Kamiya丨Kamiya艾美捷狗CRP ELISA说明书

Kamiya丨Kamiya艾美捷狗CRP ELISA说明书

Kamiya艾美捷狗CRP ELISA预期用途：

狗CRP ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA），用于定量测定狗生物样品中的C反应蛋白（CRP）。仅供研究使用。

引言

急性期蛋白质是血浆蛋白质，其在感染，炎症或创伤后浓度增加。Tillet和Frances于1930年在人类中发现了第一个被识别的急性期蛋白。这种CRP之所以如此命名，是因为它能够影响肺炎链球菌体细胞C-多糖的沉淀。CRP是质量为110000至140000道尔顿的α球蛋白，由五个相同的亚基组成，它们非共价组装成环状五聚体。它在肝脏中合成，并且在人体中通常以低于0.3mg/dL的水平作为血清的痕量成分存在。急性组织损伤后血清水平迅速升高，一旦刺激被消除，血清水平迅速下降。已经提出CRP的功能是帮助补体激活，影响吞噬细胞功能，并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的研究表明，血浆或血清中CRP的定量可以为疾病的检测，预后和监测提供有价值的信息，不仅在人类中，而且在伴侣动物和农场中也是如此。

Kamiya艾美捷狗高敏CRP ELISA原理：

在该测定中，样品中存在的CRP与已经吸附到聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。通过洗涤除去未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗CRP抗体。该HRP缀合的抗体与先前结合的CRP形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过加入显色底物3,3'，5,5'-四甲基联苯胺（TMB）测定与免疫吸附剂结合的酶。结合酶的量与测试样品中CRP的浓度成正比；因此，450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。测试样品中CRP的量可以从校准器构建的校准曲线内插，并对样品稀释进行校正。

Kamiya艾美捷狗高敏CRP ELISA组件：

1.稀释剂浓缩物

一瓶含有50毫升5X浓缩稀释剂缓冲液。

2.洗涤液浓缩物

一瓶装有50毫升20X浓缩洗涤液。

3.酶-抗体偶联物浓缩物

一个装有150m在稳定缓冲液中加入与HRP缀合的100倍浓缩亲和纯化的抗狗CRP抗体。

4.TMB底物溶液

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液，pH3.3。

5.停止解决方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

在孔保持器框架中有12个可拆卸的8孔微条。孔用亲和纯化的抗狗CRP包被。

7.Dog-CRP校准器

一个小瓶含有冻干的狗CRP校准品。

8.积极控制

一个装有50mL含0.1%叠-氮-化钠的血清。请参阅浓度控制证书。

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml

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Kamiya丨Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA说明书

Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA预期用途：

小鼠高敏CRP ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA）定量测定小鼠生物样品中的C-反应蛋白（CRP）。仅供研究使用。

引言

急性期蛋白质是血浆蛋白质，其在感染，炎症或创伤后浓度增加。Tillet和Frances于1930年在人类中发现了第一个被识别的急性期蛋白。这种CRP就是这样命名是因为它能够影响肺炎链球菌的体细胞C-多糖的沉淀。CRP是一种质量为110000至140000道尔顿的α-球蛋白，由五个相同的亚基组成，它们非共价组装成环状五聚体。它在肝脏中合成，在人体中通常以痕迹的形式存在血清成分低于0.3 mg/dL。急性组织损伤后血清水平迅速升高一旦刺激被消除，也会非常迅速地下降。有人提出CRP有助于补体激活，影响吞噬细胞功能并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的调查表明血浆或血清中CRP的定量可以为检测，预后和预后提供有价值的信息不仅在人类中，而且在伴侣动物和农场中监测疾病。

Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该测定中，CRP存在于样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。之后通过洗涤去除未结合的样品蛋白质，与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗CRP抗体是补充。该HRP缀合的抗体与先前结合的CRP形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色底物3,3'，5,5'来测定与免疫吸附剂结合的酶-四甲基联苯胺（TMB）。结合酶的数量与样品中CRP的浓度成正比测试；因此，450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。数量测试样品中的CRP可以从校准器构建的校准曲线内插，并进行校正样品稀释。

Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA组件：

1.稀释剂浓缩物

一瓶含有50毫升5X浓缩稀释剂运行缓冲液。

2.洗涤液浓缩物

一瓶装有50毫升20X浓缩洗涤液。

3.酶-抗体缀合物浓缩物

一小瓶含有150μL与HRP缀合的100X浓缩亲和纯化的抗小鼠CRP抗体

稳定缓冲器。

4.TMB底物溶液

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液，pH3.3。

5.停止解决方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

在孔保持器框架中有12个可拆卸的8孔条。孔用亲和纯化的抗小鼠CRP包被。

7.鼠标CRP校准器

一个小瓶含有冻干的小鼠CRP校准品。

8.积极控制

一小瓶含有50μL含0.1%叠氮化钠的血清。请参阅浓度控制证书。

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml

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Kamiya丨Kamiya艾美捷人和动物LBP ELISA说明书

Kamiya艾美捷人和动物LBP ELISA预期用途：

人和动物LBP ELISA已被开发用于定量测定天然和血清，血浆和培养基中的重组人LBP。也适用于牛，猪，兔和狗LBP。仅供研究使用。不用于诊断程序。

Kamiya艾美捷人和动物LBP ELISA原理：

人和动物LBP ELISA是固相夹心酶联免疫吸附测定（酶联免疫吸附试验）。人LBP特异性单克隆抗体用于包被（预包被和封闭模块）。在第一步中，将板与抗原（校准物或样品）一起温育。在此期间孵育后，人LBP被固体结合抗体捕获。样品中存在的未结合材料是通过洗涤除去。现在该板将与特异于人的POD标记的抗体一起温育LBP（第二次孵育）。启示步骤包括TMB作为色原。酶反应停止通过加入终止溶液，用分光光度计测量450nm处的吸收。通过绘制吸收与相应浓度的关系曲线得到校准曲线已知的校准器。运行浓度未知的样品的人LBP浓度与校准器同时，可以从校准曲线确定。

Kamiya艾美捷人和动物LBP ELISA样品制备：

血清，血浆和其他含人LBP的溶液适用于测试。样品在用于测定之前，必须澄清含有可见沉淀物的物质。脂血和溶血探针不可能。样品应在-20°C冷冻长期保存。根据样品中LBP的浓度，必须用稀释缓冲液稀释。对于正常人血清样品，建议稀释1:800。对于动物血清（山羊，绵羊，推荐稀释度为1:2,1:4至1:20），牛LBP 1:10至1:100，猪和兔LBP 1:50至1:200.

测定特性：

正常LBP范围（带人LBP校准器）：

健康献血者中的人LBP：（5-15μg/mL）

牛LBP范围：0.05-2.5μg/mL

绵羊-山羊LBP:10–30 ng/mL

猪-兔LBP:4-10μg/mL

批间变异系数：9.8至17.8取决于浓度

批内变异系数：6.1%

有效范围：5-50ng/mL，线性至25ng/mL

交叉反应：猪，兔，牛，狗，马LBP

特异性：针对免费LBP

Kamiya 人和动物LBP ELISA测定程序：

让所有试剂达到室温并充分混合。

1.样品

移取100μL校准物（50,25,12.5,6.25,3.12,1.5ng/mL=小瓶a-f），参比血清或

将稀释的样品一式两份放入预涂模块（1）的相应孔中并孵育

在室温下摇动一小时。

2.用洗涤缓冲液（A）洗涤3次。

3.检测抗体

移取100l检测抗体（E，瓶2），室温培养1

摇床一小时。

4.用洗涤缓冲液（A）洗涤3次。

5.基材

移取100μL底物溶液（D，小瓶9）到每个孔中。在室内黑暗中孵育12-13分钟

不摇动的温度（取决于实验室中的温度）。

6.停止

移取100μL停止溶液（小瓶8）到每个孔。轻轻敲击盘子混合。

7. 在450 nm处读取吸光度（参考波长620）

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml

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Kamiya丨Kamiya艾美捷人CP ELISA说明书

Kamiya艾美捷人CP ELISA预期用途：

人CP ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA）人体生物样品中CP的测定。仅供研究使用。不用于诊断程序。

