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商品编号:52269
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StabyCloningPCR克隆载体系统

价    格:询价

产    地:美国更新时间:2019/7/15 13:41:34

品    牌:Delphi Genetics型    号:StabyCloning

状    态:正常点击量:1692

18210960361
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北京西美杰科技有限公司

联 系 人:方丽初

电     话:010-88597838

传     真:010-88595011

等     级: (第 12年)

性     质:生产型,贸易型,服务型,

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Delphi Genetics提供的创新型产品和服务都使用了基于细菌制毒-解毒基因这一独特的Staby™技术,极大的提高了DNA克隆的稳定性和高效率,促进不含抗生素的重组蛋白的成功生产。其相应的产品是由一系列新颖独特的细菌菌株以及相应的克隆和表达载体体现出来,并以Kit的形式提供给客户使用。其产品领域可分为用于PCR克隆的StabyCloning™,用于原核表达的StabyExpress™、Staby™Codon、Cherry™ Express等表达系统,以及相应的感受态细胞核培养基等产品。

其中StabyCloning™ PCR克隆载体系统 (StabyCloning™ Kit)中包含的CYS21菌系染色体中自带有编码ccdB毒性蛋白的基因。而相应的克隆载体pSTC1.3则携带有缩短的编码ccdA失活的解毒基因,此载体在缩短的ccdA基因末端线性化后产生平端。当在所要克隆的目的DNA片段的的5’端加入14个碱基对的序列(编码解毒基因的后四个密码子以及终止密码子的碱基序列)时,这样将这段序列和缩短了的ccdA基因融合即重建了一个有活性的ccdA解毒基因,翻译成的蛋白CcdA可以“中和”菌株中自带的CcdB毒性。这个14-bp的序列可以通过一修饰的PCR引物加入要克隆的目的基因片断中。重组后的质粒包含有目的基因片段,但目的基因的走向不同也能导致不同的结果,只有正确走向的重组质粒才能够重建一个有活性的、完整的ccdA基因。


产品参数

StabyCloning PCR克隆载体系统-Delphi Genetics StabyCloning Kit

使用StabyCloning™ PCR克隆载体系统,所有的克隆流程在1h内即可完成,所有的克隆是独立的,并且所有的生长着的菌体都包含了携带有正确插入目的片段的克隆载体。活性ccdA基因的重建允许重组子的选择,同时也保证了菌体中质粒的稳定。一旦一些菌体丢失了载体,即在毒性基因的作用下趋向死亡。当片段插入并克隆后,通过载体上面的限制性位点就很容易得到稳定的解毒基因和目的基因的组合。通过CYS21菌系与解毒基因相互之间的特性即可将目的片段有效地插入到克隆载体中。


产品介绍

该系统内包含的组分有:线性化的pSTC1.3质粒DNA;感受态CYS21细菌(电转染或钙转染);连接酶;重组培养基;测序引物;阳性对照以及操作说明书。额外的感受态细菌也可以单独购买:

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
StabyCloning kit (electrocompetent) GE-STC1-10 StabyCloning™ PCR克隆系统(StabyCloning™ kit)
StabyCloning kit (chemically-competent) GE-STC1-12
StabyCloning kit (electrocompetent 20 RXN) GE-STC1-20
StabyCloning kit (chemically-competent 20 RXN) GE-STC1-22
20 x 50ul CYS21 (electro-competent) GE-STCB-20
20 x 100ul CYS21 (chemically-competent) GE-STCB-22

StabyCloning PCR克隆载体系统的特色:

  1. 快速性:连接+转化+平板上生长仅需1h;
  2. 精确性:保证了外源基因以正确的方向插入载体内,使背景降低到1%;
  3. 灵活性:稳定的解毒基因和插入目的片段的产物也容易被插入到其他的载体中;
  4. 重组子即是一个个独立的克隆(直接平板培养);
  5. 即使在扩配的情况下也没有微卫星克隆;
  6. 以PCR产物为模板当使用AmpR质粒时无背景存在;
  7. 即使在不使用抗生素的情况下重组质粒也很稳定;
  8. 此系统适用于任何培养基

因此使用Delphi Genetics的StabyCloning™ Kit克隆系统,整个基因克隆的流程控制在1h以内,基本无背景(转化后的细菌中都是包含插入片段的,而不含插入片段的细菌会趋向死亡)。PCR产物保持定向插入,质粒保持稳定,并且插入到其它载体中的产物也容易被筛选,而且在后继试验中无需抗生素筛选。



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