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Abbexa丨3-甲基组氨酸(3-MH)ELISA试剂盒测定原理

武汉艾美捷科技有限公司2022年1月11日 3:35 点击:928

Abbexa3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒测定原理

 

3-甲基组氨酸(3-Methylhistidine3-MH)是2019年全国科学技术名词审定委员会公布的运动医学名词。是一种翻译后修饰的氨基酸,可从人体尿液中排出。3-甲基组氨酸在尿液中的浓度可作为肌肉损伤的人类的骨骼肌蛋白质分解的可靠指标。

 

3-甲基组氨酸是参与组成骨骼肌收缩的蛋白的氨基酸成分。当肌肉收缩引起骨骼肌收缩蛋白分解时,释放出3-甲基组氨酸,因肌细胞中无相应的分解及再利用的酶,故从尿中排出。食用豆制品和肉类,尤其是鸡肉,尿液中的3-甲基组氨酸浓度也会升高。

 

艾美捷丨Abbexa  3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒,用于体外定量测量血清、血浆等样本中的3-甲基组氨酸(3-MH)浓度,促进3-甲基组氨酸的相关研究,不妨来了解一下。

 

3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒基本参数如下:

英文名称 3-Methylhistidine (3-MH) ELISA Kit

目标分析物 3-甲基组氨酸 (3-MH)

反应种属 不限(General

检测方法 比色法

样本类型 血清、血浆等

检测范围 6.25 nmol/ml - 400 nmol/ml

 

3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒测定原理:

该试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附测定技术。将3-MH预包被在96孔板上。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。预包被的3-MH和样品中的3-MH与含有生物素标记的抗体发生竞争性抑制反应。然后加入结合了HRP的试剂,并孵育整个板子。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的缀合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后,只有含有足够3-MH的孔才会产生蓝色产物,然后在加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的3-MH量成反比。在酶标仪中于450 nm处用分光光度法测量OD,由此可以计算3-MH的浓度。

 

经过验证的3-甲基组氨酸(3-MH)标曲:


11.png

 

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3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒制备所需条件

 

3-甲基组氨酸(3-MH)是一种翻译后修饰的氨基酸,在人类尿液中排泄。尿中3-甲基组氨酸浓度可作为肌肉损伤患者骨骼肌蛋白质分解的可靠指标。尿中3-甲基组氨酸浓度也因食用大豆制品和肉类(尤其是鸡肉)而升高。

 

3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒是一种用于体外定量测量血清、血浆和其他生物液体中3-甲基组氨酸(3-MH)浓度的ELISA试剂盒。我们一起来看看 艾美捷丨Abbexa3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒 ~

 

3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒的稳定性:

由活性损失率决定。在适当的储存条件下,在有效期内损失率小于5%。为尽量减少性能波动,应严格控制操作程序和实验室条件。并建议整个分析过程由同一用户执行。

 

3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒需要的准备材料:

37°C培养箱

多通道和单通道移液管和无菌移液管尖端

喷射瓶或自动微孔板清洗机

1.5毫升试管

蒸馏水

吸水滤纸

100毫升和1升刻度钢瓶

微孔板阅读器(波长:450 nm

酶联免疫吸附摇瓶

 

3-甲基组氨酸(3-MHELISA试剂盒样本收集/制备:

1.血清:应将样本收集到血清分离管中。在4°C或室温下使试管在垂直位置不受干扰过夜,使血清凝固达60分钟。以约1000×g离心20分钟。立即或等份分析血清,并在-20°C-80°C下储存。

2.血浆:使用肝素或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内,以1000×g离心15分钟。立即测定或等份测定并储存在-20°C-80°C下。避免溶血和高胆固醇样品。

3.组织匀浆:组织匀浆的制备取决于组织类型——这只是一个例子。用冰冷的PBS冲洗组织,去除多余的血液。均化前称重。精细切碎组织,用组织匀浆器在PBS冰上匀浆,并用超声波处理细胞悬浮液。以5000×g离心匀浆5分钟,收集上清液。立即测定或等份测定,并储存在-20°C下。

 

试剂准备:

1) 标准品:用推荐体积的标准稀释液缓冲液配制标准品,制成标准溶液。然后使用标准稀释液缓冲液对标准溶液进行连续稀释,如方案中所述。

2) 洗涤缓冲液:按照方案中的说明,用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液。

3) 检测试剂制备:计算所需工作液的总体积。分别用稀释剂A和稀释剂B1:100稀释检测试剂A和检测试剂B

 

