1 缓冲液的准备
所用水和Buffer在使用前最好用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
2 样品准备
样品在使用前最好用0.22μm或0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
3 样品纯化
1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。
2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。
3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱,推荐流速为1ml/min。
4)利用泵或注射器上样。
【注】:样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。
5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。
6)用洗脱Buffer 采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如 20 倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。
4 SDS-PAGE 检测
将得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。
5填料清洗
离子交换树脂每次使用后可以用1MNaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。
CIP(Cleaning In Place)清洗
离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
1)去除一些沉淀或变性物质
用2倍柱体积的1M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton?X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
3)去除一些离子键结合物质
用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。
注意事项
1)请勿冷冻保存本产品。
2)Resin使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。
3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附表问题及解决方案
问题 | 可能原因 | 推荐解决方案 |
柱子反压过高 | 填料被堵塞 | 按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。 |
样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。 |
洗脱样品较杂 | 树脂重复多次使用 | 按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。 |
平衡不充分 | 增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。 |
相关产品
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格元 |
20540ES25 | HiSep DEAE Agarose Resin 6FF (HiSep DEAE弱阴离子高速交换树脂) | 25ml | 258.00 |
20540ES60 | HiSep DEAE Agarose Resin 6FF (HiSep DEAE弱阴离子高速交换树脂) | 100ml | 648.00 |
20540ES75 | HiSep DEAE Agarose Resin 6FF (HiSep DEAE弱阴离子高速交换树脂) | 300ml | 1538.00 |
20541ES03 | HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML(HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,1ML) | 1ml | 138.00 |
20542ES08 | HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML(HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML) | 5ml | 528.00 |