引言

铜蓝蛋白是参与铜转运的多功能蛋白，也是重要的血清抗氧化剂。在此期间炎症，创伤性损伤或心肌梗塞，血清铜蓝蛋白水平，作为急性期反应物，上升2-3倍。

Kamiya艾美捷人CP ELISA原理：

在该测定中，样品中存在CP与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CP抗体反应。之后通过洗涤去除未结合的蛋白质，加入检测抗体，生物素缀合的抗CP并且复合物是形成。在洗涤步骤之后，加入辣根过氧化物酶（HRP）缀合的链霉抗生物素蛋白并复合物形成。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色底物3,3'，5,5'来测定复合物-四甲基联苯胺（TMB）。结合酶的数量随样品中CP的浓度直接变化测试；因此，450nm处的吸光度是测试样品中CP浓度的量度。CP的数量样品中的样品可以从校准器构建的校准曲线内插，并对样品进行校正

稀释。

Kamiya艾美捷人CP ELISA组件：

1.稀释剂浓缩物

一瓶含有50毫升5X浓缩稀释剂运行缓冲液。

2.洗涤液浓缩物

图1。

KAMIYA BI KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY OMEDICAL COMPANY

3 Rev.149981876

一瓶装有50毫升20X浓缩洗涤液。

3.检测抗体100X

一小瓶含有150μL在稳定缓冲液中与生物素缀合的亲和纯化的抗人CP抗体。

4.HRP-链霉亲和素100X

一小瓶在稳定缓冲液中含有150µL HRP偶联的链霉亲和素。

5.TMB底物溶液

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液，pH3.3。

6.停止解决方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

7.微量滴定板

在孔保持器框架中有十二个可移动的八（8）孔微孔带。每个孔用亲和纯化的抗人CP包被。

8.人体CP校准器

一个小瓶含有冻干的人CP校准品。

注意事项：

1.开始测定前仔细阅读说明。

2.该套件仅供研究使用。

3.非常小心地确保本产品的质量和可靠性。但是，有可能在某些情况下由于高水平的干扰因素，可能会获得异常结果。

4.不需要添加剂或防腐剂来保持样品的完整性。避免叠氮化物污染。

5.浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞抑制酶反应。

6.其他注意事项：

不要交换不同批次的套件组件。

请勿在到期日之后使用套件组件。

保护试剂免受阳光直射。

不要用嘴吸管。

不要在使用试剂的地方吃，喝，抽烟或使用化妆品。

避免使用手套与试剂接触。

终止溶液含有稀硫酸。可能会刺激眼睛和皮肤。

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml

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Kamiya丨Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA说明书

Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA预期用途：

小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA）小鼠生物样品中血清淀粉样蛋白A（SAA）的定量测定。仅供研究使用。

引言

铜蓝蛋白是参与铜转运的多功能蛋白，也是重要的血清抗氧化剂。在此期间炎症，创伤性损伤或心肌梗塞，血清铜蓝蛋白水平，作为急性期反应物，上升2-3倍。

Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA原理：

在该测定中，样品中存在SAA与已经吸附到聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗SAA抗体反应。之后通过洗涤除去未结合的蛋白质，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗SAA抗体。该HRP缀合的抗体与先前结合的SAA形成复合物。在另一个洗涤步骤之后通过添加显色底物3,3'，5,5'来测定与免疫吸附剂结合的酶-四甲基联苯胺（TMB）。结合酶的数量与样品中SAA的浓度成正比测试；因此，450nm处的吸光度是测试样品中SAA浓度的量度。数量测试样品中的SAA可以从校准器构建的校准曲线内插，并进行校正样品稀释。

Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA组件：

1.稀释剂浓缩物

一瓶含有50毫升5X浓缩稀释剂运行缓冲液。

2.洗涤液浓缩物

一瓶装有50毫升20X浓缩洗涤液。

3.酶-抗体缀合物浓缩物

一小瓶含有150μL与HRP缀合的100X浓缩亲和纯化的抗小鼠SAA抗体

稳定缓冲器。

4.TMB底物溶液

图1。

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY

3 Rev.15092346

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液，pH3.3。

5.停止解决方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

在孔保持器框架中有12个可拆卸的8孔条。用亲和纯化的抗小鼠SAA包被孔。

7.鼠标SAA校准器

一个小瓶含有冻干的小鼠SAA校准品。

试剂制备

1.稀释剂浓缩物

提供的稀释剂溶液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水1:5稀释。

2.洗涤液浓缩物

提供的洗涤溶液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水按1:20稀释。水晶当储存温度低时，浓缩物中的形成并不少见。将浓缩物升温至稀释前30-35°C可溶解晶体。

