氯霉素快速检测

目前的氯霉素等抗生素快速检测，主要有酶联免疫法（ELISA）和胶体金免疫层析法。
　　胶体金法的特点是快速、简朴，无需实验室器材和专业的操纵职员，前处理简朴，结果直观，常温保留。海内有良多优秀的厂家均有出产，比如苏州艾瑞德，扬州金莱等。现已广泛应用于海内各大企业。 　　
      胶体金法只需将处理好的样品加入稀释液，搅拌平均，将混合好的检测液滴入检测卡中，5~10分钟即可根据卡上的出线情况判读结果。 　　
      ELISA法反应原理
　　主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的。在整个反应当中,样品中氯霉素含量越多，反应呈色就越淡。反之，样品中氯霉素含量越少，则呈色越深。 　　
      试剂盒组成
　　1、微量测试孔：每条8孔，每板12条
　　2、氯霉素尺度溶液： 　　0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35 ppb、4.05 ppb，1.5ml/瓶 　　
      3、10倍浓缩萃取稀释液：一瓶，30ml/瓶 　
　   4、10倍浓缩洗涤液：一瓶，30 ml /瓶 　
　   5、氯霉素酶标记物： 一瓶，8 ml/瓶 　　
      6、底物溶液：一瓶，12 ml/瓶 　
　   7、反应终止液：一瓶，13 ml/瓶 　　
      使用说明 　　
      A、留意事项 　　
      1、使用前先将氯霉素尺度溶液6瓶，浓缩萃取稀释液，浓缩洗涤液，酶标记物，底物溶液及微量测试孔条置于室温下，回温30分钟。
　　2、原倍萃取稀释液及洗涤液配制 　　用蒸馏水将10倍浓缩萃取稀释液及浓缩洗涤液分别以1： 9的比例稀释(即1mL浓缩液+9mL蒸馏水)，即可作为样品萃取稀释液与微孔板清洗液。
　　3、回温后，掏出所需微量测试孔条，将剩余板条立刻放回铝箔袋顶用胶带封好，置于4o℃保留。 　　
      B、样品制备 　　
      1.待测物为生乳，则依以下方法进行处理 (5倍稀释) 　　取100ul待测生乳加入400ul萃取稀释液，振荡混合后备用。 　
　   2.待测物为蜂蜜，则依以下方法进行处理 　　
      a.取2g蜂蜜、4ml蒸馏水与2ml 乙酸乙酯置入离心管中，震荡约5分钟，使其充分混合平均。
　　b.离心10分钟(3000rpm)，取0.5ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50℃下氮气吹干(温度请勿超过50oC)。 　
　   c.加入0.5ml萃取稀释液，震荡约10秒钟后备用。
　　3. 待测物为血清、则依以下方法进行处理 　
　   a.抽取待检动物血液，离心或静置取其较透明之上层液(血清层)使用，留意不要有溶血。 　　
      b.将3ml血清加入离心管中，再加入6ml乙酸乙酯，震荡混合约30秒。
　　c.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上层液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
　　d.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先将残余物完全溶解后，再加入1 ml萃取稀释液，震荡约30秒钟。 　
　   e. 离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部门，弃掉。再吸取下层液(水层)备用。 　
　   f.若有乳化现象，请先将大部门上层液(正己烷)掏出后，再将玻璃管置入80oC水中，隔水加热约5~10分钟，可改善乳化情形。 　　
      4. 待测物为鸡肉或鱼、虾，则依以下方法进行处理 　
　   a.将3克样品剪碎后放入50 ml离心管中，再加入6ml乙酸乙酯，并以均质机均质约1分钟，再震荡约30秒。 　
　   b.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
　　c.于此玻璃管中加入正己烷2 ml，先将残余物完全溶解后(若未能完全溶解，可能会导致回收率降低)，再加入1 ml萃取稀释液，震荡约30秒钟。 　
　   d.离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部门，弃掉。再吸取下层液(水层)备用。
　　e.若有乳化现象，请先将大部门上层液(正己烷)掏出后，再将玻璃管置入80oC水中，隔水加热约5~10分钟，可改善乳化情形。待测物为血清、则依以下方法进行处理 　
　   5.待测物为内脏(肝、心等)，则依以下方法进行处理(5倍稀释) 　　同上述步骤a~d，但下层液吸出后，再以萃取稀释液稀释5倍(即下层液50ul加萃取稀释液200ml)。 　　
      6.待测物为饲料，则依以下方法进行处理(10倍稀释) 　　同上述步骤a~d，但下层液吸出后，再以萃取稀释液稀释10倍(即下层液30ul加萃取稀释液270ml)。
　　C、操纵步骤 　　本产品的酶标记物与氯霉素尺度溶液均直接使用，无需再稀释。 　
