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冻存细胞时,还在坚持缓冻原则吗?

友康恒业生物科技(北京)有限公司2017年10月18日 10:59 点击:1596

一、我们先来说说何为缓冻:
       缓冻即为冻存细胞时,要程序降温——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 过夜,次日投入液氮内。
二、那为什么要进行缓冻呢?
       其实所谓的缓冻是一般使用传统冻存液冻存过程中需要程序降温。
       传统的冻存液,一般由胎牛血清、DMSO及基础培养基等组分组成。冻存保护的DMSO组分,在进入细胞后结合细胞内部的水份,降低冰点,防止细胞在冷冻过程中形成冰晶对细胞造成损害。
       但是DMSO只能在细胞内部保护细胞,细胞外部没有保护,水结冰晶会在细胞膜外部受到损伤,为了防止冰晶过大,使用时必须采用程序降温的方式,才可保证细胞复苏的成功率(80%以上)。
       若不采用程序降温的形式,有些冻存的细胞,甚至复苏成功率为0。
三、友康无血清细胞冻存液帮您轻松冻细胞!


       友康生物无血清细胞冻存液,为多种保护剂组合,在细胞内外进行双重保护,大大提高了细胞复苏存活率。无血清细胞冻存液,含多种保护剂成分。
       一些保护剂,易于穿透细胞,避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞,同时另一
些保护剂不能穿透细胞,但可以在冰晶形成之前,优先结合细胞外的水分子,降低细胞外溶液的电解质浓度,减少阳离子进入细胞的数量,我公司无血清细胞冻存液,为多种保护剂组合,在细胞内外进行双重保护,大大提高了细胞复苏存活率。

附:

1.传统细胞冻存液与无血清细胞冻存液使用方法对比

使用步骤传统冻存液无血清冻存液
产品保存条件分装成小管,-20度(避免反复冻融2-8度保存,无需分装
冻存过程程序降温(4度30min, -20度1h ,-80度过夜,次日投入液氮内)直投-80度冰箱过夜,次日入液氮
复苏过程快复苏,加新鲜培养液,离心取出保护液快复苏,加新鲜培养液,离心取出保护液

 

2.冻存后细胞复苏数据对比

细胞系名称

传统冻存液

YOCON冻存液

A549(肺癌)

85%

95%

MDCK(犬肾细胞)

90%

95%

3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)

90%

93%

hepG2(肝癌细胞)

86%

93%

MK2 (恒河猴肾细胞)

88%

95%

杂交瘤细胞

80%

90%

MSC(间充质干细胞)

80%

95%

单个核细胞(原代分离)

50%

90%


(来源: 友康恒业生物科技(北京)有限公司


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