3.酶-抗体缀合物浓缩物

通过添加10μL计算每个微量滴定板测试条所需的工作共轭溶液量对于用于测试的每个测试条，酶-抗体与990μL1X稀释剂缀合。均匀，但轻轻混合。避免起泡。使用前立即稀释并避光。

4.TMB底物溶液

随时可用。

5.停止解决方案

随时可用。

6.微量滴定板

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY 4 Rev.15092346随时可用。密封微量滴定袋并从袋中取出板。去除所有会不用于测定并放回袋中并与干燥剂一起重新密封。

7.鼠标SAA校准器

向冻干的小鼠SAA校准品中加入1.0 mL蒸馏水或去离子水，轻轻混合直至溶解。这个校准器现在的浓度为13.80μg/mL（如果将来，重组校准器应等分并冷冻目的是使用）。根据下表在使用前立即准备鼠标SAA校准器。混合好在每个步骤之间。避免起泡。

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml

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文献认证！Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒

人类及动物体骨组织不断地进行着重建，骨重建过程包括骨的分解吸收与新骨的形成。破骨细胞（Osteoclast，OC）负责骨分解与吸收，而成骨细胞（osteoblast，OB）负责新骨形成。破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨。破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。   

抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP，tartrate-resistant acid phosphatase）为破骨细胞的标志酶，特异地分布于破骨细胞中，为破骨细胞所特有。通常作为鉴别破骨细胞的重要标志物，使破骨细胞呈红色。  

Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒，经众多Nature文章使用认证，效果非常不错！

Kamiya艾美捷TRAP Staining Kit抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒：

编号：KT-008

实验方案：

① 96孔板上染色细胞。

② 细胞培养上清TRAP活性测定

图1：破骨细胞TRAP染色 

图2：破骨细胞培养上清液中TRAP活性的测定

Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒文章发表：

Sherlock, Jonathan P et al. "IL-23 induces spondyloarthropathy by acting on ROR-γt+ CD3+CD4-CD8- entheseal resident T cells". Nature medicinevol.18,7 (2012): 1069-76.

Ronaldson-Bouchard, Kacey et al. "A multi-organ chip with matured tissue niches linked by vascular flow". Nature biomedical engineering vol.6,4 (2022): 351-371. doi:10.1038/s41551-022-00882-6

Bae, Sung-Jin et al. "Ninjurin1 positively regulates osteoclast development by enhancing the survival of prefusion osteoclasts". Experimental & molecular medicine vol.51,1 (2019): 1-16.

来源：https://www.amyjet.com/featured/TRAP.shtml

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使用说明丨Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒

Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒原理：

K-ASSAY®TRAP染色试剂盒用于破骨细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶的染色。骨量由成骨细胞活性和破骨细胞活性之间的平衡控制。碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶被用作成骨细胞和破骨细胞的标志物。仅供研究使用，不得用于诊断程序。。  

Kamiya艾美捷TRAP Staining Kit抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒组件：

固定剂，10%福尔马林，中性缓冲液（试剂1）1瓶，60毫升

含酒石酸盐的缓冲液，50 mM，pH 5.0（试剂2）1瓶，50 mL

显色底物（试剂3）10瓶，3mg/瓶

试剂盒尺寸：足够的试剂用于染色10 x 96孔板。

注意事项：

1.开始测定前仔细阅读说明。

2.本套件仅供研究使用，不适用于人类或诊断用途。

3.非常小心地确保本产品的质量和可靠性。但是，有可能在

在某些情况下，由于高水平的干扰因素，可能会获得异常结果。

协议：

染色程序（96孔板）

1.取出培养基。用100μlPBS洗涤每个孔一次。

2.向每个孔中加入50μL固定剂（试剂1）并在室温下固定5分钟。

3.用250μldH2O洗涤每个孔3次。

4.用5ml含酒石酸盐的缓冲液（试剂2）溶解1小瓶显色底物（试剂3）。

5.每孔加入50μL显色底物。

6.在37°C孵育20至60分钟（只有破骨细胞染色）。

7.当获得最佳颜色条件时，用dH2O水洗涤。（过度孵化会导致降水。沉淀开始前停止反应。）

Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒培养上清液中TRAP的定性观察：

1.用5ml含酒石酸盐的缓冲液（试剂2）溶解1小瓶显色底物（试剂3）。

2.将30μL/孔的培养上清液分配到96孔板中并加入170μL/孔的显色剂

上面制备的含底物/酒石酸盐的缓冲液。

3.在37℃孵育3小时。

4.在540nm处读取酶标仪。

Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒文章发表：

Sherlock, Jonathan P., et al. "IL-23 induces spondyloarthropathy by acting on ROR-γt+ CD3+ CD4? CD8? entheseal resident T cells."Nature medicine18.7 (2012): 1069-1076.

