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【AbMole科研】Hsa_circ_0009910致癌性环状RNA靶向卵巢癌细胞中的microRN

奥默生物技术(上海)有限公司2021年4月2日 10:15 点击:973

AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:致癌性环状RNA靶向细胞中的microRNA-145-Hsa_circ_0009910。


环状RNA(circRNA)与癌细胞表型相关。特别是,circRNA作为microRNA(miRNA)海绵来介导癌症过程。这项研究旨在确定hsa_-circ_0009910在卵巢癌细胞表型方面的作用。进行Mantel-Cox检验以分析hsa_circ_0009910与卵巢癌生存结果之间的相关性。构建了小基因报告基因,并设计了小干扰RNA,用于构建经qRT-PCR鉴定的hsa_circ_0009910失调和miR-145上调的细胞。通过CCK和Transwell监测增殖和运动活动。 Western印迹用于定量细胞周期蛋白D1,CDK4,CDK6,MMP-2,MMP-9,IκBα,p65,Notch1,Hes1和Hes5。使用生物信息学工具预测了miRNA的靶标,并使用qRT-PCR和双荧光素酶报告基因检测法确认了miRNA靶标。Hsa_circ_0009910与卵巢癌患者的不良预后相关。 hsa_circ_0009910促进卵巢癌细胞表型,而沉默hsa_circ_0009910则抑制卵巢癌细胞表型。Hsa_circ_0009910沉默是导致预测的miRNA靶标上调的原因。其中,miR-145被确认为miRNA靶标,并受hsa_circ_0009910负调控。miR-145使hsa_circ_0009910在增殖和运动型表型以及NF-κB和Notch的活跃状态中的生物学功能无效。表示不良预后的Hsa_circ_0009910通过抑制卵巢癌细胞中的miR-145诱导增殖性和活动性表型。

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CCK-8试剂盒(Abmole, M4839) 为MTT 法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

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Figure 2. Overexpression of hsa_circ_0009910 caused changes in cellular phenotypes associated with proliferation and motility.


本研究中,使用CCK-8试剂对转染后的细胞活性进行检测,结果显示,hsa_circ_0009910过表达增加了SKOV3细胞的活力,而当hsa_circ_0009910表达被其siRNA阻断时,活力降低。


鸣谢:Ying Li, et al. Cell Cycle. 2020 Aug;19(15):1857-1868.
(来源: 奥默生物技术(上海)有限公司


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