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商品编号:73325
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MGC-803(STR鉴定)人胃癌细胞

价    格:1500

产    地:上海更新时间:2019/11/25 9:37:24

品    牌:赛百慷型    号:MGC-803

状    态:正常点击量:368

15830017512
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赛百慷上海生物技术股份有限公司

联 系 人:赛百慷

电     话:021-6157780

传     真:

等     级: (第 3年)

性     质:

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细胞特性

1) 来源:胃癌

2) 形态:上皮细胞样

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装



产品参数

1*10^6


产品介绍

细胞介绍

从一位53岁男性原发性胃低分化粘液样腺癌患者建立。

 

细胞特性

1) 来源:胃癌

2) 形态:上皮细胞样

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

 

运输和保存

1)使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。

2)收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。


细胞用途:仅供科研使用。

 

细胞接收后的处理:

1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。

4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。

5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。


 

细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例;

1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。




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