Kim, Jinkoo, et al. "Erythropoietin mediated bone formation is regulated by mTOR signaling."Journal of cellular biochemistry113.(2012): 220-228.

来源：https://www.amyjet.com/featured/TRAP.shtml

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艾美捷QuickTiter 逆转录病毒定量试剂盒测定原理

逆转录病毒基因转移是一种有效地将稳定的、可遗传的遗传物质导入大肠杆菌的技术任何分裂细胞类型的基因组。不能复制的逆转录病毒通常通过将逆转录病毒载体转染到包装细胞系中。逆转录病毒根据用于进入宿主细胞的受体。亲嗜性病毒可以识别仅在小鼠身上发现的受体和大鼠细胞。兼嗜性病毒识别广泛的哺乳动物细胞上发现的受体类型。

小鼠白血病病毒（MMLV）为基础的载体是基因中应用最广泛的逆转录病毒载体由于其能够将其转基因稳定整合到宿主染色体DNA中的能力较低免疫原性。通过覆盖病毒进行滴定以确定病毒滴度的方法连续稀释后上清液到靶细胞（例如NIH 3T3细胞）上被广泛用于表示

感染性病毒浓度为每体积菌落数（即每毫升CFU）。然而，该集落形成测定是耗时的（7天或更长时间）。此外，滴度由由于用于相同滴定方法的条件不一致，不同的基团可能会有所不同，例如靶细胞类型，靶细胞数量，聚阳离子（例如聚凝胺）浓度，孵育温度，和转导的暴露时间。

Cell Biolabs艾美捷QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒不涉及细胞感染；相反，它专门测量纯化病毒或未纯化病毒的病毒核酸含量上清液样品（参见测试原理）。在未纯化的病毒上清液的情况下，试剂盒是特别适用于在转导步骤之前测定上清液滴度。该套件有检测灵敏度极限为1.5 X 109病毒颗粒（VP）/mL，足以满足中高滴度逆转录病毒样本。整个过程大约需要60分钟。每个试剂盒都提供足够的试剂执行20次测试。QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒提供了一种快速定量的有效系统病毒上清液和纯化病毒的逆转录病毒滴度。

Cell Biolabs艾美捷QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒测定原理：

Cell Biolabs艾美捷QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒套件组件：

1.QuickTiter™ 溶液A（部件号40020）：一根试管–200µL。

2.快速滴定™ 逆转录病毒溶液B1（部件号312001）：一根试管–800µL。

3.QuickTiter™ 逆转录病毒溶液B2（部件号312002）：一根试管–800µL。

4.QuickTiter™ 溶液C（2X）（部件号40023）：两个管-每个1.5 mL

5.CyQuant®GR染料（400X）（部件号105101）：一根试管–50µL。

6.QuickTiter™ 逆转录病毒RNA标准品（部件号312003）：一个试管–500µL，含200

µg/mL retrovirus RNA Standard

来源：https://www.amyjet.com/products/VPK-120.shtml

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艾美捷QuickTiter 逆转录病毒定量试剂盒的制备方案

Cell Biolabs艾美捷QuickTiter逆转录病毒定量试剂盒提供了一种测定逆转录病毒滴度的快速方法。该测定法测量逆转录病毒的病毒核酸含量，可以在纯化病毒之前或之后进行。

试剂的制备：

•1X QuickTiter™ 解决方案C：准备1X QuickTiter™ 溶液C通过稀释提供的2X在去离子水中以1:2储存。将稀释的溶液储存在室温下。

•1XCyQuant®GR染料：根据需要估算1XCyQuant®GR染料的用量包括逆转录病毒RNA标准样品的测定数量。在使用前立即准备1XCyQuant®GR染料，方法是在1X TE中以1:400稀释提供的400X储备液。为了获得最佳效果稀释溶液应与其制备2小时一起使用。

