国内国外黑热病的检测方法对比结论!

间接荧光抗体试验(IFAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、直接凝集试验(DAT)、间接血球凝集试验(IHA)、对流免疫电泳(CIE)、重组抗原(rK39)试纸条、酶联免疫印渍技术等。

国内外一致认为IFAT是诊断黑热病较敏感的一种方法，李国茹等用IFAT共检查l9例病人，其中l0例骨位穿刺确诊的现症病人均为阳性(1：160～1：10 240)，5例疑似病人亦阳性(1：4～1：5 120)，经锑剂治疗后痊愈，说明IFAT 可较早发现病人，能及时和准确地反映疫区人群中黑热病的流行现状。

而ELISA则是一种比较快速的检测方法，王秀珍等建立的快速ELISA法，对37例临床症状疑似黑热病者，同时作骨滋穿刺和耳垂采血作快速ELISA，二者阳性符合率100%，其中3例骨穿阴性，快速ELISA阳性的病人，经再次作骨穿和复查原骨翻片均查见利杜体。这不仅为有临床症状而骨穿阴性者提供较可靠的辅助诊断．而且可用于现场进行传染源监测和流行病学调查。

为了检测更加方便，一些学者研发了试纸条。2005年李国茹等通过rK39试纸条与病原学两种诊断黑热病方法的比较，判断rK39试纸条检测黑热病的可靠性，结果显示应用rK39试纸条诊断黑热病现症患者的阳性检出率可达96.07% ，与病原学方法相比，检出率明显提高(P<0．01)。

利用IFAT和ELISA方法检测具有较高的临床价值，但这两种方法常和某些疾病存在交叉反应，故使用上有一定的局限性。鲍勇等利用免疫印渍技术分析杜氏利什曼前鞭毛体蛋白分子量，并用其蛋白带分别和黑热病人血清及其他血清进行酶联免疫印渍试验，结果显示63ku的特异性和灵敏度都非常高，仅和麻风病人有轻度交叉反应，这证明63ku是杜氏利什曼前鞭毛体特异性抗原，该诊断方法较简单，结果较可靠，和麻风病人的轻度交叉反应易从临床上予以区别。有学者认为39ku也是杜氏利什曼前鞭毛体特异性抗原，胡孝素等对健康人、非黑热病病人和11例确诊黑热病病人的血清进行不同程度的稀释，并将表达杜氏利什曼原虫39ku抗原的大肠埃希菌稀释到达1：400时，全部黑热病患者的血清均能识别重组杜氏利什曼原虫39ku抗原，具有临床诊断价值 。

国外黑热病的诊断方法
尿样直接凝集试验、免沉淀试验、蒸馏水试验，醛凝试验和尿斯锑巴明试验、制动试验等。以往诊断黑热病的方法是血清直接凝集试验和尿样酶联免疫吸附试验.

在英国Islain M Z等研究中介绍它们的敏感度分别为91.0% ，93.3%，EI ISA特异度为97.3%。Islam MZ与日本Aichi医科大学寄生虫学教研室及其他几个大学共同研制出一种新型的以尿样为标本的直接凝集试验，结果显示，ELISA及尿样凝集试验的特异度无显著性差异，由于该法与以往的血清直接凝集试验和尿样酶联免疫吸附试验相比，在检测条件上具有简便易行、无创伤等诸多优越性，而且省去了ELISA所需的仪器设备，因此，对于诊断黑热病尤其是野外诊断具有非常重要的意义。

还有一种常被用于检测黑热病的方法是免疫沉淀法。法国学者在常有黑热病的地中海沿岸地区广泛应用其对人和犬的进行调查，根据其研究，在确诊为黑热病的病例中，呈现沉淀反应的阳性率为64%～95%。醛凝试验也是一种简单快速的诊断黑热病的方法，其方法是在病人的1mL血清内加1滴乙醛福尔马林，在几分钟内出现的白胶状物就算是阳性反应。在疾病治愈后阳性反应就消失，而消失的原因与球蛋白滴定度的降低有密切的关系。这种试验为非特异性或弱特异性，因为由其他原因所引起的高丙种球蛋白贫血病也常出现阳性反应，因此不建议使用该方法诊断黑热病。

国外还曾有人研究应用制动试验检测黑热病，有学者曾报告在皮肤利什曼病人的血清中含有制动抗体。但是，这个报告值得怀疑，因为在他们的试验中曾加入一种补体，而这种补体的一个组成部分很可能就是正常血清中的一种使利什曼原虫前鞭毛体不动的热不稳定因素。所以这种试验在目前还没有被广泛应用。

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