化验程序:

1) 设置标准、测试样品和控制井。

2) 将50µl稀释标准溶液等分到标准孔中。

3) 将50µl标准稀释液缓冲液等分放入对照(零)孔中。

4) 将50µl稀释样品等分到样品孔中。

5) 立即向每个孔中等分50µl检测试剂A。在37℃下培养45分钟。

6) 洗3次。

7) 向每个孔中等分100µl检测试剂B。在37℃下培养30分钟。

8) 洗5次。

9) 将90µl TMB基质等分到每个孔中。在37℃下培养10-20分钟。

10) 等分50µl停止溶液。

11) 在450牛米处测量外径。

 

艾美捷科技是Abbexa的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

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Cell Biolabs西尼罗病毒胞膜蛋白ELISA检测试剂盒检测原理

 

西尼罗病毒(West Nile VirusWNV)可引起人畜共患、虫媒传播的自然疫源性疾病,即西尼罗病(West Nile DiseaseWND,虽然名字听起来比较陌生,但是这并不是一种新发传染病,只是大多数的感染者为隐性感染或低热等非特异性症状。早在20世纪90年待,西尼罗病就爆发过,导致了人群大规模感染和高死亡率,并伴随大量的鸟类、家禽、马和牛等的死亡。虽然我国目前尚未出现人感染西尼罗病,但是未来仍然存在西尼罗病传入和流行的风险,因此对西尼罗病毒的研究也有助于未来有效预测、预防和控制西尼罗病。

 

西尼罗病毒是一种基因组约为11kb的单股正链RNA病毒。该病毒基因组5’端为结构蛋白区,3’端为非编码区。这种RNA可直接作为mRNA而翻译成多肽,并在病毒和细胞内蛋白酶的共同作用下被切割成3种结构蛋白(衣壳蛋白C、胞膜蛋白E和膜蛋白prM/M)和7种非结构蛋白(NS1NS2aNS2bNS3NS4aNS4bNS5)。其中E蛋白在西尼罗病毒的生命周期中起着重要作用,也是产生中和抗体的主要病毒蛋白。由于E蛋白可以介导病毒附着以及病毒和宿主的融合,并且大多数中和抗体是针对E蛋白上的抗原表位产生的,因此E蛋白是目前西尼罗病毒疫苗开发的最佳研究靶点。

 

接下来一起看看艾美捷丨Cell Biolabs西尼罗病毒胞膜蛋白ELISA检测试剂盒,方便快捷,助力科研。

 

西尼罗病毒胞膜蛋白ELISA检测试剂盒原理:

 

WNV E蛋白的抗体被吸附到微量滴定板上。样品或标准品中存在的WNV E蛋白与吸附在平板上的抗体特异性结合;添加生物素标记的抗WNV E蛋白抗体,与捕获的抗原WNV E蛋白结合。

在孵育和洗涤步骤之后,加入HRP偶联的链霉亲和素,与生物素标记的抗WNV E蛋白抗体结合。在洗涤步骤中去除未结合的链霉亲和素,将与HRP反应的底物溶液添加到孔中。

有色产物的形成与样品中存在的WNV E蛋白的量成比例。加入酸终止反应,并在450nm处测量吸光度。用标准品WNV E蛋白制备标准曲线,然后确定样品WNV E蛋白浓度。

 

西尼罗病毒胞膜蛋白ELISA检测试剂盒标曲:


31.png

 

发表文章:

 

1.Kobayashi S, Kaneko C, Kawakami R, Hasebe R, Sawa H, Yoshii K and Kariwa H (2020) Sci. Reports, 10:7168-7177.

2.Maharaj PD, Langevin SA, Bolling BG, Andrade CC, Engle XA, Ramey WN, Bosco-Lauth A, Bowen RA, Sanders TA, Huang CY-H, Reisen WK, and Brault AC (2019) PLoS Negl Trop Dis 13:e0007473.

3.Colavita F, Quartu S, Lalle E, Bordi L, Lapa D, Meschi S, Vulcano A, Toffoletti A, Bordi E, Paglia MG, Di Caro A, Ippolito G, Capobianci MR, and Castilletti C. (2017) J. Clin. Virol. 86: 27-30.

4.Valiakos G, Athanasiou LV, Touloudi A, Papatsiros, Spyrou VV, Petrovska L and Billinis C (2013) Intech, 2: 43-70.

