来宝网Logo

热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

现在位置首页>实验试剂制品>细胞株/菌种>细胞株> T0290~永生化小鼠脑微血管内皮细胞(cEND)

商品编号:67253
分享

T0290~永生化小鼠脑微血管内皮细胞(cEND)

价    格:询价

产    地:加拿大更新时间:2019/7/15 13:41:34

品    牌:ABM型    号:T0290

状    态:正常点击量:1085

15205516058
联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!

安徽青志生物科技有限公司

联 系 人:何先生

电     话:0551-63702898

传     真:

等     级: (第 3年)

性     质:

联系我时请说在来宝网上看到的,谢谢!




T0290~永生化小鼠脑微血管内皮细胞(cEND)

图片

 201706281846387390.jpg

图片

 201706281846463449.jpg

图片

 201706281846513229.jpg

培养

使用PriCoat?T25烧瓶(G299)或应用细胞细胞外基质(G422)是细胞粘附到培养容器所必需的。在以下条件下培养含有ECM的培养容器中的细胞。该细胞系的基础培养基是可从ABM(TM003)获得的Prigrow III培养基。为了制备完成的生长培养基,将以下组分添加到基础培养基中:加热灭活的胎牛血清(TM999)至终浓度为10%,1%青霉素/链霉素(G255)。气氛:空气:95%,CO 2:5%; 温度:37.0℃。

分化培养基由2%热灭活胎牛血清(TM999)代替10%组成。在血清减少的培养基中培养cEND细胞导致TER增加(在10%血清存在下从150Ωcm2到存在2%血清时为500Ωcm2),以及细胞形态变化(从纺锤形到卵形 - 石头像)。通过向分化培养基中加入110nM氢huà可的松(800Ωcm2)或1μM胰岛素(1000Ωcm2)可以进一步增加TER。

保存

1.冷冻培养基:具有20%FBS和10%DMSO的完全生长培养基。2.储存温度:液氮气相。

质量控制

1)通过免疫染色评估内皮标志物VE-钙粘蛋白和PECAM-1; 2)通过免疫染色和Claudin-1,-3和-12在mRNA水平上检测到紧密连接蛋白紧密连接蛋白-5; 2)通过蛋白质印迹分析测量BBB标记蛋白Glut-1和紧密连接蛋白闭塞蛋白。通过1)TER,2)western印迹和3)使用RT-PCR的基因表达分析来测量细胞系对促炎刺激的反应。

参考

1.该产品的CoA(根据要求提供)仅通过RT-PCR验证细胞型特异性基因表达。CoA中提供的所有测试参数均使用abm的标准化培养系统和程序进行。所述值可能在最终用户的文化条件下不同。请通过参考已发表的论文或订购RNA(0.5μg)或细胞裂解液(100μg)来验证该产品是否适合您的研究,以进行初步实验,或者使用我们的基因表达测定服务。所有销售都是最终的。
2.我们强烈推荐活细胞出货以方便细胞转移,订购时可以要求提供此选项。请注意,最终用户需要考虑到最终目的地的温度变化及其地理位置来评估活细胞装运的可行性。此外,我们彻底测试我们的细胞系冻融恢复。如果收集冷冻细胞,并且在实验室中没有在精确的指定条件下(使用推荐的培养容器,培养基,附加补充剂和大气条件)回收细胞,则可能需要花费(加运费)进行活细胞更换。
所有abm的细胞生物学产品仅供研究使用,不适用于治疗/诊断应用。abm对于在治疗/诊断应用中使用其细胞生物学产品引起的任何影响不承担任何责任。有关详细信息,请联系技术服务代表。
4.本网站对信息的准确性不作任何保证或声明。文献引用仅供参考。abm不保证此类信息已被证明是准确的。

公司简介

    安徽青志生物科技有限公司作为专业的ABM中国代理商,专业经营原装进口胎牛血清,细胞因子,ELISA试剂盒,细胞,抗体,生物试剂,耗材,培养基,一抗,二抗等.ABM安徽代理的产品涉及分子生物学,细胞生物学,细菌学,遗传学,免疫学,生物化学,蛋白质学,细胞治疗,临床应用等领域。青志生物始终致力于为客户提供可靠的研究材料以及方便快捷的服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关专业人士进行维护,确保您在安徽青志生物公司获得最优质服务!



产品参数

T0290~永生化小鼠脑微血管内皮细胞(cEND)

生物安全水平

II

生物

新生鼠(WT 129Sv株)

源器官

大脑皮层

生长特性

追随者

形态学

纺锤形

推荐播种密度

推荐分流比:不大于1:4

标记

紧密连接蛋白-5,Occuldin,Glut-1,VE-钙粘着蛋白

应用

仅供研究使用

永生化方法

转基因小鼠多瘤病毒,多瘤中等T抗原(PymT)

描述

中枢神经系统(CNS)的稳态由血脑屏障(BBB)维持,并且BBB的破坏与CNS的许多疾病相关。永生化小鼠脑微血管内皮细胞系(cEND)为涉及BBB分化和调节的研究提供了一个有用的模型,因为它在体内分享了BBB的主要特征,特别是1)它保留内皮标志物VE-钙粘着蛋白和PECAM -1; 2)显示紧密连接相关标志物,如闭合蛋白,克拉丁蛋白-3,-5,-12,3),其表达BBB标记蛋白Glut-1和4)其显示高电阻,代表阻隔性质。该细胞系还对糖皮质激素,雌激素治疗和促炎介质如TNFα,使得该细胞系有价值地阐明内皮细胞对不同刺激的细胞反应。与永生化小鼠脑微血管内皮细胞系(cerebend)一起,两个细胞系代表了这些不同脑区域的重要体外模型系统。

程序概述

201707111508382091.jpg



产品介绍

T0290~永生化小鼠脑微血管内皮细胞(cEND)运输和保存:

使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

T0290~永生化小鼠脑微血管内皮细胞(cEND)用途:

仅供科研使用。
                       
T0290~永生化小鼠脑微血管内皮细胞(cEND)培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

 

青志生物:www.qingbio.com





猜你喜欢

相关产品分类