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商品编号:66335
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DH5α感受态细胞(10支)

价    格:160

产    地:广东更新时间:2021/9/10 14:45:14

品    牌:东盛生物型    号:(10支)

状    态:正常点击量:1620

18318023469
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广州东盛生物科技有限公司

联 系 人:张俊杰

电     话:020-87791356

传     真:020-87791381

等     级: (第 8年)

性     质:生产型,贸易型,

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DH5α感受态细胞(10支)

货号

规格

价格

C1041

100 μl×5

90

C1042

100 μl×10

160

 

产品组分

产品名称

C1041

C1042

感受态细胞

100 μl×5

100 μl×10

对照质粒pUC19

(1 ng/μl)

10 μl

10 μl

说明书

1 份

1 份

 

产品简介:

本公司生产的DH5α感受态细胞是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达108个转化子/μg

质粒DNA,-70℃保存3个月转化效率可保持在90%以上。

每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本。质量稳定,使用方便,质优价廉。

基因型:F-,φ80lacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169, recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-thi-1,gyrA96,relA1

 

产品特点:

DH5α菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1 的突变有利于克

隆DNA 的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

 

储存条件:

-70℃冻存

操作方法(以下操作均按无菌条件的标准进行)-----------------------------------------------------

1 取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。

●  一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA 体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

以下实验以100 μl感受态细胞为例。

2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100 μl 的感受态细胞能够被1 ng 超螺旋质粒DNA 所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30 分钟。

3 将离心管置于42℃水浴中放置60—90 秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2—3 分钟,该过程不要摇动离心管。

4 向每个离心管中加入900 μl 无菌的SOC 或LB 培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养1 小时(160-220 转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表

达,使菌体复苏。

5 将离心管内容物混匀,吸取100 μl 已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB 或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至

液体被吸收,倒置平板,37℃培养12—16 小时。

●  涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA 总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA 总量较少,可取200—300 μl 转化产物涂布平板。如果预

计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以

将剩下的菌液再涂布新的培养板)

 

注意事项---------------------------------------------------------------------------------------------------

1. 感受态细胞应保存在 -70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免降低感受态细胞的转化效率。

2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。

3 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。




产品介绍

DH5α感受态细胞(10支)

货号

规格

价格

C1041

100 μl×5

90

C1042

100 μl×10

160

 

产品组分

产品名称

C1041

C1042

感受态细胞

100 μl×5

100 μl×10

对照质粒pUC19

(1 ng/μl)

10 μl

10 μl

说明书

1 份

1 份

 

产品简介:

本公司生产的DH5α感受态细胞是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达108个转化子/μg

质粒DNA,-70℃保存3个月转化效率可保持在90%以上。

每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本。质量稳定,使用方便,质优价廉。

基因型:F-,φ80lacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169, recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-thi-1,gyrA96,relA1

 

产品特点:

DH5α菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1 的突变有利于克

隆DNA 的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

 

储存条件:

-70℃冻存

操作方法(以下操作均按无菌条件的标准进行)-----------------------------------------------------

1 取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。

●  一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA 体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

以下实验以100 μl感受态细胞为例。

2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100 μl 的感受态细胞能够被1 ng 超螺旋质粒DNA 所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30 分钟。

3 将离心管置于42℃水浴中放置60—90 秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2—3 分钟,该过程不要摇动离心管。

4 向每个离心管中加入900 μl 无菌的SOC 或LB 培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养1 小时(160-220 转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表

达,使菌体复苏。

5 将离心管内容物混匀,吸取100 μl 已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB 或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至

液体被吸收,倒置平板,37℃培养12—16 小时。

●  涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA 总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA 总量较少,可取200—300 μl 转化产物涂布平板。如果预

计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以

将剩下的菌液再涂布新的培养板)

 

注意事项---------------------------------------------------------------------------------------------------

1. 感受态细胞应保存在 -70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免降低感受态细胞的转化效率。

2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。

3 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。




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