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商品编号:72130
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BI MSCgo™间充质干细胞成骨/快速成骨诱导分化试剂05-440/05-442

价    格:询价

产    地:其他国家更新时间:2019/7/15 13:41:34

品    牌:BI型    号:05-440/05-442

状    态:正常点击量:299

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山东博科干细胞应用研究院有限公司

联 系 人:母经理

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等     级: (第 5年)

性     质:生产型,贸易型,

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产品描述

MSCgo? Osteogenic间质干细胞成骨诱导分化培养基,不含血清,无异源,即用型完全培养基,诱导hMSC分化成成熟成骨细胞。适用于不同来源的MSC,如骨髓、成骨组织和脐带组织;hMSC-BM,hMSC-AT,hMSC-CT。

 

MSCgo Rapid Osteogenic XF 10天以内快速诱导成骨,而MSCgo? Osteogenic需要14-21天。

 

产品描述

储存

货号

规格

MSCgo?   Osteogenic Differentiation Medium

2-8°C

05-440-1B

100ml

MSCgo? Rapid   Osteogenic Differentiation Medium

2-8°C

05-442-1B

100ml

 

成骨结果

钙结节、钙分泌与矿化形成,表明hMSC分化成骨。可以用茜素红S(ARS)染色检测。使用不同的hMSC(细胞类型、年龄、代数)形成钙结节与钙分泌的数量也不一样。

 

所需材料

? MSCgo? Osteogenic Differentiation Medium  BI; 05-440-1

MSCgo? Rapid Osteogenic Differentiation Medium  BI; 05-442-1

? MSC NutriStem? XF Medium: BI; 05-200-1 and 05-201-1

? MSC Attachment solution : BI; 05-752-1

可选: Alizarin Red S (ARS), Sigma; A-5533,建议选择Vivacell品牌,间充质干细胞成骨分化染色试剂盒,货号: C37C00150

 

成骨诱导分化操作

1       接种hMSC:用MSC Attachment solution (BI;P/N: 05-752-1,1:100 DPBS 稀释) 预包被24孔盘,每孔加入0.5ml MSC NutriStem? XF,接种6x104 细胞 (3x104 cells/cm2)。

注意:若使用其他培养器皿,请适当调整体积。

2       置于37°C,5% CO2 培养箱中培养。

3       分化培养24h后即细胞融合度达到80%时,将MSC NutriStem? XF 培养基吸除,每孔加入0.5ml分化培养基。

注意:若细胞融合度<80%,继续再培养一天。

4       置于37°C,5% CO培养箱中培养10-21天,每2-3天换液

注意:培养时间越长,越容易矿化,ARS染色更明显。

5       成骨评价:使用2%的ARS染色液。

 

ARS 染色分析 (可选)

制备2% ARS染色液

注意:染色液需新鲜制备,或调节pH 4.1-4.3

l  将2g ARS (Sigma;A-5533) 溶解到100ml 蒸馏水中。

l  用0.1N HCl 或 0.5% v/v NH3调节pH 4.1-4.3

l  混合均匀,用0.45 μm CA 注射器(如:Minisart 16555)过滤。

l  溶液置于2-8°C储存一年。

l  使用前测pH值,如有必要用0.1N HCl 或 0.5% v/v NH3调节pH 4.1-4.3

 

ARS 染色过程

l  吸除培养基,用DPBS (BI; 02-023-1)洗一次(1ml/well)

l  固定:吸除DPBS,每孔加入1ml 70% ETOH。

l  室温固定30-60分钟。

l  吸除ETOH,用蒸馏水洗涤3次(1ml/well)。

l  吸除蒸馏水,每孔加入1ml 2% ARS 染色工作液。

l  室温静置30-60分钟。

l  吸除染色液,用1ml 蒸馏水洗涤4次(1ml/well)。

注意:细胞分泌的钙会洗脱掉,钙化结节会被染色。

l  每孔加入1ml 蒸馏水避免细胞干燥。

l  观察成骨染色效果、图像采集及进行成骨评价。

注意:成骨细胞含钙会被ARS染成橘红色。

 

半定量ARS 染色 (可选)

l  每孔用0.5ml 10% (w/v in DDW) CPC洗涤ARS染料。

l  室温下静置1小时。

l  550nm 测OD值(10% CPC作为空白对照)。(150μl/well; 96w/p)






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