　   1、于适当微孔中分别加入100mL尺度溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
　　2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前处理的样品溶液。 　
　   3、再于每一微孔中另再加入50mL酶标记物。 　
　   4、小扣盘子周围，使其充分混合后于室温下避光静置温育1小时。 　
　   5、将微孔中的反应液甩掉，再将洗液加满每一微孔后甩掉，重复洗3次。 　　
      6、最后一次甩掉后，在吸水纸上拍干。 　
　   7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后，小扣盘子周围，使其充分混合。
　　8、于室温下避光静置温育20分钟。
　　9、于每一微孔中加入100mL反应终止液。 　
　   10、用酶标仪于波长450nm下判读。
　　D、判断 　　
      1. 计算B/B0值。用样品或尺度液吸光度值(B)除以零尺度吸光度值(B0)再乘以100%。 　
　   2. 以B/B0值为纵坐标，以标样浓度的对数值为横坐标，做尺度半对数曲线。 　
　   3. 根据每个样品的B/B0值就可从曲线上读出相对应样品的浓度。 　
　   4. 因为样品经由了预先稀释，因此根据尺度曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。
　　E、尺度曲线 　
　   F、敏捷度 　
　   氯霉素试剂检测盒的均匀检测下限为 0.05ppb，此浓度之吸光值与阴性尺度溶液(0ppb)之吸光值有显著的差异。 　
　   G、 特异性 　
　   针对以下抗生素进行交叉反应之测试，结果如下： 　　Chloramphenicol =100% 　　Chloramphenicol(free base) <0.1% 　　Gentamycin <0.1% 　　Tetracycline <0.1% 　　Penicillin G <0.1% 　　Sulfamethazine <0.1% 　
　   H、再现性 　　针对氯霉素检测试剂盒精密度测试，重复6次，所得不同浓度尺度溶液的吸光值变异系数(%CV). 　
　   I、回收率 　　生乳(添加1.0ppb)104~117% 　　蜂蜜(添加0.3ppb)90~110% 　　虾及鱼肉(添加0.5ppb)95~110% 　　鸡肉(添加0.5ppb) 90~120% 　　血清(添加0.5ppb)100~120% 　　内脏(添加1.0ppb) 100~120% 　　饲料(添加2.0ppb)80~110% 　
　  氯霉素检测试剂盒 　　
      简介 　　
     氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素。因为其具有效果好以及价格低廉等长处，目前已被普遍应用于各类家禽、家畜、水产品及蜂制品的各种传染性疾病的治疗。然而氯霉素有其严峻的副作用,它会按捺人体骨髓的造血功能，从而引起再生障碍性贫血和粒细胞缺乏症。目前，我国已禁止其使用。 　　简化了样品处理方式，使用简便，省时省力省钱，整个操纵过程不到90分钟。本产品检测范围广(鸡肉、鱼、虾、蟹、牛奶、血清、肌肉、组织、饲料与蜂蜜等)，回收率为80%－120%，敏捷度可达到0.05ppb. 　　
　  1． 样品提取利便快捷。
　 2． 90分钟得到结果。
　  3． 只需基本的实验室设备。 　
　 4． 操纵职员只需最基本的实验知识。 　
　　1． 结果重现性高。
　　2． 精确至0.05ppb。 　　
     3． 与其它抗体的交叉反应率极低。 　　
     产品规格 　　
      包装：每包96孔 　
　   敏捷度: 0.05ppb 　　
      测试区间：0.05ppb－4.05ppb 　
　   检测时间：80分钟(提取后)
　　储存前提：2-8℃ 　　
      氯霉素快速检测试纸（48条/盒）
   型号:DP1 　
　氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素。因为其具有效果好以及价格低廉等长处，目前已被普遍应用于各类家禽、家畜、水产品及蜂制品的各种传染性疾病的治疗。然而氯霉素有其严峻的副作用,它会按捺人体骨髓的造血功能，从而引起再生障碍性贫血和粒细胞缺乏症。目前，我国已禁止其使用。 　
　氯霉素检测试纸，简化了样品处理方式，使用简便，,整个操纵过程只须15分钟。敏捷度可达到3ppb 　　
    其原理为：在试剂片的 ‘中心判读区’喷有2条隐形的线,上面一条为对照线(C线)，下面一条为测试线(T线)。若样品中氯霉素的浓度小于3ppb，则T线呈色与C线相近；若样品中氯霉素的浓度大于3ppb，则T线将比C线浅良多或完全看不到线，也就是说，氯霉素浓度越高T线越浅。 　
　　1． 成套的装置，提供正确一致的可视的结果 　　
      2． 适于现场检测。15分钟得到结果。 　
　   3． 操纵职员只需最基本的化验知识。 　　
　　1． 结果重现性高。 　　
      2． 精确至3ppb。 　
　   3． 与其它抗体的交叉反应率极低 　　
