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商品编号:73323
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COLO205(STR鉴定)人结肠癌细胞

价    格:1500

产    地:上海更新时间:2019/11/25 9:37:24

品    牌:赛百慷型    号:COLO205

状    态:正常点击量:371

15830017512
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赛百慷上海生物技术股份有限公司

联 系 人:赛百慷

电     话:021-6157780

传     真:

等     级: (第 3年)

性     质:

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细胞特性

1) 来源:结直肠腺癌,腹水转移

2) 形态:上皮细胞样,半贴壁生长

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装



产品参数

1*10^6


产品介绍

细胞介绍

该细胞系1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水分离。 该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4-6周。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。

 

细胞特性

1) 来源:结直肠腺癌,腹水转移

2) 形态:上皮细胞样,半贴壁生长

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

 

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

 

细胞用途:仅供科研使用。

                       

细胞接收后的处理:

1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) T25瓶中的培养基取出离心后,去上清,添加6ml新的完全培养基,重新加入原T25培养瓶。

4) 如果细胞长满90%请及时进行细胞传代,传代培养用本公司附带的完全培养基。

 

细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备RPMI-1640培养基;北美胎牛血清,10%;双抗1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

1. 将上清取出,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 轻轻打匀后吸出,和上清一起在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。

4. 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类;

1,细胞冻存时,取出上清,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。




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