系列ECL化学发光试剂盒
- 上海前尘生物科技有限公司2017年4月21日 17:10 点击：1659
系列ECL化学发光试剂盒
——点亮您的印迹膜，一触即发！
关键词：ECL；Western blotting；HRP底物；化学发光
1. 产品概述
ECL试剂，即化学发光法检测辣根过氧化物酶（HRP）的底物，是目前Western blotting检测中最为灵敏的试剂。目前市场上普通ECL试剂在使用过程中经常出现易淬灭、高背景、不稳定以及低丰度蛋白难以检测等问题，影响最终实验结果。
翊圣生物根据目前市场现状，集中免疫检测领域的优秀科研人员，在严格控制鲁米诺原料的基础上，不断改良增强剂和稳定剂配方，针对不同需求开发了4类ECL试剂，包含增强型、超敏型、持久型和最高灵敏度型产品，不仅可满足实验者对目的蛋白从低丰度到高丰度表达的检测要求，同时可在不影响实验的条件下，提高发光强度，使您获得的图像更加清晰。
?卓越的灵敏度——皮克至低飞克级的抗原检测 ?更高的信噪比——精准发光底物，降低背景
?更利节省抗体——优化底物系统，更高抗体结合力 ?优异的性价比——更高的性能，更低的价格
?极佳的稳定性——新型氧化剂，常温下稳定保存1年
2. 产品原理
ECL试剂检测的核心原理为氧化反应发光：鲁米诺（lumino）作为发光底物的主要成分，在碱性条件下，通过辣根过氧化酶（HRP）催化，被H2O2氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时发出光子，最大发射波长为425nm，光子信号可通过X射线胶片或CCD成像仪被捕获。
3. 产品选择
翊圣目前拥有的4种ECL产品，各具特色，能够完全满足用户的免疫印迹应用需求。
那么，您的实验应该选择哪一种产品呢？
表1 ECL试剂选择指南
Yeasen | Enhanced ECL 增强型 | Super ECL 超敏型 | SuperDura 持久型 | MaxiSignal 最高灵敏度型 |
适用样本 | 靶点丰度较高，常规蛋白样本 | 靶点丰度低，样本有限 | 靶点丰度较低，样本有限 | 靶点丰度极低，样品珍贵 |
检测灵敏度 | 中等皮克级 | 低皮克级 | 中等飞克级 | 低飞克级 |
信号持续时间 | < 2 h | <12 h | <24 h | <8 h |
适用检测系统 | 所有试剂均适用X射线胶片，CCD成像仪 | |||
一抗稀释浓度 | 1:1000-1:4000 | 1:1000-1:10,000 | 1:1000-1:50,000 | 1:5000-1:100,000 |
二抗稀释浓度 | 1:1000-1:4000 | 1:2000-1:10,000 | 1:50,000-1:250,000 | 1:100,000-1:500,000 |
推荐用膜 | NC膜 | NC膜或PVDF膜 | NC膜或PVDF膜 | NC膜或PVDF膜 |
存储稳定性 | 室温1年 | 室温1年 | 室温1年 | 4℃ 1年，室温半年 |
优势 | 同一级别灵敏度中信号最强 | 性价比最高，适用于多数WB实验 | 最长信号持续时间，极其适用于多次曝光 | 卓越灵敏度，极其适用于痕量蛋白检测 |
【注】：推荐抗体稀释浓度为抗体储液浓度为1mg/mL时的稀释浓度。
4. 产品应用
YeasenECL试剂对比其他品牌同级别产品具有更佳的使用效果。
图1 Yeasen ECL超敏型底物Super与其他品牌同级别底物Pico检测效果比对
图2Yeasen ECL最高灵敏度型底物MaxiSignal与其他品牌同级别底物West Femto检测效果比对
图3Yeasen ECL持久型底物SuperDura与其他品牌同级别底物West Dura检测效果比对
5. 价格优势
Yeasen致力于为您提供性价比最高的产品。
图4 Yeasen ECL产品与其他品牌同级别产品价格比对
6. 常见问题
遇到的问题 | 原因分析 | 推荐解决方法 |
胶片出现反影 | 反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 |
胶片出现棕色或黄色条带 | ||
荧光猝灭 | ||
操作时间过长，膜逐渐干掉 | 避免膜干掉 | |
保鲜膜、显影液或定影液污染 | 养成良好的实验习惯 | |
反应系统中HRP量过少 | 增加HRP标记物 | |
胶片无条带显现或者信号较弱 | 转膜的效率低 | 提高转膜效率，用预染Marker判断。 |
抗原、抗体量少或不匹配 | 增加抗原/抗体量或选择合适抗原/抗体 | |
X光胶片有问题 | 曝光后X光谱全黑（而非透明色），则表明胶片已完全曝光，使用新的X光片 | |
显影/定影液有问题 | 可预先曝光一张胶片进行判断，如有问题当换用新的显影/定影液 | |
反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 | |
高背景 | 一抗二抗浓度太高 | 降低抗体浓度，延长封闭时间 |
抗体未清洗干净 | 增加洗膜次数 | |
封闭不完全 | 优化封闭条件 | |
使用错误的封闭剂 | 使用其他的封闭剂 | |
过度曝光 | 降低曝光时间 | |
抗体特异性差 | 更换优质抗体 | |
反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 | |
条带有空斑 | 抗原以及二抗的浓度过高 | 稀释样品重新跑胶，也可将混合好的显色液冰浴后，加到膜上即刻快速显色。 |
带型不规则 | 转膜有气泡或甲醇（对于PVDF膜）水化不均匀 | 优化转膜条件。 |
胶片出现斑点 | HRP标记物聚集体 | 0.2μm膜过滤HRP标记物 |
非特异性条带 | 反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 |
SDS引起蛋白非特异性结合 | 实验流程中不使用SDS | |
抗体特异性差 | 更换优质抗体 | |
封闭不足 | 增加封闭时间或使用其他封闭剂 |
7. 订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
Super ECL Detection Reagent 化学发光超敏显色试剂盒 | 36208ES60 | 100mL | 329.00 |
36208ES76 | 500mL | 1289.00 | |
36208ES80 | 1000mL | 2349.00 | |
Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit 增强型ECL化学发光检测试剂盒 | 36222ES60 | 100mL | 259.00 |
36222ES76 | 500mL | 1089.00 | |
36222ES80 | 1000mL | 1989.00 | |
SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate 持久性化学发光底物 | 36223ES10 | 10mL | 267.00 |
36223ES60 | 100mL | 1557.00 | |
36223ES70 | 200mL | 2857.00 | |
36223ES76 | 500mL | 5257.00 | |
SuperSignal MaxiSignal Maximum Sensitivity Substrate 最高灵敏度化学发光底物 | 36224ES10 | 10mL | 287.00 |
36224ES60 | 100mL | 1757.00 | |
36224ES70 | 200mL | 3257.00 | |
36224ES76 | 500mL | 5857.00 |
8. 相关产品推荐
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
X射线摄影暗盒（小号） | 36243ES35 | 5×7英寸 | 129.00 |
X射线摄影暗盒（中号） | 36243ES58 | 8×10英寸 | 169.00 |
X光片 | 36209ES01 | 1盒(100片) | 227.00 |
Fixing Powder 定影粉 | 36210ES01 | 包 | 20.00 |
Developing Powder 显影粉 | 36211ES01 | 包 | 20.00 |
Primary & Secondary Antibody Diluent for WB WB专用一抗二抗稀释液 | 36206ES60 | 100 mL | 147.00 |
36206ES76 | 500mL | 538.00 |
http://www.yeasen.com/index.htm
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