Cell Biolabs艾美捷QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒标准曲线的制备：

1.从200μg/mL，100μg/mL，50μg/mL，25μg/mL，…0创建逆转录病毒RNA标准品

μg/mL（1:2连续稀释），标记九个微量离心管1～9。

2.加入20μL1X QuickTiter™ 溶液C至＃2至＃9管，转移20μL200μg/mL QuickTiter™ 逆转录病毒RNA标准品到＃1和＃2管。将＃2管混合，转移20μL 混合物（100µg/mL）到下一个试管中。重复通过tube＃8的步骤，并使用tube＃9作为空白。

3.将5μL每种稀释液（包括空白）转移至适用于荧光计的微量滴定板。添加向每个包含5µL样品的孔中加入95µL 1XCyQuant®GR染料。读盘子使用480/520 nm滤光片组的荧光读板器。

Cell Biolabs艾美捷QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒测定方案：

1.用所需方法在包装细胞系中产生逆转录病毒。

2.将病毒样品（最多2 mL）加入微量离心管中，并将最终体积调节至2 mL

完整的培养基，如含有10%FBS的DMEM。

注意：为了准确定量，必须包括适当的阴性对照。使用相同的

未转染或模拟转染的包装细胞培养基上清液的体积。

3.加入10μlQuickTiter™ 溶液A到测定管中并通过将管倒置几次来混合

时代。在37ºC孵育30分钟。

4.加入20μLQuickTiter™ 逆转录病毒溶液B1，通过倒置混合。立即加入20μL

QuickTiter™ 逆转录病毒溶液B2并通过倒置混合。在37ºC孵育30分钟。

5.12000 g离心10分钟。小心取出并丢弃上清液。去除

最后一位液体，再次以12000 g离心管30秒，然后除去剩余的液体

上清液用小口径移液器吸头避免吸出沉淀。

6.加入20μL1X QuickTiter™ 溶液C溶解沉淀，涡旋混合10分钟

秒。

7.以12000g离心5分钟。将5μL上清液转移至适合于

荧光计。将95μL新制备的1XCyQuant®GR染料加入含有5μL的孔中

上清液。使用480/520 nm滤光片组，用荧光读板器读板。

8. 根据标准曲线计算逆转录病毒滴度

结果示例

下图显示了典型的定量结果。应该使用下面的数据仅限参考。这些数据不应该用来解释实际结果。

图：逆转录病毒RNA标准曲线。QuickTiter™ 逆转录病毒RNA标准品为按照上述说明进行稀释。荧光测量是在SpectraMax Gemini XS荧光计（分子器件），具有485/538 nm滤光片组和530 nm截止。

来源：https://www.amyjet.com/products/VPK-120.shtml

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艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab化学性质和特异性说明

艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab是人源化IgG1κ单克隆抗体，其以高亲和力选择性结合人表皮生长因子受体2蛋白HER2的细胞外结构域。曲妥珠单抗通过重组DNA技术在哺乳动物细胞（中国仓鼠卵巢）中产生。

艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab化学性质：

曲妥珠单抗生物仿制药-研究级

结合：别藻蓝蛋白（APC）

目标：ErbB2

同种型：IgG1κ

其他名字：受体酪氨酸蛋白激酶erbB-2，MLN 19，HER2，HER2/neu

宿主：CHO细胞

物种反应性：人类

艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab特异性：检测人ErbB2。该非治疗性抗体使用与治疗性抗体曲妥珠单抗相同的可变区序列。

浓度：0.2毫克/毫升

配方：该别藻蓝蛋白（APC）缀合物配制在0.01M磷酸盐缓冲盐水（150mM NaCl）PBS pH 7.4,1%BSA和0.09%叠-氮-化钠中作为防腐剂。

存储：当储存在2-8℃时，该别藻蓝蛋白（APC）缀合物是稳定的。不要冻结。

应用：流式细胞术，IHC

应用笔记：红色激光（650 nm）。

使用：ichorbio的曲妥珠单抗生物仿制药仅用于研究用途（RUO）：它不用于诊断或治疗程序

存储：在2-8°C无菌储存时稳定至少一周。对于长期储存，无菌分装在工作体积中，不稀释，储存在-80°C。避免反复冻融循环。

来源：https://www.amyjet.com/products/ICH4013.shtml