技术支持： 　　我们为用户提供最利便、快捷、殷勤的服务。 　
　产品规格 　
　包装：每包16片 　
　敏捷度: 3ppb 　　
   检测时间：15分钟(提取后) 　
　储存前提：2-8℃ 　　
组成 　　
本试纸组可进行16次实验 　
　1、反应孔:2条16孔 　
　2、氯霉素指示剂：1瓶 　
　3、检测试纸片一筒 ：16片 　　
4、小吸管：24支 　　
5、样品混合棒：20根
　　6、10倍浓缩稀释缓冲液：1瓶 　
　试纸使用说明： 　　
A、留意事项 　　
      1、 试纸需要干燥保留，请随时确保瓶盖盖严 　
　   2、 测试环境温度>20℃即可。 　
　   3、尽量不要触摸试纸片中心在白色膜面。
　　4、本试纸使用前，需先将整套组成部门在室温中回温30分钟，以确保反应的准确性。
　　5、检测一个样品使用一个反应孔，一片测试片及一支滴管。未用完的氯霉素指示剂，可放回4℃冰箱留待下次再用。未用过的微量测试孔，隔次仍可使用。 　
　   6、结块或发臭的牛奶不适合检测。
　　7、原倍稀释缓冲液配制：用蒸馏水将10倍浓缩稀释缓冲液以1:9的比例稀释(即1mL浓缩液+9mL蒸馏水)，即可作为样品稀释液。 　
　    B、样品制备： 1.待测物为牛奶可直接进行检测。
　　2.待测物为蜂蜜，则依以下方法进行处理： 　　
以金属勺取少量待测蜂蜜样品置于火上加热至沸腾，用小细管趁热吸取样品（勿吸入气泡），以稀释缓冲液做1：3稀释。 　
　   3. 待测物为血清、则依以下方法进行处理： 　
   　a.抽取待验动物血液，离心或静置取其较透明之上层液(血清层)使用，留意不要有溶血。 　
   　b将3ml血清加入离心管中，再加入6 ml乙酸乙酯，震荡混合约30秒。 　　
      c.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上层液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
　　d.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先将残余物完全溶解后，再加入1 ml 稀释缓冲液，震荡约30秒钟。 　
　    e. 离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部门，弃掉。再吸取下层液(水层)备用。 　
　    f.若有乳化现象，请先将大部门上层液(正己烷)掏出后，再将玻璃管置入80oC水中，隔水加热约5～10分钟，可改善乳化情形。
　　4. 待测物为鸡肉或鱼、虾，则依以下方法进行处理： 　
　   a.将3克样品剪碎后放入50 ml离心管中，再加入6 ml乙酸乙酯，并以均质机均质约1分钟，再震荡约30秒。 　
　   b.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
　　c.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先将残余物完全溶解后(若未能完全溶解，可能会导致回收率降低)，再加入1ml稀释缓冲液，震荡约30秒钟。 　
　    d.离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部门，弃掉。再吸取下层液(水层)备用。 　
　     e.若有乳化现象，请先将大部门上层液(正己烷)掏出后，再将玻璃管置入80oC水中，隔水加热约5~10分钟，可改善乳化情形。
　　 5.待测物为内脏(肝、心等)，则依以下方法进行处理(5倍稀释)：
　 　同上述步骤a～d，但下层液吸出后，再以稀释缓冲液稀释5倍(即下层液100μl加 稀释 缓冲液400ul)。 　
　     6.待测物为饲料，则依以下方法进行处理(10倍稀释)： 　
　     同上述步骤a～d，但下层液吸出后，再以稀释缓冲液稀释10倍(即下层液100μl加 稀释 缓冲液900ul)。 　
　     C、操纵步骤： 　
　     (若样品不只一份，请先为样品及反应孔做好对应编号) 　　
        1.以小吸管在微量测试孔中依次加入两滴待测的样品（以小吸管吸取时，须将第一滴滴除后，再进行实验步骤）。 　
　     2.充分摇匀氯霉素指示剂，以新的滴管吸取氯霉素指示剂，滴去前两滴，加入一滴指示剂于待测样品的测试孔。 　
　     3.以手轻轻握住微孔，贴着桌面震荡使其混合平均约5分钟。 　
     　4.于每个测试孔中放入试纸片（白色端在下）。 　　
        5.静置10分钟后判读结果（判读结果时间不要超过20分钟）。 　　
        D、判读： 　
　      (因为样品经由了预先稀释，因此所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数) 　　
情形1—T线比C线深，或一样深，表示样品中氯霉素浓度低于3ppb。
　　情形2—T线比C线淡，表示样品中氯霉素浓度高于3ppb。 　
　   情形3—若C线完全没泛起，则表示测试失败。

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