避暗实验及自主活动实验联合运用-音频电对小鼠学习记忆障碍的改善作用

音频电对小鼠学习记忆障碍的改善作用

摘要:

目的:探讨音频电对急性低压缺氧引起学习记忆障碍的保护作用。

方法:采用小鼠避暗实验法及自主活动法，观察音频中疗法对急性低压缺氧小鼠学习记忆功能的影响。

结果:音频电及音频电+低压缺氧组与相应的对照组比较，错误次数(M)明显减少，潜伏期(EL)显著延长;音频电+低压缺氧组与模型组比较，自主活动增加。

结论:音频电预防性治疗可改善由低压缺氧造成的记忆功能损害，并对急性缺氧所致的中枢抑制有改善作用。

20世纪70年代以来，音频电疗法在临床上广泛应用，主要是通过调节外周或中枢神经系统达到促进神经功能的恢复。急性低压缺氧可致脑组织损伤引起学习记忆障碍已被证实，但音频电疗法对急性低压缺氧引起学习记忆障碍的影响研究甚少，国内外未见报道。笔者利用小鼠学习记忆障碍模型，采用避暗实验和自主活动法，观察音频电疗法对急性低压缺氧小鼠学习记忆功能障碍的改善作用。

1材料与方法

1.1材料

昆明种小鼠48只，雌雄各半，体重((20 +}) g，由白求恩医科大学实验动物中心提供。小鼠称重后随机分成4组，每组12只，即对照组、模型(低压缺氧)组、音频电组和音频电+低压缺氧组。适应环境3d后进行实验。

小鼠避暗实验视频分析系统、小鼠自主活动视频分析系统(上海欣软信息科技有限公司制造);动物低压舱室(空军航空医学研究所制造);3音频电疗机(上海医用电子仪器厂生产)。

1.2方法

1. 2.1音频电治疗

装鼠容器为直径20 cm、高15 cm的圆形、平底玻璃器皿，底部放入2层滤纸，为导电用10ml水将滤纸湿透。音频电疗机的2个输出电极置于滤纸下，电极间电阻为70 欧姆，每次将5只小鼠放入玻璃容器内2 min后，给予音频电治疗15 min，频率为2 000 Hz，刺激强度分别为2 ,3 ,4 mA，每种强度刺激5 min，共治疗15 d。第15天，音频电组及音频电+低压缺氧组在音频电治疗30 min后，行小鼠避暗的学习和自主活动的测试。24 h后，音频电+低压缺氧组行音频电治疗，再进行缺氧实验。

1.2.2急性低压缺氧实验

将模型组和音频电+低压缺氧组的小鼠同时置于动物低压舱内，以30 m/s的速度上升至8. 0 km高度，停留30 min后，以30 m/s速度降到地面，2h后分别行小鼠避暗记忆功能和自主活动测定。

1.2.3小鼠避暗实验

    依据文献将小鼠置于避暗实验仪中，记录小鼠进入暗室受到电击的M和EL, , 24 h后进行急性低压缺氧实验，然后再重复避暗实验，记录受电击的M和EL,，以此评价小鼠学习和记忆功能。

1.2.4小鼠自主活动测定

    将小鼠置于自主活动自动记录箱中，记录5 min内活动次数。

结果以平均值士标准差表示，均数间差异用，检验。

2结果

2.1避暗实验及音频电作用的影响

经音频电治疗15d后，在避暗训练中，音频电组及音频电+低压缺氧组的学习成绩优于对照组和模型组，M明显减少，EL延长;24 h后经急性低压缺氧实验，再对小鼠进行记忆功能测定，结果模型组与对照组相比川显著增多，EL,明显缩短;音频电组与对照组相比川明显减少，EL,明显延长;音频电+低压缺氧组与模型组比较，M显著减少，EL显著延长，结果见表1。

2. 2小鼠自主活动测定

小鼠自动活动测得结果为模型组与对照组、音频电组及音频电+低压缺氧组比较，小鼠自主活动明显减少(P<0.01) ;音频电组小鼠自主活动减少，但与对照组比较无统计学意义，结果见表2。

3讨论

    目前，临床上对缺氧的治疗方法有多种，如细胞色素C、高压氧疗法等，但对其预防性治疗的方法却很少见。本实验利用音频电对正常及变性神经、肌肉的兴奋作用，探讨了音频电对急性低压缺氧导致学习记忆障碍有无预防性作用。实验结果表明，音频电对急性低压缺氧导致的学习记忆障碍有一定的预防作用。

    实验中，由于小鼠处于玻璃容器内，四肢接触湿滤纸，音频电流可通过滤纸传到小鼠全身。哺乳动物神经和骨骼肌的绝对不应期为0.5^-2 ms，实验中的音频电流是脉冲为2 000 Hz的等幅正弦交流电，每两个脉冲间隔时间为0. 5 ms，所以综合2^-4个脉冲电流刺激能落在神经、肌肉的绝对不应期后，使小鼠全身神经、肌肉产生兴奋，进而促进脑细胞、肌细胞的活动加强，代谢率提高，从而可抵消缺氧造成的部分损害。另外，音频电疗后，局部血管先收缩后扩张，尤其是毛细血管密度增加、口径增宽，这样可促进血液循环「‘，7」，其作用可能增加脑血流量，改善缺氧时能量代谢，调节相关代谢产物及改善神经纤维传导功能，使中枢抑制的活动减少得到改善。

    中枢神经系统内的神经递质与学习记忆有关。有文献报道，动物学习训练后，注射中、小剂量拟胆碱药毒扁豆碱，能显著改变正常体内或对长时记忆的贮存和再现能力;而注射抗胆碱药东蓖胆碱，可使学习记忆减退。本实验中应用的音频电疗法，属于中频电疗的一种，其可通过刺激神经，使神经组织释放出小量的P物质和乙酞胆碱，因此音频电预防性治疗能对抗因急性缺氧导致的记忆功能减退，可能与其促进神经元释放的乙酞胆碱有关。