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nightsea转基因生物观测利器DFP-1,BlueStar,SFA-RB

北京群晓科苑生物技术有限公司2014年10月30日 16:24 点击:14401

 美国nightsea致力于研究和开发荧光观测装备,其产品系列有DFP-1双荧光蛋白手电筒系列BLS2单荧光蛋白手电筒系列SFA-RB体视显微镜荧光适配器

荧光是各种各样细胞生物学、神经系统学及其他领域研究中的一种强大和广泛使用的工具。
nightsea的DFP-1,BLS2和SFA-RB除了可用于筛选转基因生物外,还可以用于样本的预筛选、辅助解剖、用于珊瑚研究等,下面就列举一些实例:

 

1. 有时候,研究者们需要对小鼠的伏隔核进行穿孔,以便进一步生化分析。如果能观测到共转染的荧光,就能很容易找到正确的穿孔部位。研究者们就是用BLS2 Bluestar手电筒,来观测荧光,从而找到正确穿孔位置的(文献– Xuan Li and Marina E. Wolf, 2011. Visualization of virus-infected brain regions using a GFP-illuminating flashlight enables accurate and rapid dissection for biochemical analysis. J. of Neuroscience Methods, Vol. 201, Issue 1, pp. 177-179. LINK)

EGFP标记的慢病毒质粒注射进小鼠大脑区域( Marina Wolf, Rosalind Franklin University

 

2.研究者从小鼠大脑中提取GFP标记的背纹体。他们把这比喻成:从一个大一点的燕麦片中分离出一块小的燕麦片,这是很困难的。但是他们用NIGHTSEA的DFP-1或BLS2(手电筒和眼镜组合),他们很容易看到大脑中的目标区域,从而让解剖更准确精确。

小鼠大脑中GFP标记的背纹体(Charles Mazel. Sample photographed at laboratory of Stefano Vicini, Georgetown University

 

3.DFP-1双荧光蛋白手电筒,BLS2单荧光蛋白手电筒,或SFA-RB体视显微镜荧光适配器,可以很快的检测样本是否染色(Alexa Fluor 488 Phalloidin标记)成功,如下图:

兔腰肌的肌纤维(用Alexa Fluor 488 Phalloidin标记)

左图:白光观测  右图:Royal Blue荧光观测(Motic SMZ-186体视显微镜观测)

 

4.SFA-RB体视显微镜荧光适配器以斑马鱼为模型,观测不同毒剂(医药、农药、食品添加剂等)改变大脑的发育。观测图片如下:

基因斑马鱼大脑共聚焦图像
Kaede protein– 绿色是未改变的,红色是改变了的
Robert Thorn(Creton Lab, 布朗大学)提供

 

5. 荧光是珊瑚采集研究的重要工具。现在,可以用经济又实惠的SFA-RB体视显微镜荧光适配器安装到体视显微镜检测珊瑚。
下面的图片是通过立体显微镜观看珊瑚虫。这是由Alina Szmant 博士(UNCW威尔明顿纳大学)与NIGHTSEA的Charles Mazel共同观测的结果

 

6.用于结核分枝杆菌重组株的筛选

在结核分枝杆菌中成功构建了高效同源重组系统,利用该系统构建了rv1364c、pstP跨膜区、pstP胞外区三个突变株,得到双交换突变株的效率为25% -62.5%,从双交换突变株得到无痕缺失突变株的效率为100%.通过gfp作为荧光标记基因,利用NightSea BlueStar蓝光手电筒和滤光眼镜,可以对平板上的基因缺失株直接进行快速判定.
本研究采用nightsea BLS2 BlueStar 蓝色手电筒和滤光镜对平板上的结核分枝杆菌绿色荧光蛋白菌落进行快速鉴定。该方法可以从几百个菌落中瞬间锁定阳性克隆。平板上的菌落照片拍摄用单反相机加载滤光片(购自nightsea公司)实现。

摘自文章[结核分枝杆菌同源重组基因敲除系统的构建和应用]

 
(来源: 北京群晓科苑生物技术有限公司


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