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血小板聚集仪 LBY-NJ 操作程序

北京中西远大科技有限公司2014年9月26日 9:44 点击:1631

 一、仪器安装与检查
1. 分别连接仪器与计算机的电源线,将仪器通讯电缆连接于计算机COM2端口,电缆另一头插入仪器通讯口内。
2. 启动计算机系统,按提示完成软件安装。
3. 接通聚集仪电源,打开电源开关。仪器液晶显示窗显示应齐全。
4. 接通计算机系统电源,计算机系统进入WIN98/2000操作界面,在桌面菜单上选择血小板聚集仪系统控制软件(LBY-NJ)快捷键,双击,屏幕显示该软件工作主界面。
二、准备工作
1. 开机:开机在室温条件下预热30分钟,使温度升至37℃。
2. 标本采集:抗凝剂用109mmol/l的枸橼酸钠,取血量与抗凝剂的比例为9:1,立即颠倒充分混匀。(忌用力振荡,应使用塑料试管)
▲注意:枸橼酸钠要现用现配,用蒸馏水配制。
3. 富含血小板血浆(PRP)制备:抗凝血标本用水平离心机500~800转/分(当前离心机为2000转/分),离心10分钟,待离心机自然停止后取出标本,小心吸取上层富含血小板血浆。
▲注意:离心后的PRP中不应含有红细胞,否则应再离心,应根据所用离心机调整合适的转速及离心时间(以PRP得量占血样1/3为佳)。PRP应无溶血。
4. 乏血小板血浆(PPP)制备:将上述已吸取PRP的血再次离心。4000转/分,离心10分钟,待离心机自然停止后取出标本,小心吸取上层无血小板的血浆备用,血浆应清亮透明。测定后液晶屏显示值最好不大于100。
5. 富含血小板血浆(PRP)中血小板数量调整:计数PRP中血小板数量后,液晶屏上显示的血小板相对浓度不大于510,如小于510则不用调整,若大于510时,测定结果受影响(调整公式为:C1V1=C2V2)。最佳状态为显示值在300-400之间。
6. 血小板聚集诱导剂的准备:
6.1 ADP:一般用ADP较多。ADP一般用生理盐水配成3000μmol/l浓度,于-20℃以下小量分装,低温冻存。临用前复溶,并用生理盐水稀释至300μmol/l备用。
例如:ADP的分子量为427,精度称取6.4mgADP,溶于5ml生理盐水中。待完全溶解后,分装于尖底小塑料管中,每管0.1ml,用时加0.9ml生理盐水混匀,即为应用液。
6.2 胶原:使用浓度为10%,腹部胶原效果好于尾部胶原,最好现用现制;冰浴中处理,尽量快,研磨时间要久(不短于半小时~1小时);离心后小针头抽取,聚集率可达40%~50%。
6.3 花生四烯酸(AA):使用浓度为200μmol/l ,用0.1MPBS配制,最好能用氮气保护。
★备注:a 各诱导剂的使用量为5-10μl,可调节其用量使正常组最大聚集率控制在40%-50%。
b 解冻后要在冰盒里放置,用时抽出。胶原要现用现配。
二、操作步骤
1. 在测定样品方杯中加入一小磁棒和300μlPRP置恒温孔中预热5分钟备用。在另一方杯中加入300μlPPP备用。
2. 将仪器调至TEST状态,在测试通道中插入PPP方杯,按确认键或相应的通道键仪器自动检测零点,窗口显示P25(举例)该数值为PPP血浆中血小板的相对浓度,待数值稳定后按确认键或相应的通道键。
3. 取出PPP方杯放入PRP方杯,当窗口显示R256(举例)时[该数值表示被测血浆中(PRP)血小板的相对浓度],待数值稳定后,按确认键或相应的通道键后窗口显示ADP。
4. 用微量进样器吸取3μlADP加入杯底,按确认键或相应的通道键仪器进入测试血小板聚集状态,窗口显示计时时或血小板最大聚集率。
5. 测试完毕后仪器自动打印出结果及相应曲线,一般只报告最大聚集率。
▲注意:测试时,为保持数值的一致性,请始终保持测试方杯的凸起面与仪器测试通道的黄色标记在同侧。
三、注意事项
1. 微量进样器加样时必须插到杯底再加样。
2. 如做不出结果,可取出试杯用肉眼观察是否有血小板聚集的微小团络,试样会变得比加ADP前清澈透明。否则说明血小板并未聚集,应检查样本制备和ADP有无问题。
3. 样本制备是关键,初次用离心机制备样本时应与血球计数测量血小板数量的结果予以对比,选择合适的离心转速和时间。
4. 进行测量时要保证室温在22℃以上,以免样品内形成胶胨状物质而影响检测结果。
四、仪器的日常维护
1. 电源电压:(220±22)V,频率(50±1)Hz。如当地电压不稳定,应使用稳压电源,不与大功率电器共线并用,应确保接地,避免干扰。
2. 保持清洁,特别是测试孔内的清洁。使用后一定要擦干净。避免阳光直晒,远离强热物体,防治受潮、腐蚀,远离强电磁场干扰。

(来源: 北京中西远大科技有限公司


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