 

艾美捷科技是Cell Biolabs的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

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LC Laboratories 环巴胺 / Cyclopamine 相关研究

 

环巴胺(Cyclopamine)从藜芦属植物内分离得到的一种异甾体类生物碱,主要存在百合科植物中北美山藜芦(Veratrum californicum)、印第安鹿食草(Corn lily)及毛叶藜芦(Veratrum grandiflorum)、伊贝(Fritillaria pallidiflora Schrenk)四种植物。

 

环巴胺对Hedgehog信号通路有抑制作用,在抗肿瘤方面表现出良好的活性。研究表明,环巴胺可以对Hedgehog信号通路的激活起到抑制作用,而后者参与原癌基因 Smoothened (Smo) 或灭活肿瘤抑制基因 Patched (Ptch) 的突变相关反应途径,并且这两种基因都能够编码多程跨膜蛋白。此外,已经证明环巴胺的抑制作用是由于其与Smo七螺旋蛋白束的直接结合有关。

 

艾美捷丨LC Laboratories 环巴胺 / Cyclopamine 目前已经应用到quan4100个实验室,纯度非常高,当然价格也是十分友好的。

 

环巴胺 / Cyclopamine 其它基本参数:

cat# LCL-C-8700

规格 10mg/25mg/100mg/300mg

CAS 4449-51-8

分子式 C27H41NO2

分子量 411.62

纯度 99%

外观 白色结晶固体;或小瓶底部透明固体膜

溶解性 溶于乙醇或DMSO

运输与保存方法 常温运输;-20℃保存

 

Nature communications正文引用:


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其他参考文献

 

[1]. Peukert S, et al. Identification and structure-activity relationships of ortho-biphenyl carboxamides as potent Smoothened antagonists inhibiting the Hedgehog signaling pathway. Bioorg Med Chem Lett, 2009, 19(2), 328-331.

[2]. Berman DM, et al. Widespread requirement for Hedgehog ligand stimulation in growth of digestive tract tumours. Nature, 2003, 425(6960), 846-851.

[3]. Thayer SP, et al. Hedgehog is an early and late mediator of pancreatic cancer tumorigenesis. Nature, 2003, 425(6960), 851-856.

[4]. Ma W, et al. Reduced Smoothened level rescued Aβ-induced memory deficits and neuronal inflammation in animal models of Alzheimer's disease. J Genet Genomics. 2018 May 20;45(5):237-246.

[5]. Qi Wan, et al. Overexpression of Laminin α4 Facilitates Proliferation and Migration of Fibroblasts in Knee Arthrofibrosis by Targeting Canonical Shh/Gli1 Signaling. Connect Tissue Res. 2020 May 24.

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Enzo代理丨Enzo Life Sciences授权代理丨艾美捷科技

 

Enzo Life Sciences为生命科学研究提供基因组分析、细胞生物学、翻译后修饰、信号转导、肿瘤和免疫学、药物筛选等相关领域的研究工具。Enzo强大的蛋白质、抗体、肽、小分子、标记探针染料和试剂盒组合为生命科学研究人员提供了用于目标识别/验证、高含量分析、基因表达分析、核酸检测、蛋白质生物化学和检测以及细胞分析的工具。

 

Enzo Life Sciences 正在扩大其在生命科学研究市场的影响力,不断推出创新试剂盒和试剂来服务于其核心研究领域,同时还根据合同为客户提供定制化的检测开发服务。艾美捷科技是 Enzo Life Sciences 的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。


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以下是Enzo Life Sciences的特色产品:

名称                 cat#   

Fibrinogen ELISA Kit         ADI-900-230

Plasminogen ELISA Kit      ADI-900-231

Puerarin      ALX-350-249

CYTO-ID Autophagy Detection Kit 2.0      ENZ-KIT175

Adiponectin ELISA Kit      ALX-850-377

Angiotensin A ELISA Kit      ADI-900-207

MMP-2 Colorimetric Drug Discovery Assay      BML-AK408

VEGF (human) ELISA Kit      ENZ-KIT156

CRP (human) ELISA Kit      ENZ-KIT102

PGE2 High Sensitivity ELISA Kit      ADI-930-001

PGE2 CLIA (chemiluminescent) Kit      ADI-910-001

PGE2 FPIA (fluorescent) Kit      ADI-920-001

 

艾美捷科技是Enzo Life SciencesEnzo的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。




(来源: 武汉艾美捷科技有限公司


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